基于超聲測(cè)量大鼠頸總動(dòng)脈血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)的研究

帕斯帕克是一種發(fā)展性神經(jīng)損傷性疾病。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)偏頭痛的發(fā)作與腦血流量的變化及血液流變學(xué)改變有關(guān),臨床針刺足三陽經(jīng)井穴對(duì)偏頭痛具有很好的療效,但作用機(jī)制不詳。本研究旨在通過制作偏頭痛動(dòng)物模型,采用與臨床相似的方法對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行干預(yù),并應(yīng)用超聲觀察針刺前后頸總動(dòng)脈血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)的變化,探討針刺足三陽經(jīng)井穴對(duì)腦血流量及血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響。參照以往研究,本研究通過觀察大鼠頸總動(dòng)脈血流量間接觀察腦血流變化。1材料表面1.1飼養(yǎng)及飼養(yǎng)管理健康雌性成年SD大鼠24只,購自中國科學(xué)院。每籠飼養(yǎng)6只,室內(nèi)飼養(yǎng),通風(fēng)良好,食物和水充分給予。實(shí)驗(yàn)前12h自由進(jìn)水,禁食,實(shí)驗(yàn)前隨機(jī)分組。1.2藥物、試劑、實(shí)驗(yàn)一硝酸甘油注射液(北京益民藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字H11020289),對(duì)乙酰氨基比林(必理通,中美天津史克制藥有限公司)。1.3儀器采用太盛超聲診斷儀,探頭頻率7.5~10MHz,深度、增益根據(jù)個(gè)體情況調(diào)節(jié),彩色增益調(diào)節(jié)以不產(chǎn)生混疊為準(zhǔn)。2方法2.1成模成功提示采用文獻(xiàn)中的方法造模,予SD大鼠皮下注射硝酸甘油注射劑,按10mg/kg,注射1次,復(fù)制實(shí)驗(yàn)性偏頭痛模型,大鼠出現(xiàn)雙耳發(fā)紅、前肢頻繁搔頭、爬籠次數(shù)半小時(shí)內(nèi)≥5次,提示造模成功。2.2模型總成模和必理通組將24只SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、必理通組、針刺組4組,每組各6只。對(duì)模型組、必理通組、針刺組進(jìn)行造模,空白組和模型組不予治療,針刺組于造模后30min給予針刺,造模成功后30min將其固定在大鼠固定器上,以三棱針點(diǎn)刺雙側(cè)厲兌、足竅陰、至陰穴,并用手?jǐn)D壓,擠出血3~4滴,使大鼠固定10min。必理通組造模后30min予必理通,以10mg/kg灌胃。所有大鼠循環(huán)實(shí)驗(yàn)3次,隔周實(shí)驗(yàn)1次,共6周完成。2.3雙側(cè)頸總動(dòng)脈將大鼠以水合氯醛腹腔麻醉后背部固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,去毛,充分暴露頸部,應(yīng)用7.5~10MHz高頻線陣探頭觀察大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈。測(cè)量頸總動(dòng)脈內(nèi)徑時(shí)采用二維模式,并在圖像放大后測(cè)定血管內(nèi)壁間距。測(cè)量血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)時(shí),采用多普勒模式,取樣容積與內(nèi)徑大小一致,并作角度矯正。2.4動(dòng)力學(xué)參數(shù)通過超聲觀察大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈,通過二維超聲測(cè)量頸總動(dòng)脈直徑,通過彩色多普勒觀察血流,其血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)包括:收縮期峰值流速(Vs)、舒張末期流速(Vd)、平均流速(Vm)、搏動(dòng)指數(shù)(PI)、阻力指數(shù)(RI)、心率(HR),并計(jì)算頸總動(dòng)脈血流量、收縮期峰值流速/舒張末期流速(Vs/Vd)。計(jì)算公式為血流量=Vm×A,A=[(直徑/2)2×PI]×π。2.5比較方法采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料應(yīng)用(ue0af±s)表示,多組間比較采用單因素方差分析(one-wayANOVA),方差齊選用LSD法,方差不齊選用DunnettT3,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3結(jié)果3.1組雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流量比較與空白組比較,必理通組、針刺組雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流量均明顯升高(P<0.01),模型組雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流量輕度升高(P<0.05)。