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文檔簡介

1、選修一 知識點 填空專題一傳統發酵技術的應用課題1 果酒和果醋的制作1果酒制作的原理(1)人類利用微生物發酵制作果酒,該過程用到的微生物是,它的代謝類型是,與異化作用有關的方程式有。生活狀態:進行發酵,產生大量。(2)果酒制作條件傳統發酵技術所使用的酵母菌的來源是。酵母菌生長的最適溫度是; PH呈;(3)紅色葡萄酒呈現顏色的原因是:酒精發酵過程中,隨著的提高,紅色葡萄皮的進入發酵液,使葡萄酒呈色。(4)在、的發酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數其它微生物都因無法適應這一環境而受到抑制。2果醋的制作原理(1)果醋發酵菌種是,新陳代謝類型。 (2)當氧氣和糖源充足時醋酸菌將糖分解成,當糖源不足

2、時醋酸菌將變為再變成醋酸,其反應式。3操作過程應注意的問題(1)為防止發酵液被污染,發酵瓶要用消毒。(2)葡萄汁裝入發酵瓶時,要留出大約的空間。(3)制作葡萄酒時將溫度嚴格控制在,時間控制在d左右,可通過對發酵的情況進行及時的監測。(4)制葡萄醋的過程中,將溫度嚴格控制在,時間控制在d,并注意適時在充氣。4酒精的檢驗(1)檢驗試劑:。(2)反應條件及現象:在條件下,反應呈現。5.制作果酒、果醋的實驗流程挑選葡萄果酒 果醋課題2 腐乳的制作1.制作原理(1)經過微生物的發酵,豆腐中的蛋白質被分解成小分子的和,脂肪被分解成和,因而更利于消化吸收。(2)腐乳的發酵有多種微生物參與,如、等,其中起主要

3、作用的是。它是一種絲狀,常見、 上。(3)現代的腐乳生產是在嚴格的條件下,將優良菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免其他菌種的,保證產品的質量。2. 腐乳制作的實驗流程:讓豆腐長出密封腌制。3.實驗注意事項(1)在豆腐上長出毛霉時,溫度控制在,自然條件下毛霉的菌種來自空氣中的。(2)將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽,加鹽量要隨著擺放層數的加高而,近瓶口的表層要。加鹽的目的是使豆腐塊失水,利于,同時也能的生長。鹽的濃度過低,;鹽的濃度過高,。(3)鹵湯中酒精的含量應控制在左右,它能微生物的生長,同時也與豆腐乳獨特的形成有關。酒精含量過高,;酒精含量過低,。香辛料可以調制腐乳的風味,同時也有作用。(4)瓶

4、口密封時,最好將瓶口,防止瓶口污染。課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量1乳酸菌代謝類型為,在情況狂下,將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛,在、內都有分布。常見的乳酸菌有和兩種,其中常用于生產酸奶。2亞硝酸鹽為,易溶于,在食品生產中用作。一般不會危害人體健康,但當人體攝入硝酸鹽總量達g時,會引起中毒;當攝入總量達到g時,會引起死亡。在特定的條件下,如、和的作用下,會轉變成致癌物質亞硝胺,亞硝胺對動物有致畸和致突變作用。3泡菜制作大致流程:原料處理裝壇成品(1)配制鹽水:清水和鹽的比例為,鹽水后備用。(2)裝壇:蔬菜裝至時加入香辛料,裝至時加鹽水,鹽水要,蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中,保證壇內環境

5、。(3)腌制過程種要注意控制腌制的、和。溫度過高、食鹽用量不足10%、過短,容易造成,。4測亞硝酸鹽含量的原理是。將顯色反應后的樣品與已知濃度的進行比較,可以大致出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測定步驟:配定溶液 制備樣品處理液專題知識歸納果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作原理果酒和果醋的設計制作裝置果酒和果醋的制作過程傳統發酵技術的應用腐乳的制作 腐乳的制作原理腐乳制作過程的控制條件制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 泡菜制作原理 泡菜發酵條件亞硝酸鹽含量的測定專題二微生物的培養與應用課題1 微生物的實驗室培養1根據培養基的物理性質可將培養基可以分為和。2培養基一般都含有、四類營養物質,另外還需要滿足微生物生

