經典word整理文檔，僅參考，雙擊此處可刪除頁眉頁腳。本資料屬于網絡整理，如有侵權，請聯系刪除，謝謝！實驗一動物實驗技術基礎一、實驗目的和要求1．組織學生觀看藥理學實驗教學的錄像，幫助學生直觀地了解常用的藥理學實驗方法和操作，并通過后續的動物實驗進一步鞏固和熟悉動物實驗的基本操作技術。2．學習動物捉持、性別辨認、稱重、標記、去毛、給藥灌胃、皮注、肌注、、采血、麻醉、解剖、縫合、處死等動物實驗基本技術。二、主要儀器設備18～22g，雌雄不限。鼠籠、電子天1%5~102550或100μ燈、1.5mL三、實驗方法動物捉持給藥。(2)性別辨認()可以從生殖器分辨其性別，而較小的動物(如小白鼠、大白鼠、豚鼠等)的性別鑒別，通常以肛門與生殖孔之間的距離來判斷，距離近者為雌性，距離遠者為雄性。(3)稱重將小鼠置于50mL小燒杯內，將燒杯置于電子天平上，待小鼠穩定后讀數。(4)標記方法有染色法、耳緣剪孔法、烙印法和號牌法等，可根據實驗目的、動物種類和具備的條件選用，一般編號應具有清晰易辨、簡便耐久的特點。貓、犬、兔等較色標記為1號，腹部右外側皮膚涂色標記為2號，右后肢皮膚外側涂色標記為3號，頭部皮膚涂色標記為4號，背部正中皮膚標記為5號，尾巴根部標記為6號，7、8、9號在左側同1、2、3號，第10號不涂黃色。大白鼠的編號與小白鼠相同。(5)去毛用彎尖手術剪將動物手術部位的毛發剪掉，用75%乙醇擦洗祼露的皮膚。(6)給藥小鼠灌胃（）法：將小鼠固定后，右手持裝有灌胃器的注射器，自口角外插入口腔，沿上顎插入食道。如遇阻力，可將注射器拔出再插，以免穿破食道或誤入氣管，造成動物死亡。灌胃容量一般為0.1—0.2ml/10g，不超過0.5ml/只。小鼠皮下注射法尾。另一人注射藥物。注射部位在背部皮下組織。如一人操作時，左手抓鼠尾，部皮下將藥注入。注射量不超過0.5ml/只。小鼠腹腔注射法：左手持鼠，右手持注射器從下腹左或右側（避開膀胱）朝2—3mm約45度。針尖插入不宜太深或太近上腹部，避免刺破內臟，注射量一般為0.1—0.25ml/只。小鼠尾靜脈注射法：將小鼠置于固定器內，使其尾巴露出，用70%酒精擦尾部，或將鼠尾浸入50℃熱水中。待尾部靜脈擴張后，左手拉尾，右手進針。注射容量不超過0.5ml/只。(7)采血（錄像演示）小鼠和大鼠剪尾取血法：將清醒鼠裝入深顏色的布袋中，將鼠身裹緊，露出尾巴，用酒從尾根部向尾尖擠捏，可取到一定量的血液。取血后，用棉球壓迫止血。也可采可流出，每次可取0.3～0.5ml，供一般血常規實驗。三根尾靜脈可替換切割，由尾尖向根部切割。由于鼠血易凝，需要全血時，應事先將抗凝劑置于采血管中，如用血細胞混懸液，則立即與生理鹽水混合。向下，阻滯靜脈回流，使眼球后靜脈叢充血，眼球外突。右手持1％肝素溶液浸4～5mm，旋轉吸血針頭，切開靜脈叢，血液自動進入吸血針筒，輕輕抽吸血管防止負壓壓迫靜脈叢使抽血更困難)，拔出吸血針，放松手壓力，出血可自然停止。也可用特制的玻璃取血管管長7～10cm，前端拉成毛細管，內徑0.1～1.5mm，長為1cm，后端管徑為0.6cm)。必要時可在同一穿刺孔重復取血。此法也適用豚鼠和家兔。眼眶取血法：左手持鼠，拇指與食指捏緊頭頸部皮膚，使鼠眼球突出，右手持彎鑷或止血鉗，鉗夾一側眼球部，將眼球摘出，鼠倒置，頭部向下，此時眼眶過程中動物未死，心臟不斷跳動，一般可取鼠體重4％～5％的血液量，是一種較好的取血方法，但只適用一次性取血。心臟取血：動物仰臥固定于鼠板上，用剪刀將心前區毛剪去，用碘酒、酒精3～44～5號針的力量，血自然進入注射器。斷頭取血：實驗者帶上棉手套，用左手抓緊鼠頸部位，右手持剪刀，從鼠頸小鼠可取血0.8～1.2ml，大鼠可取血5～10ml。頸動靜脈、股動靜脈取血：麻醉動物背位固定，一側頸部或腹股溝部去毛，20g小鼠可抽血0.6ml，300g大鼠可抽血8ml。也可把頸靜脈或頸動脈用鑷子挑起剪斷，用試端。(8)麻醉實驗動物麻醉麻醉藥的選擇結果，必須對動物進行麻醉，以利于實驗順利進行。