用紫外分光光度法測定總生物堿含量黨院霞，李杏花，楊春軍，白妙林，趙彩玉（甘肅中醫學院，藥學院，730000）摘要目的：歸納總結用紫外可見分光光度法測定中藥中總生物堿含量。方法：查閱近二十年有關用紫外可見分光光度法測定單個藥材，中藥復方中總生物堿含量的文獻及資料。結果：含生物堿藥材及配方較多，用紫外可見分光光度法及紫外可見與其它方法聯用測定其含量取得了廣泛的應用，并取得了良好的效果。結論：用紫外可較準確測定藥材及配方中生物堿含量，在以后的研究中應將其更多的與其它方法聯用測定藥材及配方中生物堿及其它成分含量。關鍵詞生物堿紫外可見分光光度法研究進展生物堿是存在于自然界（主要為植物，但有的也存在于動物）中的一類含氮的堿性有機化合物，有似堿的性質，所以過去又稱為贗堿。大多數有復雜的環狀結構（生物堿的一般結構、、、），氮素多包含在環內，有顯著的生物活性，是中草藥中重要的有效成分之一。紫外分光光度法是通過可見-紫外分光光度計（用法）,產生可見光,紫外線照射某些不同物質,不同濃度的（缺東西）吸收光譜的不同,可獲得不同吸收光譜的曲線,同時它們的吸收峰數值與濃度成正比關系,遵循朗伯-比爾定律,不僅能鑒別物質及測定物質的含量,而且能和其他方法配合,研究物質的組成。生物堿具環狀結構，有一定的旋光性和吸收光譜。具有光學活性，所以大多數研究者用紫外可見分光度法測定中藥及復方中生物堿含量。紫外分光光度法在單味藥生物堿含量測定中的方法在遵循朗伯比爾定律的基礎上，紫外分光光度法可以采用多種研究方法，如【單還是雙】雙波長、導數、顯色及層析一（與）紫外聯用等方發（法），對中藥中生物堿含量的分析。1.1單波長法陸世惠等[[]]用Lambda25型紫外/可見分光光度計測定兩面針中總生物堿的含量。結果表明，兩面針提取液在329nm處有最大吸收，在3～8μg/ml有良好的線性范圍，r＝0.9991(n=6)，氯化兩面針堿的平均回收率為99.5%，RSD＝2.32%(n＝5)。精密度考察中RSD＝2.01%(n＝5)。重復性考察中RSD＝2.20%(n＝5)，表明重復性較好。穩定性試驗中RSD＝2.14%(n＝8)，結果顯示在24h內基本穩定。從以上指標來看用紫外分光光度法測定兩面針中總生物堿的含量的方法較好。但是也有局限性。在單波長法中[]劉志才等[[][]1.2顯色比值法張菊紅等[[]]將對照品蒺藜皂苷FSA-1和蒺藜總皂苷分別溶于硫酸-甲醇(7∶3)溶液中，于60℃作用15分鐘后,用分光光度法在319nm處測定蒺藜總皂苷的含量,濃度與吸收值之間有良好的線性關系r=0.9996,平均回收率為98.22%,RSD=1.61%。通過測定6批蒺藜全草中總皂苷的含量，表明本法簡單，重現性好，結果準確。王宇等[[[][]1.3導數法由于同一種中藥或中成藥所含化學成分的質和量基本相同，故其導數光譜應有一定的相似性，而由于導數光譜具有可消除干擾、分辨率高的特點，所以不同種中藥或中成藥的導數光譜因所含化學成分質和量的（缺東西）不同而有差異，故可作為中藥和中成藥質量鑒定的手段之一。黃淑彰等[[][]呂定剛[[]]使用UV--2000紫外-可見分光光度法測定制川烏、制草烏、制附子中總生物堿的含量。以239nm--241nm處的一階導數紫外光譜值為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。將制備好的樣品按照上述方法測定一階導數紫外光譜值，計算生物堿的含量。在陰性液干擾的考察中發現在烏頭堿的最大吸收波長處陰性液有一定的吸收，如果直接用零階吸收光譜測定制川烏、制草烏、制附子中總生物堿的含量，受陰性液的干擾會給測定的結果帶來一定的誤差，而在一階導數光譜中，在239nm處陰性液的吸收基本為零。因此，可以用一階導數光譜法來消除陰性液的吸收干擾。實驗表明，可以選定波長239nm--241nm進行一階導數光譜計算。濃度在1--5μ[]1.4層析-紫外聯用梁秀群[[]]采用薄層板將槐果堿分離出來，在206nm槐果堿有最大紫外吸收。