6、長對、以及的要求。3獲得純凈培養物的關鍵是。4消毒是指滅菌是指5日常生活中常用的消毒方法是,此外,人們也常使用化學藥劑進行消毒,如用、等。常用的滅菌方法有、,此外,實驗室里還用或進行消毒。6制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的方法步驟是,。7微生物接種的方法中最常用的是和。平板劃線法是指。稀釋涂布平板法是指。8菌種的保藏:(1)臨時保藏:將菌種接種到試管的,在合適的溫度下培養,長成后,放入冰箱中保藏,以后每36個月,轉移一次新的培養基。缺點是:保存時間,菌種容易被或產生變異。(2)長期保存方法:法,放在冷凍箱中保存。課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數1尿素只有被分解成之后,才能被植物吸收利用。選

7、擇分解尿素細菌的培養基特點:惟一氮源,按物理性質歸類為培養基。2PCR()是一種在體外將。此項技術的自動化,要求使用耐高溫的DNA聚合酶。3實驗室中微生物的篩選應用的原理是:人為提供有利于生長的條件(包括等),同時抑制或阻止其他微生物生長。4選擇培養基是指。5常用來統計樣品中活菌數目的方法是。即當樣品的稀釋度足夠高時,培養基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的。通過統計平板上的菌落數,就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確,一般選擇菌落數在的平板進行計數,計數公式是。利用稀釋涂布平板法成功統計菌落數目的關鍵是。另外,也是測定微生物數量的常用方法。6一般來說,統計的菌落數往往比活

8、菌的實際數目。這是因為。因此,統計結果一般用而不是活菌數來表示。7設置對照實驗的主要目的是,提高實驗結果的可信度。對照實驗是。滿足該條件的稱為,未滿足該條件的稱為。8實驗設計包括的內容有:、和,具體的實驗步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。9不同種類的微生物,往往需要不同的培養和培養。在實驗過程中,一般每隔24小時統計一次菌落數目,選取菌落數目穩定時的記錄作為結果,這樣可以。10土壤有“”之稱,同其他生物環境相比,土壤中微生物、。11土壤中的微生物約是細菌,細菌適宜在酸堿度接近潮濕土壤中生長。土壤中微生物的數量不同,分離不同微生物采用的的稀釋度不同。12一般來說,在一定的培養條件下,同種微生物

9、表現出穩定的菌落特征。這些特征包括菌落的 、 、和等方面。13在進行多組實驗過程中,應注意做好標記,其目的是。14對所需的微生物進行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對分離的菌種進行一步的鑒定,還需要借助的方法。15在細菌分解尿素的化學反應中,細菌合成的將尿素分解成了。氨會使培養基的堿性,PH。因此,我們可以通過檢測培養基變化來判斷該化學反應是否發生。在以為唯一氮源的培養基中加入指示劑。培養某種細菌后,如果PH升高,指示劑將變,說明該細菌能夠。課題3 分解纖維素的微生物的分離1纖維素是類物質,是自然界中纖維素含量最高的天然產物,此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。2纖維素酶是一種酶,一般認

10、為它至少包括三種組分,即、和,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成。正是在這三種酶的協同作用下,纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養,同樣,也可以為人類所利用。3篩選纖維素分解菌可以用法,這種方法能夠通過直接對微生物進行篩選。可以與像纖維素這樣的多糖物質形成,但并不和水解后的和發生這種反應。纖維素分解菌能產生分解纖維素,從而使菌落周圍形成。4分離分解纖維素的微生物的實驗流程圖如下:梯度稀釋。5為確定得到的菌是否是纖維素分解菌,還學進行的實驗。纖維素酶的發酵方法有發酵和發酵。測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產生的進行定量測定。專題知識歸納結果分析與評價

11、培養基培養基的類型培養基的營養物質無菌技術避免雜菌污染的方法實驗室常用的消毒方法實驗室常用的滅菌方法制備牛肉膏蛋白胨固體培養基計算稱量溶化滅菌倒平板純化大腸桿菌平板劃線法稱釋涂布法課題延伸微生物的培養與應用微生物的實驗室培養土壤中分解尿素的細菌的分離與計數篩選菌株PCR技術實驗室中篩選微生物的原理選擇培養基統計菌落數目稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數法設置對照設置對照的目的對照實驗的概念實驗設計土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養與觀察無菌操作做好標記規劃時間操作提示結果分析與評價課題延伸分解纖維素的微生物的分離纖維素與纖維素酶纖維素酶的組成成分纖維素酶分解纖維素的實驗纖維素分解菌的篩選剛果紅染料篩選纖