麻醉藥的種類較多，作用原理也各有不同，它們除能抑制中樞神經系統外，還可引起其他生理機能的變化。現象，麻醉時間大致滿足實驗要求；②對動物的毒性及所觀察的指標影響最小；度，過淺或過深都會影響手術或實驗的進程和結果。常用麻醉有下列兩種形式：一、局部麻醉常用5～10g/l普魯卡因，動物實驗中多采用局部皮下浸潤麻醉。劑量按所需麻醉面積的大小而定，一般不超過50mg/kg。二、全身麻醉1.吸入麻醉乙醚為吸入性麻醉藥，可用于各種動物，尤其是時間短進入肺泡，對動物進行麻醉。吸入后約15～20min開始發揮作用。其優點：麻醉深度易于掌握，比較安全，術后動物蘇醒較快。缺點：需要專人管理，在麻醉并注意安全。2.注射麻醉巴比妥類各種巴比妥類藥物的吸收和代謝速度不同，其作用時間亦長短不一。戊巴比妥鈉(sodiumpentobarbital)在實驗中最為常用。該品為白色粉末，常配成1％～3％水溶液由靜脈或腹腔給藥。一次給藥麻醉的有效作用時間持續為3～5h，屬中效巴比妥類。靜脈注射時，前1/3劑量可快速注射，以快速度過興奮期；后2/3劑量則應緩慢注射，并密切觀察動物的肌肉緊張狀態、呼吸頻率和深度及角膜反射。動物麻醉后，常因麻醉藥作用、肌肉松弛和皮膚血管擴張，致使體溫緩慢下降，所以應設法保溫。硫噴妥鈉(sodillmthiopental)為淺黃色粉末，2.5％～5給藥可維持0.5～1h1/l0～1/5。作用，麻醉過深時，呼吸活動可完全停止。故應注意防止給藥過多、過快。對心血管系統也有復雜的影響，故這類藥物不用于研究心血管功能的實驗動物麻醉。烏拉坦(urethane)又名氨基甲酸乙酯，作用性質溫和，易溶于水，對動物麻可導致較持久的淺麻醉，對呼吸無明顯影響。優點是價廉，使用簡便，—次給藥可維持4～5h，且麻醉過程較平穩，動物無明顯掙扎現象；缺點是蘇醒慢，麻醉性實驗動的麻醉，本藥易溶于水，使用時配成10％～25％溶液。若注射劑量過要。氯醛糖1使其溶解，但加熱溫度不宜過高，以免降低藥效。本藥安全范圍大，能導致持久研究要求保留生理反射如心血管反射或神經系統反應的實驗。實驗中常將氯醛糖與烏拉坦混合使用。以加溫法將氯醛糖溶于25％的烏拉坦溶液內，使氯醛糖濃度為5％。犬和貓靜脈注射劑量為1.5～2m1/kg混合液，其中氯醛糖劑量為75～100mg/kg。兔也可用此劑量做靜脈注射。與乙醚比較，硫噴妥鈉除外)可維持較長時間的麻醉狀態，手術和實驗過程中不需要專人管理麻醉，而且麻醉過程比較平穩，動物無明顯掙扎現象。缺點是：蘇醒較慢。各種動物的麻醉方法(1)小白鼠根據需要選用吸入麻醉或注射麻醉。注射麻醉時多采用腹腔注射法。(2)大白鼠多采用腹腔麻醉，也可用吸入麻醉。(3)豚鼠可進行腹腔麻醉，也可將藥液注入背部皮下。(4)貓多用腹腔麻醉，也可用前肢或后肢皮下靜脈注射法。(5)家兔多采用耳緣靜脈麻醉。注射麻醉藥時應先快后慢，并密切注意家兔的呼吸及角膜反射等變化。(6)犬多用前肢或后肢皮下靜脈注射。麻醉動物注意事項：不同動物個體對麻醉藥的耐受性是不同的。因此在麻醉四肢和腹壁肌肉的緊張性以及皮膚夾捏反應等進行判斷。當呼吸突然變深變慢、過深而死亡。麻醉過深時，最易觀察到的是呼吸減慢甚至停止，但仍有心跳。此上、下移動，以證肺通氣，與此同時迅速做氣管切開，并插入氣管套管，連接人常用的蘇醒劑有咖啡因(1mg/kg)(2～5mg/kg)和洛貝林(0.3～1mg/kg)麻醉過淺，可臨時補充麻醉藥，但一次補充劑量不宜超過總量的1/5。表2-1常用注射麻醉藥物的劑量與給藥途徑(9)解剖的胸腹腔。重點觀察以下幾個部分：1.心臟，小鼠的心臟為倒立錐形。2.肺部，3.肝臟，小鼠的肝臟非常龐大（相對于它通過無絲分裂迅速再生。4.泌尿系統，小鼠的右腎比左腎稍高。5.生殖系統，雌性小鼠的生殖系統非常特別，雙體子宮以“”的形狀懸掛于下腹部。(10)縫合(11)處死頸椎脫位法還納腹腔器官于腹腔，分層縫合腹膜、肌層及皮膚層。住鼠尾，用力向后上方牽拉，聽到鼠頸部喀擦聲即頸椎脫位，脊髓斷裂，鼠瞬間死亡。四、實驗數據記錄和處理：小白鼠重量：22.3g六、實驗結果與分析：小白