在2.16--10.8μg/ml范圍內有良好的線性關系，r=0.9999，提取回收效率為98.2％，RSD為0.57[]常軍民等[[]]采用薄層分離新疆鼠尾草中6,7-去氫羅列酮,于330nm處采用紫外分光光度法測定其含量，含量為0.37%，在10～15μg的范圍內具良好的線性關系，r=0.9988；平均回收率為98.3%，RSD=2.58%。林輝[[][][]2.中藥復方及配伍中總生物堿含量測定2.1中藥復方中總生物堿含量測定隨著對中藥成分研究越來越多，更多的學者由單味藥材成分研究轉而對中藥復方及藥材配伍的研究。生物堿作為中藥中有效成分，具有多方面的功效，所以對中藥材及復方中生物堿含量測定是必須的。2.1.1紫外可見分光光度法單用測定復方中生物堿含量通過紫外可見分光光度法，建立標準曲線可以對復方中總生物堿含量進行較準確的測定,一系列研究均表明該方法準確，可靠。冉海琳等人[[]]建立了測定川烏、草烏中酯型生物堿含量的紫外分光光度法。史亞軍[[]]等人建立了測定骨刺消痛膠囊中酯型生物堿含量的紫外分光光度法，并且程麗梅[[]]利用紫外分光光度法對骨刺消痛膠囊中酯型生物堿含量進行了限度研究，這些研究均表明用紫外分光光度法測定復方中總生物堿含量時專屬性強，且穩定性好。劉冰[[]]等人利用紫外可見分光光度計對駱駝蓬總生物堿顆粒劑中總生物堿含量進行了測定.王瓊珺,李素云,李孝棟[[][][][][][][]并且可以用紫外可見分光光度法比較用不同方法制得的總生物堿含量的比較。例韓建偉[[]]等人以黃連生物堿提取量為考察指標,采用紫外分光光度法測定黃連生物堿含量,比較了黃連與其余藥材混煎及分煎合并兩種工藝對舒胃顆粒中黃連生物堿含量的影響。結果顯示分煎合并工藝中黃連生物堿損失量明顯少于混煎工藝。這些研究都為更好制得中藥制劑使其總生物堿含量最大提供了最佳工藝。楊玉琴，梁光義，秦利芬[[]]等人研究四逆湯的湯劑，經方顆粒，單方顆粒等三種劑型中各自生物堿含量的測定，結果顯示用紫外分光光度法準確、可靠，可用于四逆湯總生物堿的含量測定。戴開金，羅奇志[[]]等人對葛根芩連湯劑和微丸中總生物堿進行了含量測定，該法簡單，可靠，以葛根芩連微丸中總生物堿含量最高。張學農[[[][][][][]2.1.2紫外可見分光光度法與其它方法聯用測定總生物堿含量隨著研究的深入，更對的科學家用紫外分光光度法和其它方法聯用測定復方中總生物堿含量。梁秀群[[]]用薄層-紫外分光光度法對克瀉靈膠囊總生物堿中對測定的槐果堿含量進行了效果分析，采用一定的展開劑將槐果堿在硅膠板上進行展開，在熒光下定位，用紫外可見分光光度法測定其含量，結果顯示這兩種方法聯用準確，可靠，重現行好，可用于該制劑的質量控制。郭琪，王德鸞[[]]等人采用薄層色譜-紫外分光光度法聯用的方法,對潤膚膏中黃連所含小檗堿進行了含量測定，結果是可靠的。曲仕明，王集會，高世杰[[]]等人采用柱色譜-紫外分光光度法測定，以吸收系數法按鹽酸小檗堿計算了總生物堿的含量。孔廣英，王艷秋[[][][][][][]2.2中藥配伍中總生物堿含量測定用紫外分光光度法測定不同藥物配伍后總生物堿含量的變化以及對藥物毒性的影響，進而得出不同藥物配伍后的意義。陳佳江，熊敏[[]]等人研究了附子和干姜配伍后對附子中總生物堿含量的影響，李曉宇，馮群[[]]等人研究了復方配伍對益母草急性毒性和總生物堿含量影響。結果均顯示不同藥物和含總生物堿的藥物配伍后均可使總生物堿含量增加。葉富強,徐頌芬[[][][][][]結論中藥中所含成分繁多，準確測定中藥及中藥復方中總生物堿含量對中藥制劑含量限制級優化制劑工藝具有重大意義。單用紫外可見分光光度法及紫外可見分光光度法與其它方法聯用可較準確測定總生物堿含量。眾多研究皆證明紫外可見分光光度法在測定總生物堿時準確，可靠，重現性好，可廣泛用于總生物堿含量的測定。展望：紫外分光光度法作為藥物的一種常用分析方法,尤其是在近十幾年中,其方法學的研究已經得到普遍的認可，它在總成分中應用廣泛，并且可以很好地測定。它在單一成分的測定中也具有很好的穩定性、重現性，而且快速、簡捷，結果準確。