12、維素分解菌的依據實驗設計土壤取樣選擇培養剛果紅染色法操作提示復習微生物技術選擇培養的操作方法結果分析與評價課題延伸專題三 植物的組織培養技術專題知識歸納課題1 月季的花藥培養1有某種生物全套的任何一個活細胞,都具有發育成的能力,即每個生物細胞都具有。但在生物體的生長發育過程中并不表現出來,這是因為在條件下,通過基因的,構成不同組織和器官。2. 植物組織培養技術的應用有:實現優良品種的;培育作物;制作種子;培育作物以及細胞產物的等。3. 細胞分化:個體發育中細胞在上出現差異的過程。4. 愈傷組織是通過形成的,其細胞排列,高度呈狀態的細胞。5. 植物組織培養的過程可簡單表示為:(脫分化)( )愈傷

13、組織組織(生長)新個體6.材料:植物的種類、材料的和等都會影響實驗結果。菊花組織培養一般選擇作材料。7. 營養:常用的培養基是培養基,其中含有的大量元素是,微量元素是,有機物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。8.激素:在培養基中需要添加和等植物激素,其、等都影響結果。9.環境條件:PH、等環境條件。菊花組培所需PH為,溫度為,光照條件為。10. 配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。使用時根據母液的,計算用量,并加稀釋。11. 配制培養基:應加入的物質有瓊脂、大量元素、微量元素、有機物和植物激素的母液,并用定容到毫升。在菊花組織培養中,可以不添加,原因是菊花莖段組織培養比較容易

14、。12.滅菌:采取的滅菌方法是。13發酵操作13.1前期準備:用消毒工作臺,點燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進行,器械使用前后都要用火焰灼燒。13.2接種操作:接種過程中插入外植體時朝上,每個錐形瓶接種個外植體。外植體接種與細菌接種相似之處是。13.3培養過程應該放在中進行,并定期進行消毒,保持適宜的和。13.4移栽前應先打開培養瓶的,讓其在培養間生長幾日,然后用流水清洗根部培養基。然后將幼苗移植到等環境中生活一段時間,進行壯苗。最后進行露天栽培。(脫分化)離體細胞、組織、器官(又叫外植體)(再分化)愈傷組織組織(生長)胚狀體叢芽等新個體課題2月季的花藥培養1.小孢子母細胞(2n)

15、( )時期(n)單核( )期(n)雙核期( )細胞核(n)( )細胞核(n)( )細胞(n)( )細胞(n)( )個精子(n)( )分裂( )分裂單核( )期(n)( )分裂2. 育被子植物花粉的發育要經歷、和等階段。花粉是由花粉母細胞經過而形成的,因此花粉是。3. 在正常情況下,一個小孢子母細胞可以產生個精子;在一枚花藥中可以產生個花粉。4. 產生花粉植物的兩種途徑花藥中的花粉花藥中的花粉 叢芽叢芽 誘導生根移栽脫分化脫分化( ) ( ) 5. 誘導花粉植株能否成功及誘導成功率的高低,受多種因素影響,其中影主要因素是:和等。6. 材料的選擇:從花藥來看,應當選擇(初花期、盛花期、晚花期)的花

16、藥;從花粉來看,應當選擇(四分體期、單核期、雙核期、萌發期)的花粉;從花蕾來看,應當選擇(完全未開放、略微開放、完全盛開)的花蕾。7. 選擇花藥時一般通過確定花粉發育時期,此時需要對花粉細胞核進行染色,最常用的染色劑是和,它們分別可以將細胞核染成色和色。8. 在使用焙花青鉻釩溶液時,需要首先將花藥用處理20min。該試劑的配制方法是將按體積比為的比例混合均勻。9. 消毒后的花蕾,要在條件下除去花萼、花瓣。剝取花藥時,一是注意不要損傷花藥,原因是;二是要徹底除去花絲,原因是。10. 剝取的花藥要立刻接種到上。每個培養瓶接種個花藥。花藥培養利用的培養基是培養基,pH為,溫度為,幼苗形成之前(需要、

