1、灰綠黃堇總生物堿的抗炎鎮(zhèn)痛作用及毒性觀察【關(guān)鍵詞】灰綠黃堇；,總生物堿；,抗炎；,鎮(zhèn)痛；,毒性摘要：目的討論灰綠黃堇總生物堿的抗炎鎮(zhèn)痛作用及其動(dòng)物毒性反響情況。方法小鼠熱板法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)、小鼠扭體法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)、小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)、小鼠毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)和小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果灰綠黃堇總生物堿能明顯延長熱板所致小鼠舔后足時(shí)間P0.05,明顯減少醋酸所致小鼠扭體反響次數(shù)P0.05、減輕二甲苯所致小鼠耳廓腫脹P0.05,但對(duì)組胺所致小鼠毛細(xì)血管通透性增高無降低作用P0.05;小鼠口服半數(shù)致死量LD50為1.87gkg1。結(jié)論灰綠黃堇總生物堿有較好的鎮(zhèn)痛作用及局部抗炎作用,但也具有一定毒性。關(guān)鍵詞：灰綠黃堇；

2、總生物堿；抗炎；鎮(zhèn)痛；毒性Anti-inflaatryandAnalgesiEffetfTtalAlkalidfrrydalisadunaaxianditsTxiityAbstrat:bjetiveTstudyanti-inflaatryandanalgesieffetsfttalalkalidfrrydalisadunaaxiandtbserveitstxiity.ethdsHtplateexperient,useaeti-aid-induedtistingexperient,useear-sellingexperient,useapillarypereabilityexperientand

3、useautetxiityexperienterearriedutinthisstudy.ResultsTheresultsshedthatttalalkalidfrrydalisadunaaxiuldrearkablyprlngthetiefielikitsbakft,reduethetistingtiesinieP0.05andrelieveuseear-sellinginduedbydiethylbenzeneP0.05,butithadneffetntheinreasefratapillarypereabilityinduedbyhistaineP0.05.TheLD50fraldse

4、inieas1.87g/kg.nlusinTtalalkalidfrrydalisadunaaxihasgdanti-inflaatinandanalgesiatins,butitalshassetxiity.Keyrds:rydalisadunaaxi;Ttalalkalid;Anti-inflaatry;Analgesi;Txiity灰綠黃堇rydalisadunaaxi.是罌粟科Papaveraeae紫堇屬rydalis植物的枯燥塊根。味苦，性涼，有清熱解毒止血的功能，在民族醫(yī)藥方面被廣泛用于消炎，利膽，排石，止痛，但其藥理活性及毒性研究較少且局限。為全面研究其藥理活性及毒性，我們對(duì)其總

5、生物堿進(jìn)展了抗炎鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)及毒性實(shí)驗(yàn)。1材料1.1動(dòng)物昆明種小鼠,1822g,雌雄兼用；SD大鼠，體重180200g，雄性,四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2藥物灰綠黃堇為市售藥材干品,經(jīng)綿陽市藥品檢驗(yàn)所聶盛賢主任藥師鑒定。實(shí)驗(yàn)前根據(jù)劑量要求,稱取灰綠黃堇2.5kg,用10倍體積1%鹽酸浸泡,濾過后的提取液經(jīng)陽離子交換樹脂提取,用pH10的95%氨性乙醇洗脫,洗脫液用氯仿萃取純化,蒸干后得到總生物堿108g?？偵飰A含量約占生藥量的4.3%。實(shí)驗(yàn)時(shí)用0.5%羧甲基纖維素鈉()制成混懸液。阿司匹林腸溶片南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司，批號(hào)050507；芬必得片中美天津史抑制藥消費(fèi)，批號(hào)050304743

6、；地塞米松片(浙江仙琚制藥股份,批號(hào)20220425)。1.3儀器GJ28402型熱板測(cè)痛儀(浙江寧海白石電子醫(yī)藥儀器廠,溫度550.2；LP2001A型電子天平常熟市衡器廠；雙光束紫外分光光度儀北京普析通用儀器，型號(hào)TU-1900。2方法與結(jié)果2.1鎮(zhèn)痛作用2.1.1熱板法致痛實(shí)驗(yàn)1將雌性小鼠隨機(jī)分5組:空白對(duì)照組()、陽性對(duì)照組(阿司匹林200gkg-1)、灰綠黃堇總生物堿低、中、高劑量組(100,200，400gkg-1),每組10只,置于(55.00.5)熱板儀上,以小鼠舔后足為疼痛反響,以疼痛反響埋伏期為痛閾指標(biāo),給藥前測(cè)3次,取均值作為根底痛閾,剔除根底痛閾5s或30s的動(dòng)物。各組

7、都灌胃給藥,給藥后1h再次置于熱板上,記錄疼痛反響埋伏期。結(jié)果見表1。表1灰綠黃堇總生物堿對(duì)小鼠熱板致痛的影響的鎮(zhèn)痛作用略與對(duì)照組比擬，*P0.05,*P0.01；n=10結(jié)果說明灰綠黃堇總生物堿大劑量組與阿司匹林組與對(duì)照組比擬P0.01;中劑量組與對(duì)照組比擬P0.05,說明灰綠黃堇總生物堿有顯著進(jìn)步痛閾值的作用。2.1.2醋酸致扭體反響實(shí)驗(yàn)1取小鼠50只，雌雄各半，分組、給藥方法及劑量同2.1.1項(xiàng)。給藥后1h各組動(dòng)物均予腹腔注射0.6%醋酸0.2l,記錄15in內(nèi)扭體次數(shù)。結(jié)果見表2。表2灰綠黃堇總生物堿對(duì)小鼠扭體反響的影響略與對(duì)照組比擬，*P0.05,*P0.01；n=10結(jié)果說明灰綠黃