對于成分復雜的藥物，由于儀器自動化，數據計算機化處理，應用紫外光光度法進行多組分含量測定更加簡便。總之，隨著現代科學各個領域的不斷發展，新技術新方法不斷應用到藥物分析中來，因此藥物分析今后的發展要向著：系統篩選自動化分析儀器的應用，集分析操作自動化，數據處理電子計算機化，達到快速、高效、特異性強、重現性好的目的。參考文獻：[1]陸世惠，龍盛京，UV測定兩面針提取液中總生物堿的含量，西北藥學雜志2008,23（6）：350-352[2]劉志才,畢鴻亮.應用紫外分光光度法測定苦參總堿的含量.黑龍江醫藥,2001,14(3):174[3]張菊紅,王志偉,金吉琴,等.蒺藜全草中總皂苷含量的測定.中國臨床藥學雜志,2001,10(4):244[4]王宇,張明,于超,等.紫外分光光度法測定不同產地半夏藥材中生物堿的含量.重慶中草藥研究,2001,43:34[5]黃淑彰,黎小偉.厚樸酚與和厚樸酚含量測定方法.中國藥師.2002,5(8):495[6]呂定剛，采用一階導數紫外分光光度法測定制川烏、制草烏、制附子中總生物堿的含量，《當代醫藥論叢》，2014,12（2）：47--49[7]梁秀群，薄層-紫外分光度法對克瀉靈膠囊總生物堿中槐果堿含量測定的效果分析，主管藥師，中國臨床新醫學，2010.2,3（2）：179--181[8]常軍民,堵年生,王青,等.紫外分光光度法測定新疆鼠尾草中6,7-去氫羅列酮的含量.中成藥,2001,23(8):600[9]林輝.中藥高良姜總黃酮的含量測定.時珍國醫國藥,2001,12(6):486[10]冉海琳，吳佳，楊惠蓮.紫外分光光度法測定雙虎腫痛寧噴霧劑中酯型生物堿含量[J].中國藥業:2007，16（21）,29.[11]史亞軍,唐志書,崔春利.骨刺消痛膠囊中酯型生物堿含量研究[J].云南中醫中藥雜志：2009,4（30）,50-51.[12]程麗梅.骨刺消痛膠囊中酯型生物堿含量限度研究[J].中國醫藥指南：2010,8（29）,216-217.[13]劉冰，買爾旦·馬合木提,葛繼紅.駱駝蓬總生物堿顆粒劑的制備及含量測定[J].新疆醫科大學學報：2003,26（1）,81-82.[14]王瓊珺,李素云,李孝棟.桃紅四物緩釋片中總生物堿的含量測定[J].齊齊哈爾醫學院學報：2010,31（18）,2937-2938.[15]普建軍，莊學潮.紫外分光光度法測定外用傷科黃水中生物堿含量[J].時珍國藥研究：1994,6（4）,22.[16]韓建偉，蔣偉，王佳馨，周穎.兩種工藝對舒胃顆粒中黃連生物堿含量的影響[J].中國藥師：2007,10（9）,889-884.[17]楊玉琴，梁光義，秦利芬，谷博，賀祝英，曹佩雪,3種劑型四逆湯中總生物堿的含量研究[J].安徽農業科學：2011，39(30)，18526－18527.[18]戴開金，羅奇志，羅佳波，譚曉梅，馬安德.葛根芩連方藥中黃連總生物堿的含量測定[J].第一軍醫大學學報:2004,24(4)，437-438.[19]張學農，孫殿甲，賀冰，托乎提.駱駝蓬總生物堿膠囊劑的處方篩選及溶出度測定[J].中成藥：1998,20（8）,5-7.[20]楊青，張璐.通宣理肺方不同劑型中總黃酮和生物堿含量測定[J].遼寧中醫藥大學學報：2013,15（12）.[21]梁秀群.薄層-紫外分光光度法對克瀉靈膠囊總生物堿中槐果堿含量測定的效果分析[J].中國臨床新醫學：2010,3（2）,179-181.[22]郭琪，王德鸞.潤膚膏生物堿含量測定實驗研究[J].時珍國醫國藥：1998，9（4）,360.[23]曲仕明，王集會，高世杰.三種產地黃連上清丸中總生物堿含量的比較研究[J].中藥園地:2012，31(6)，436.[24]孔廣英，王艷秋.柱層析一紫外分光光度法測定小兒牛黃清心散中黃連總生物堿的含量[J].海峽藥學:1999，11(1)，29-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