17、不需要)光照。在花藥培養基中,用量最高的激素是;在誘導叢芽或胚狀體培養基中,用量最高的激素是;在誘導生根的培養基中,用量最高的激素是。11. 培養2030d后,花藥開裂,長出或釋放出胚狀體。前者還要轉移到上進行分化培養成再生植株;后者要盡快并轉移到新的培養基上。通過愈傷組織形成的植株,常常會出現的變化,因而需要鑒定和篩選。原理:細胞的全能性概念:基礎:條件:植物組織培養的基本過程:外植體愈傷組織胚狀體幼苗脫分化再分化影響植物組織培養的因素:外植體的選擇營養、環境等植物激素的用法溫度、pH、光照等實驗操作:制備MS培養基外植體消毒培養接種移栽栽培植物組織培養菊花的組織培養月季的花藥培養被子植物花

18、粉的發育:花粉母細胞減數分裂小孢子母細胞四分體時期單核期雙核期精子產生花粉植株的兩種途徑:花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體 叢芽叢芽愈傷組織 誘導生根移栽脫分化脫分化分化 再分化影響花藥培養的因素:主要因素:材料的選擇與培養基的組成重要因素:選擇合適的花粉發育時期影響因素:親本植株的生長條件、低溫處理和接種密度等實驗操作:材料的消毒:材料的選取:確定花粉發育時期的方法接種和培養:鑒定和篩選:專題四 酶的研究與應用課題1 果膠酶在果汁生產中的作用1果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一,它是由聚合而成的一種高分子化合物,不溶于水。在果汁加工中,果膠不僅會影響出汁率,還會使果汁渾濁。果膠酶能夠

19、分解,瓦解植物細胞的及,使榨取果汁更容易,而果膠分解成可溶性的,也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶,而是分解果膠的一類酶的總稱,包括、和等。果膠酶的來源:、和均能產生果膠酶。由于發酵生產的果膠酶是食品加工業中使用量最大的酶制劑之一,被廣泛的應用于果汁加工業。2酶的活性是指的能力。酶活性的高低可以用在一定條件下,酶所催化的某一化學反應的來表示。在科學研究與工業生產中,酶反應速度用單位時間內、單位體積中或來表示。3、和等條件會影響酶的活性。4.探究溫度和pH對酶活性的影響:在一恒定溫度下,通過設置來確定酶催化反應的最適pH,在一恒定的pH下,通過設置來確定沒催化反應的最適溫度。在研究

20、溫度和pH對唾液淀粉酶活性的影響時,通過用檢測反應后溶液是否變藍來判斷酶是否有活性,本課題要求跟進一步,需要測定果膠酶的活性。在測定果膠酶的活性時,可通過測定來判斷果膠酶活性的高低,獲得的蘋果汁越多,說明果膠酶的活性越。5.探究果膠酶用量:生產果汁時,為了使果膠酶得到充分的,節約成本,需要控制好酶的。該實驗是在探究果膠酶的和之后進行的,實驗的變量不再是或,而是。在這個實驗中,除了酶的用量外,影響果汁產量的因素還有、。課題2 探討加酶洗衣粉的洗劑效果1加酶洗衣粉是指含有的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:、和。其中,應用最廣泛廣泛、效果最明顯的是和。2堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質水

21、解成可溶性的或小分子的,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的、和水解為小分子物質,使洗衣粉具有更的去污能力。3加酶洗衣粉的洗滌效果:(1)影響因素:使用加酶洗衣粉時,影響酶活性的因素有、 和等,為此科學家通過生產出了能夠、和的酶,并制成酶制劑,使其與洗衣粉的其他成分隔離。(2)注意事項:衣物的洗滌,不僅要考慮洗滌效果,還要考慮衣物的、等因素。4.實驗設計:實驗設計遵循的原則是和。(1)探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果的區別時,要控制為自變量,其他條件一致,同時普通洗衣粉處理污漬物與加酶洗衣粉處理污漬物形成實驗。(2)在探究加酶洗衣粉的最適溫度時,是自變量

22、,不同實驗組之間形成。(3)在探究不同種類的加酶洗衣粉的洗滌效果時,變量時,污漬應是完全相同的。課題3 酵母細胞的固定化1高果糖漿的生產需要使用,它能將葡萄糖轉化成果糖。這種酶的好,可以持續發揮作用。但是,酶溶解于葡萄糖溶液后,就無法從糖漿中回收,造成很大的浪費。2使用固定化酶技術,將這種酶固定在一種上,再將這些酶顆粒裝到一個內,柱子底端裝上分布著許多小孔的。酶顆粒無法通過篩板的小孔,而反應溶液卻可以自由出入。生產過程中,將葡萄糖溶液從反應柱的上端注入,使葡萄糖溶液流過反應柱,與接觸,轉化成果糖,從反應柱的下端流出。反應柱能連續使用半年,大大降低了生產成本,提高了果糖的產量和質量。3固定化酶和