與模型組比較,針刺組雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流量明顯升高(P<0.01)。與必理通組比較,針刺組右側(cè)頸總動(dòng)脈血流量升高(P<0.01)。見表1。3.2兩組雙側(cè)頸總動(dòng)脈pi值比較與空白組比較,模型組、必理通組、針刺組雙側(cè)頸總動(dòng)脈PI數(shù)值升高(P<0.01)。與必理通組比較,針刺組右側(cè)PI升高(P<0.01)。見表2。3.3各組總動(dòng)脈直徑、vs、vd、mv、ri、vs、vd和mrp各組頸總動(dòng)脈直徑、Vs、Vd、Vm、RI、Vs/Vd及HR比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4超聲檢查頸總動(dòng)脈血流量的方法優(yōu)缺點(diǎn)世界衛(wèi)生組織(WHO)提出,偏頭痛與四肢癱瘓、精神障礙和癡呆均已成為最嚴(yán)重的慢性功能障礙性疾病。但對(duì)于偏頭痛的發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明,主要有血管源學(xué)說、神經(jīng)源學(xué)說、神經(jīng)學(xué)說等不同假說。本研究以血管源學(xué)說為理論基礎(chǔ),采用與臨床相似的方法對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行干預(yù),并通過超聲觀察治療前后頸總動(dòng)脈各項(xiàng)血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)變化,從血液動(dòng)力學(xué)方面初步探討針刺足三陽經(jīng)井穴對(duì)硝酸甘油誘發(fā)偏頭痛的治療作用及作用機(jī)制。有研究表明用頸部超聲檢查評(píng)測(cè)腦血流量是可行的,測(cè)值是可信的。頸總動(dòng)脈血流是腦血流前循環(huán)的重要組成部分,因此通過檢測(cè)頸總動(dòng)脈血流的變化,可以在一定程度上反映腦血流的變化。在以往研究中,測(cè)定動(dòng)物腦血流量多為開顱后應(yīng)用血流量儀器或微循環(huán)圖像處理系統(tǒng)測(cè)量,盡管數(shù)據(jù)基本可信,但操作復(fù)雜、有創(chuàng)。相對(duì)于上述方法,應(yīng)用超聲檢查頸總動(dòng)脈的方法優(yōu)點(diǎn)在于簡便、易行、無創(chuàng)。本研究中,與模型組比較,針刺組頸總動(dòng)脈血流量明顯增高。偏頭痛病因復(fù)雜,血管收縮和舒張功能異常可導(dǎo)致頭痛,以往研究認(rèn)為腦內(nèi)血流速度異常是偏頭痛發(fā)作的主要病理基礎(chǔ)。而本研究結(jié)果顯示,血流流速變化并不是偏頭痛發(fā)作和影響針刺治療偏頭痛的主要影響因素,而血流量增加在針刺組比較顯著。造成研究結(jié)果差異的原因可能在于本研究對(duì)象為顱外大動(dòng)脈,而相關(guān)研究對(duì)象多為顱內(nèi)動(dòng)脈。在有關(guān)偏頭痛的機(jī)制中,神經(jīng)遞質(zhì)可能起到關(guān)鍵作用,治療后腦血流量增加可能會(huì)加快神經(jīng)遞質(zhì)的代謝,從而緩解頭痛。本研究同期測(cè)量大鼠血的一氧化氮(NO)、五羥色胺,并且結(jié)果顯示針刺組與模型組比較,相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)明顯減少,初步印證了上述推測(cè)。針刺組腦血流量增加,與以往文獻(xiàn)報(bào)道相似,作用機(jī)制可能是刺激局部各層組織的外周神經(jīng)的感覺末梢,經(jīng)過神經(jīng)的傳入系統(tǒng)使針感反射性作用于神經(jīng)系統(tǒng)的各級(jí)水平,調(diào)動(dòng)中樞神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)調(diào)質(zhì),激發(fā)機(jī)體潛在的自我調(diào)節(jié)機(jī)制,最終調(diào)整腦血管壁的自主神經(jīng)功能,改善血管的舒縮功能,改善腦血流量,增加病灶組織的血氧供應(yīng)量,從而緩解偏頭痛,起到鎮(zhèn)痛作用。本研究中應(yīng)用頸總動(dòng)脈血流量總體評(píng)估腦血流量,較以往單一測(cè)定顱內(nèi)血管流速更全面、可信,能總體評(píng)估腦血流量變化,因?yàn)槠^痛患者可能為顱內(nèi)某一局部血管(大腦前、中、后動(dòng)脈)血流動(dòng)力學(xué)異常,單一血管的流速變化并不能代表腦血流量的總體改變。本研究中模型組血流量輕度增高,考慮與造模使用硝酸甘油擴(kuò)張頸總動(dòng)脈有關(guān),血管擴(kuò)張能使血流量增加,而治療后血流量顯著增加,能使神經(jīng)遞質(zhì)代謝增快,初步推測(cè)偏頭痛治療中神經(jīng)遞質(zhì)變化發(fā)揮了重要作用,血流量增加僅可能是相關(guān)因素。PI反映血管搏動(dòng)能力,PI越大說明血管舒縮的幅度越大。在本研究中,針刺組與必理通組比較,右側(cè)PI數(shù)值升高,而左側(cè)沒有。說明,針刺在影響頸總動(dòng)脈搏動(dòng)功能方面有一定意義