1、對血清HBV-DNA PCR熒光定量檢測指導乙型肝炎治療的分析關鍵詞】 血清HBV-DNA, PCR【摘要】目的采用PCR體外擴增法定量檢測乙型肝炎病毒DA的載量，為乙型肝炎的治療提供參考。方法采用PCR體外擴增法定量 檢測乙型肝炎病毒DNA的載量，檢測不同病程狀態下的乙肝患者76 例，血清標本196份。其中HBeAg陽性的患者30例，血清樣木60份;HBeAb陽性慢性乙型肝炎（CHB）患者30例，血清樣木60份；接受a-干擾素治療后發生HBeAg血清學轉換的患者11例，血清樣本66份;急性乙型肝炎治愈患者5例，血清樣木10份。結果HBeAg陽性的血 清中HBV-DNA水平為8. 0X108c

2、opies/mb明顯高于HBeAg陰性患者的血清中HBVDNA水平（為60X104copies/ml）和HBeAg血清學轉換 患者的 HBV-DNA 水平(為 2. 0X103copies/inl)> 康復患者 HBV-DNA 為 陰性。結論血清HBV-DNA PCR熒光定量檢測方法可以作為判斷HBV感染不同病程的有效指標，為指導乙型肝炎診斷、治療提供參考。【關鍵詞】PCR熒光定暈檢測；乙型肝炎Management of HBV under HBV-DNA determined byfluorescence quantitative PCRLI JUN, WU Hong.The Peop

3、le's Hospital of Changzhi, Changzhi046000, ChinaAbstract Objective To study the relationship ofHBV-DNA levels in serum and the infection states of patients byfluorescence quantitative PCR method and to provide morediagnosis clinical assessment and treatment of patients withHBV Methods FQ-PCR, wa

4、s used to measure serum HBV-DNA frompatients at different courses of disease. Results A total of 196clinical serum samples were tested. In HbeAg-positivesamples, the medium serum HBV-DNA levels (8. OX 108copies/ml) wassignificantly higher than that of HBeAg-negative samples(6. 0X 104copies/ml) that

5、for patientsafter HbeAgseroconversion (2.0 X 103copies/ml). ConclusionFQ-PCR is avaluable tool for identification of differentstates of HBVinfection.Key words PCR quantitative analysis； hepatitis B血清HBV-DXA PCR熒光定量檢測作為評價HBV復制活躍性的標準方法，它對HBV感染者的評估.管理和抗病毒治療等方面的重要 性多有報道Elo HBV感染機體后，體內可發生不同程度的轉歸，對幫助治療，以制

6、訂個體化方案，了解乙型肝炎患者HBV感染情況很有 必要2。筆者于2004年廣12月對76例患者（196份標木）應用血 清HBV-DXA PCR熒光定量檢測方法進行了定量檢測，現總結資料報告如下。1資料與方法L1 一般資料 本研究檢測了 76例患者，女40例，男36例,年齡1261歲，均為我科住院患者，共提供血清樣木196份。將76 例患者分成4組，第1組為HBeAg陽性患者30例，6個月內復檢1次, 血清樣本60例。第2組為HBeAg陰性患者30例，6個月內復檢1次, 血清樣本60例。第1組和第2組患者均進行一般保肝治療3。第3 組為接受a -干擾素治療后發生HBeAg血清學轉換的11例患者2

7、, 治療過程中每月采血1次，共6次，血清樣本66份。第4組為經治愈 患者5例，6個月內復檢1次，提供血清樣木10份。1. 2 HBV相關指標測定FQ-PCRHBV-DXA試劑盒由中山大學達安基因股份有限公司生產，HBVM ELISA試劑盒由華美生物工程生產。各種檢測均嚴格按照試劑盒使用說明書操作。1.3統計學方法4組患者血清HBV-DNA熒光定量檢測結果均計算均值(copies/ml)t比較分析使用Marm-Whitney U檢驗05為差異有顯著性。2結果第廣4組患者HBVdi血清學指標見表bFQ-PCR HBV-DNA水平,見表2。第1組中血清HBV-DNA水平最高,均值為8. 0X 108

8、copies/mb其中1例血清HBV-DNA水平(& 0X104copies/nil)低于第2組血清HBV-DNA最高水平(5. 0X105copies/ml)。第3組患者有2例(12份血清)HBV-D'A載量在檢岀限暈以下，且該組最高HBV-DXA水平為4.0X105copies/mlo第4組治愈患者血清HBV-DXA水平均低于檢出限量以下。第1組患者血清HBV-DXA水平均值明顯高于2組患者血清HBV-DNA 水平(P<0001)和第3組患者血清HBV-DNA水平(P<0. 001) o第2組和第3組患者血清HBV-DNA水平相當，差異無顯著性(

9、P>0. 05)o表1各組乙肝患者血清學標志表2不同病程乙肝患者HBV-DNA水平比較 注:與1組比較,*PV0001；與2組比較，AP>0. 0053討論FQ-PCR是目前進行臨床基因診斷的有力手段，它采用完全閉管檢測，不需PCR后處理，避免了交叉污染，同時采用實時檢測技術,每個反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數和原始模 板數暈完全呈線性相關，定量準確率極高,整個操作可在4飛h內完成, 且具有敏感性高和重復性好的優點，使得區別乙肝病毒活動性和非活 動性狀態成為可能1。木研究表明，HBeAg陽性的CHB患者血清中HBV-DNA水平明顯高于HBeAg陰性患者(P

10、<O. 001) 4, 5和經a -干擾素治療HBeAg血清轉換患者HBV-DNA水平(P<0. 001 )>通過血清中HBV-DNA水平測定,還可以區別非活動性HBV攜帶者和CHB 患者，對于康復患者還可以檢測治療恢復情況，總之，FQ-PCR能準確.靈敏地反映HBV感染和治療恢復情況，它可以作為確認HBV感染不同 病程狀態的有效指標，可為指導乙型肝炎診斷、治療提供參考。【參考文獻】1程剛，何蘊紹，周新宇熒光定量聚合酶鏈反應檢測乙型肝炎病毒中華檢驗醫學雜志，1999, 22 (3)： 135.2張宜俊慢性乙型肝炎抗病毒治療的淺見傳染病信息,2002, 3： 102.3中華醫學會