23、固定化細胞是利用或方法將酶或細胞固定在一定空間內的技術,包括、和法。一般來說,酶更適合采用和法固定,而細胞多采用法固定化。這是因為細胞個大,而酶分子很小;個大的難以被或,而個小的酶容易從中漏出。4包埋法法固定化細胞即將微生物細胞包埋在不溶于水的中。常用的載體有、和等。5.配制海藻酸鈉溶液時要邊加熱邊攪拌。加熱時要用 ,或者加熱,反復幾次,直到海藻酸鈉融化為止。將融化好的海藻酸鈉溶液先冷卻至,再與混合。混合時要充分,使其混合均勻,再轉移到中,緩慢的到分配好的溶液中,觀察是否有形成。6.將凝膠珠加入用于發酵的葡萄糖溶液后,發現 產生,同時又味散發。專題知識結構專題5 DNA和蛋白質技術課題1 DN

24、A的粗提取與鑒定導學誘思1提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是。對于DNA的粗提取而言,就是要利用、等在物理和化學性質方面的差異,提取DNA,去除其他成分。1)DNA的溶解性 DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當的鹽濃度就能使充分溶解,而使雜質沉淀,或者相反,以達到分離目的。圖51是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線,請根據曲線圖,思考:在什么濃度下,DNA的溶解度最小?DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何變化的?如何通過控制NaCl溶液的濃度使DNA在鹽溶液中溶解或析出?此外,DNA不溶于溶液,但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理,可以將D

25、NA與蛋白質進一步的分離。2)DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解,但是對沒有影響。大多數蛋白質不能忍受6080oC的高溫,而DNA在以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解,但對DNA沒有影響。3)DNA的鑒定 在條件下,DNA遇會被染成色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。2實驗設計1)實驗材料的選取 凡是含有的生物材料都可以考慮,但是使用的生物組織,成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實驗材料:魚卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺乳動物的紅細胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養基的大腸桿菌思考:哺乳動物的紅細胞的特點?2)破碎細胞,獲取含DNA的濾液 動物細胞的破碎比

26、較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的,同時用攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞,需要先用溶解細胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的和,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。思考:為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂?加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?如果研磨不充分,會對實驗結果產生怎樣的影響?此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細胞成分?3)去除濾液中的雜質 閱讀課本的三個方案,思考:為什么反復地溶解與析出DNA,能夠去除雜質?方案二與方案三的原理有什么不同?4)DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積、冷卻的,靜置,溶液中會出現,這就是粗

27、提取的DNA。用玻璃棒攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管,各加入物質的量濃度為的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的。混合均勻后,將試管置于中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變。3操作提示以血液為實驗材料時,每100ml血液中需要加入3g,防止。加入洗滌劑后,動作要、,否則容易產生大量的泡沫,不利于后續步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要,以免,導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。二苯胺試劑要,否則會影響鑒定的效果。4結果分析與評價課題2 多

28、聚酶鏈式反應擴增DNA片段導學誘思1PCR原理填寫下列表格參與的組分在DNA復制中的作用解旋酶DNA母鏈合成子鏈的原料DNA聚合酶引物DNA的兩條鏈是反向平行的,通常將DNA的羥基末端稱為,而磷酸基團的末端稱為。DNA聚合酶不能開始合成DNA,而只能,因此,DNA復制需要引物。DNA的合成方向總是。在DNA的復制過程中,復制的前提是。在體外可通過控制來實現。在的溫度范圍內,DNA的雙螺旋結構將解體,雙鏈分開,這個過程稱為。PCR利用了DNA的原理,通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結合。由于PCR過程的溫度高,導致DNA聚合酶失活,后來的DNA聚合酶的發現和應用,大大增加了PCR的效率。PCR反應

29、需要在一定的緩沖溶液中提供:,同時通過控制溫度使DNA復制在體外反復進行。2PCR的反應過程PCR一般要經歷循環,每次循環可以分為、和三步。從第二輪循環開始,上一次循環的產物也作為模板參與反應,并且由延伸而成的DNA單鏈會與結合,進行DNA的延伸,這樣,DNA聚合酶只能,使這段固定長度的序列成指數擴增。3實驗操作在實驗室中,做PCR通常使用,它是一種薄壁塑料管。具體操作時,用微量移液器,按PCR反應體系的配方在中依次加入各組分,再參照下表的設置設計好PCR儀的循環程序即可。4操作提示為避免外源DNA等因素的污染,PCR實驗中使用的、以及蒸餾水等在使用前必須進行。PCR所用的緩沖液和酶應分裝成小