8、堇總生物堿高、中劑量組及陽性藥阿司匹林組與對(duì)照組比擬分別為P0.05,顯示較好的鎮(zhèn)痛作用。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2抗炎作用2.2.1二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)2取小鼠50只，雌雄各半隨機(jī)分5組:空白對(duì)照組()、陽性對(duì)照1組(地塞米松30gkg-1)、灰綠黃堇總生物堿低、中、高劑量組(100,200，400gkg-1),每組10只,分別灌胃給藥,灌胃容積0.2l/10g(下同),1次/d，連續(xù)3d。末次藥后1h,將0.1l二甲苯均勻涂于小鼠右耳兩面致炎,左耳不涂作對(duì)照,致腫1h脫頸椎處死小鼠,用直徑8打孔器沖下左耳及右耳同一部位的圓片，于分析天平上稱重。右耳重量減去左耳重量為腫脹度。結(jié)果見表3

9、。表3灰綠黃堇總生物堿對(duì)小鼠二甲苯致耳廓腫脹的影響略與對(duì)照組比擬，*P0.05,*P0.01；n=10結(jié)果說明，灰綠黃堇總生物堿中劑量組可顯著抑制鼠耳腫脹。2.2.2大鼠毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)皮內(nèi)色素浸透法2取安康SD大鼠32只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、芬必得組50gkg-1、灰綠黃堇總生物堿高、中劑量組200,400gkg-1、每組8只，各組大鼠分別預(yù)給藥7d，灌胃給藥1次/d。末次給藥后麻醉大鼠3%戊巴比妥鈉，40g/kg體重，腹腔注射，腹部剃毛，皮內(nèi)注射1g/l組胺0.1l(生理鹽水配制)，立即靜脈注射1%伊文氏藍(lán)生理鹽水液4l/kg。20in后斷頭處死動(dòng)物，將著色皮膚剝離，把藍(lán)斑剪下，剪碎，放

10、入5l生理鹽水丙酮液37內(nèi)浸泡24h，3000r/in離心15in,上清液于590n處測(cè)吸光度D值。結(jié)果見表4。表4灰綠黃堇總生物堿對(duì)大鼠毛細(xì)血管通透性的影響略與對(duì)照組比擬，*P0.05,*P0.01；n=8結(jié)果說明灰綠黃堇總生物堿對(duì)毛細(xì)血管通透性無降低作用，而對(duì)照藥芬必得作用較顯著P0.05。2.3急性毒性實(shí)驗(yàn)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，取昆明種安康小鼠50只，雌雄各半，體重2022g,為以全數(shù)致死量(D)和全不致死量(Dn)的濃度作為實(shí)驗(yàn)的最高和最低濃度組，上下劑量比值1K為0.852，隨機(jī)分設(shè)定5個(gè)劑量組,給藥量分別見下表驗(yàn)前24h，小鼠禁食不禁水，分別按組給以不同濃度的灰綠黃堇總生物堿溶液0.2

11、l/10g，給藥后連續(xù)觀察7d，并詳細(xì)記錄其死亡數(shù)目、死亡時(shí)間及活動(dòng)情況。動(dòng)物在給藥1d內(nèi)死亡。給藥后出現(xiàn)呼吸困難、全身抽搐、舌頭外伸的異常表現(xiàn)，死亡動(dòng)物剖檢未見異常表現(xiàn)。結(jié)果見表5。表5灰綠黃堇總生物堿小鼠灌胃LD50計(jì)算表略用改進(jìn)寇氏法計(jì)算灰綠黃堇總生物堿的LD501.87gkg-1,95%的可信限為1.870.03gkg-1。3討論灰綠黃堇作為資源豐富的民族藥,廣泛用于黃疸、痢疾、石淋、水腫等。從現(xiàn)有研究資料看,對(duì)灰綠黃堇的報(bào)道較少,主要有兩方面:一是灰綠黃堇生物堿和揮發(fā)油化學(xué)成分的研究35，二是對(duì)灰綠黃堇水煎劑的藥理作用的研究6，而灰綠黃堇相關(guān)化學(xué)成分的藥理研究似尚未見報(bào)道。實(shí)驗(yàn)證實(shí),

12、灰綠黃堇總生物堿能有效減輕二甲苯引起的耳廓腫脹，但對(duì)組胺所致大鼠毛細(xì)血管通透性增高無降低作用，說明灰綠黃堇總生物堿有局部抗炎成效。同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，灰綠黃堇總生物堿能明顯減少醋酸所致小鼠扭體反響次數(shù)，明顯延長小鼠熱板疼痛反響埋伏期,說明它有良好的鎮(zhèn)痛作用；灰綠黃堇總生物堿的抗炎鎮(zhèn)痛作用無明顯劑量依賴關(guān)系,對(duì)炎癥模型,中劑量具有較好藥理活性,應(yīng)予關(guān)注。在毒理實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)灰綠黃堇總生物堿存在較大的毒性。小鼠灌胃后，半數(shù)致死量LD50為1.87gkg-1。小鼠死亡主要發(fā)生在給藥后的3h以內(nèi)，主要毒性表現(xiàn)為呼吸困難、全身抽搐，而且其平安范圍窄。初步分析灰綠黃堇總生物堿的主要毒性反響可能發(fā)生在呼吸系統(tǒng)，這也提示我們?cè)谂R床用藥過程中，應(yīng)充分重視藥物的給藥劑量，以免中毒發(fā)生。其詳細(xì)作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)：1徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2022：524.2陳奇.中藥藥理研究方法學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社，1993：303.3唐艷麗,楊愛梅,張櫻山,等.灰綠黃堇生物堿化學(xué)成