1、高效液相色譜法測定金錢草顆粒中槲皮素和山奈素的含量【關鍵詞】金錢草顆粒；,槲皮素；,山奈素；,含量測定；,高效液相色譜法摘要：目的建立用高效液相色譜(HPL)法測定金錢草顆粒中槲皮素和山奈素含量的方法。方法采用DalianEliteHypersilDS252004.6柱，以甲醇0.4%磷酸溶液4555為流動相；流速：1.0lin1；檢測波長為360n。柱溫：30。結果該法線性關系良好，槲皮素平均回收率為101.2%，RSD為1.14%；山奈素平均回收率為100.1%，RSD為1.33%。結論該方法簡便、準確、重現性好，可用于該制劑的質量控制和評價。關鍵詞：金錢草顆粒；槲皮素；山奈素；含量測定；

2、高效液相色譜法DeterinatinfQueretinandKaepferlinHerbaLysiahiaeGranulesbyHPLAbstrat：bjetiveTestablishanHPLethdfrthedeterinatinfqueretinandkaepferlinHerbaLysiahiaeGranules.ethdsDalianEliteHypersilDS252004.6lunasused.Thebilephaseasethanl-0.4%phsphriaidslutin(4555).Theflrateas1.0lin1；Thedetetinavelengthas360n；T

3、helunteperatureas30.ResultsThelinearrelatinasgd.Theaveragereveryfqueretinas101.2%ithRSD=1.14%；Theaveragereveryfkaeferlas100.1%ithRSDas1.33%.nlusinTheethdissiple,aurateandithagdreprduibilityandanbeusedfrthequalityntrlfthegranules.Keyrds：HerbaLysiahiaeGranules；Queretin；Kaepferl；Deterinati；HPL金錢草顆粒為單味藥

4、制劑，具有清利濕熱，通淋消腫的成效。用于熱淋，沙淋，尿澀作痛，黃疸尿赤，癰腫疔瘡，毒蛇咬傷，肝膽結石，尿路結石等癥的治療。所含的槲皮素和山奈素為主要有效成分。本方收載于?國家中成藥標準匯編?中成藥地方標準上升國家標準局部內科、肝膽分冊標準中無含量測定方法，不利于制劑的質量控制。本文參考有關文獻1,2，采用HPL法測定金錢草顆粒中槲皮素和山奈素的含量，別離度好，回收率高，能有效控制金錢草顆粒的含量。1儀器與試藥1.1儀器美國aters1525高效液相色譜儀、2487雙波長紫外檢測器，Breeze色譜工作站，AY120電子天平日本島津公司，AB265S電子天平日本島津公司。1.2試藥槲皮素對照品購

5、自中國藥品生物制品檢定所，批號100081202206，含量97.3%,120枯燥4h后使用；山奈素對照品購自中國藥品生物制品檢定所，批號：110861202204,樣品由重慶某藥廠提供批號：040509，040603，040401；甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純。2方法與結果2.1對照品溶液的制備精細稱取120枯燥4h的槲皮素對照品10.41g，置100l容量瓶中，加80%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每毫升含槲皮素101.2893g。精細稱取山奈素對照品10.25g，置100l容量瓶中，加80%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每毫升含山奈素102.5g。作為對照品儲藏液。

6、2.2樣品溶液的制備取本品10袋的內容物，混勻，研細，精細稱取1g，置錐形瓶中，精細加80%甲醇50l，稱定重量，超聲30in，放冷，再稱定重量，用80%甲醇補足減失的重量，濾過，精細量取續濾液25l，精細參加鹽酸5l，置90水浴中加熱水解1h，取出，迅速冷卻，轉移置50l容量瓶中，用80%甲醇稀釋置刻度，搖勻，即得。轉貼于論文聯盟.ll.2.3色譜條件與系統適應性實驗采用十八烷基硅烷鍵合硅膠填充色譜柱；以甲醇0.4%磷酸溶液4555為流動相；流速1.0lin1；檢測波長為360n。理論板數以槲皮素峰計算大于6000，主峰與相鄰雜質峰之間的別離度大于1.5。結果見圖1。2.4線性關系考察分別精

7、細汲取槲皮素對照品儲藏液1.0l，分別置10，25，50，100，200l容量瓶中，各精細參加山奈素對照品儲藏液5.0l，加80%甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成系列混合對照品溶液。按上述色譜條件分別進樣測定，以峰面積積分值A為縱坐標，以槲皮素和山奈素的濃度gl1為橫坐標，其標準曲線回歸方程和線性范圍結果見表1。表1各組分的回歸方程和線性范圍回歸方程略2.5精細度實驗精細量取上述對照品溶液10l，重復進樣5次，按上述色譜條件測定，槲皮素和山奈素峰面積積分值的RSD分別為0.50%和0.61%。2.6重復性實驗分別取同一批號批號：040509樣品各5份，照2.2樣品溶液的制備和測定方法進展測定，結果槲

8、皮素的平均含量為0.042%，RSD為1.02%，山奈素的平均含量為0.168%RSD為0.52%。2.7穩定性實驗取同一批號的供試品溶液批號：040509，每隔2h進樣1次10l，共進樣6次，按上述色譜條件分別測定，結果槲皮素和山奈素的RSD分別為1.24%和1.55%，說明供試品溶液在12h內穩定。2.8空白實驗按處方比例及工藝，制備缺金錢草的陰性制劑，再按供試品溶液制備方法制備不含金錢草的陰性對照品溶液，進樣10l測定。結果陰性對照品溶液分別在與槲皮素和山奈素對照品一樣保存時間位置未見有一樣保存時間的吸收，說明輔料對本方法測定槲皮素和山奈素的含量無干擾。見圖譜1-。2.9加樣回收率實驗取

9、含量的樣品批號：040509內容物適量，精細稱定，分別精細參加槲皮素對照品溶液101.2893gl12.0l和山奈素對照品溶液10.0l，按照供試品溶液制備項下的方法制備，依法測定，計算回收率。結果見表23。表2槲皮素回收率測定結果略表3山奈素回收率測定結果樣品重略2.10樣品測定取3批樣品，按上述測定方法進展測定，以外標峰面積法計算樣品的含量，結果見表4。表4樣品含量測定結果略3討論3.1本實驗樣品溶液的制備是參照?中國藥典?2022年版部金錢草含量測定項下供試品溶液制備的方法，因本樣品為顆粒劑，因此把回流1h改為超聲30in，經試驗證明該法提取效果較好，干擾成分較少。3.2試驗中以文獻1提供的色譜條件為根底，改變流動相的比例，通過試驗探索，金錢草顆粒中各組分可以實現較好的別離，證明該條件合適金錢草顆粒的含量測定。3.3本文建立的方法