30、份,并在儲存。使用前,將所需試劑從冰箱拿出,放在冰塊上緩慢融化。在微量離心管中添加反應成分時,移液管上的槍頭要。課題3 血紅蛋白的提取和分離【導學誘思】1凝膠色譜法凝膠色譜法也稱做,是根據分離蛋白質的有效方法。凝膠實際上是一些由構成的多孔球體,在小球體內部有許多貫穿的通道,相對分子質量不同的蛋白質分子通過凝膠時速度不同,相對分子質量較小的蛋白質進入凝膠內部的通道,路程,移動速度;而相對分子質量的蛋白質無法進入凝膠內部的通道,只能在移動,路程,移動速度。相對分子質量不同的蛋白質分子因此得以分離。2緩沖溶液緩沖溶液的作用是。緩沖溶液通常由溶解于水中配制而成的。生物體內進行的各種生物化學反應都是在一

31、定的pH下進行的,例如:血漿的pH是,要在實驗條件下準確模擬生物體內的過程,必須保持體外的pH與體內的基本一致。3電泳電泳是指。許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解離的基團,在一定的pH下,這些基團會帶上。在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷的電極移動。電泳利用了待分離樣品中各分子以及分子本身的、的不同,使帶電分子產生不同的,從而實現樣品中各種分子的分離。兩種常用的電泳方法是和,在測定蛋白質分子量時通常使用。蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于以及等因素。4蛋白質的提取和分離蛋白質的提取和分離一般分為四步:、和。5樣品處理血液由和組成,其中紅細胞最多。紅細胞具有的特點。紅

32、細胞中有一種非常重要的蛋白質,其作用是,血紅蛋白有個肽鏈組成,包括,其中每條肽鏈環繞一個,磁基團可攜帶。血紅蛋白因含有呈現紅色。紅細胞的洗滌 洗滌紅細胞的目的是,采集的血樣要及時采用分離紅細胞,然后用膠頭吸管吸出上層透明的,將下層暗紅色的倒入燒杯,再加入,緩慢攪拌,低速短時間離心,如此重復洗滌三次,直至,表明紅細胞已洗滌干凈。血紅蛋白的釋放 在和作用下,紅細胞破裂釋放出血紅蛋白。分離血紅蛋白溶液 將攪拌好的混合溶液離心后,試管中的溶液分為4層。第一層為無色透明的,第2層為白色薄層固體,是,第3層是紅色透明液體,這是,第4層是其他雜質的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過濾,除去之溶性沉淀層,于

33、分液漏斗中靜置片刻后,分出下層的紅色透明液體。透析 取1mL的血紅蛋白溶液裝入中,將透析袋放入盛有300mL的物質的量的濃度為20mmol/L的中,透析12h。透析可以去除樣品中的雜質,或用于更換樣品的。6凝膠色譜操作第一步要制作,第二步要,因為 ,所以裝柱前需要根據色譜柱的內體積計算所需要的凝膠量。在裝填凝膠柱時,不得有存在。因為氣泡會,降低分離效果。第三步是。專題知識歸納基礎知識:提取DNA的方法 實驗材料的選取 實驗設計 破碎細胞,獲取含DNA的濾液 去除濾液中的雜質DNA的粗提取 DNA的析出與鑒定與鑒定 以血液為材料要防止血液凝固DNA和蛋白質技術 操作提示 加入洗滌劑后,動作要輕緩;加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩 二苯胺試劑要現配現用結果分析與評價課題延伸PCR原理 基礎知識 PCR的反應過程多聚酶鏈式反 實驗操作應擴增DNA 操作提示片段 結果分析與評價 課題延伸 凝膠色譜法血紅蛋白的提 基礎知識 緩沖溶液取和分離 電泳 樣品處理實驗操作 凝膠色譜操作 SDS聚丙烯酰凝膠電泳 紅細胞的洗滌實驗操作 色譜主填料的處理 凝膠色譜柱的裝填 蛋白質的分離結果分析與評價課題延伸專題六 植物有效成分的提取課題1 植物芳香油的提取【導學誘思】1.植物芳香油的來源天然香料的主要來源是和

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