1、2012屆高三生物一輪復習導學案（四十八）選修1 DNA的粗提取和鑒定 蛋白質的提取與分離一、考點解讀1、DNA的粗提取和鑒定(B) 2、蛋白質的提取(A)二、課前導學1、實驗原理：(1)DNA在氯化鈉溶液中的溶解度，是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的。當氯化鈉的物質的量濃度為 mol/L時，DNA的溶解度最 。利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。(2) DNA不溶于 溶液，但是細胞中的某些物質則可以溶于酒精溶液。利用這一原理，可以進一步提取出含雜質較少的DNA。(3)DNA遇 （沸水浴）會染成 色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。2、實驗材料： 雞血細胞液（5ml10ml）

2、 95%乙醇（預冷24h） 蒸餾水檸檬酸鈉(質量濃度0.1g/ml) 氯化鈉(2mol/L和0.015mol/L) 二苯胺3、實驗步驟：（1）如何提取雞血細胞的細胞核物質？ （2）用什么溶液溶解細胞核內的DNA？原理是什么？用圖示表示出來（3）如何析出含DNA的粘稠物？有何注意點？（7）利用什么原理提取含雜質較少的DNA？怎么做？有何注意點？（8）怎樣進行DNA的鑒定？現象是什么？思考：還可通過什么方法去除DNA中的蛋白質？原理是什么？若實驗材料換成植物組織，該怎么做？三、考點例析例1、在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，將提取獲得的含DNA的黏稠物(還含有較多雜質)分別處理如下：第一，放入0.

3、14 mol/L的氯化鈉溶液中，攪拌后過濾，得濾液A和黏稠物a。第二，放入2 mol/L的氯化鈉溶液中，攪拌后過濾，得濾液B和黏稠物b。第三，放入冷卻的95%的酒精溶液中，攪拌后過濾，得濾液C和黏稠物c。以上過程獲得的濾液和黏稠物中，因含DNA少而可以丟棄的是 ()AA、B、CBA、b、CCa、B、cDa、b、c例2、在利用雞血進行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中，相關敘述正確的是( )A用蒸餾水將NaCl溶液濃度調至0.14 mol/L，濾去析出物B調節NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質C將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍色D用菜花替代雞血作

4、為實驗材料，其實驗操作步驟相同例3、下列敘述中錯誤的是()A改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B在沸水浴中，DNA遇二苯胺試劑會呈現藍色C用電泳法可分解帶電性質、分子大小和形狀不同的蛋白質D用透析法可去除蛋白質樣品中的小分子物質歸納總結：蛋白質的提取與分離的常用方法和原理方法原理透析法離心沉降法通過控制離心速率，使得分子大小、密度不同的蛋白質發生沉降分層電泳法凝膠色譜法四、反饋矯正1下列不適宜作為DNA提取的實驗材料是 （ ） A雞血細胞 B蛙的紅細胞 C人的成熟紅細胞 D菜花2下列圖示中能反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關系的是 （ ）3在DNA的粗提取和鑒定的實驗中

5、，提取雞血細胞的核物質和析出含DNA的粘稠物的操作過程中均用到蒸餾水，其作用在于 （ ）A前者用來溶解血細胞，后者用來溶解DNAB前者使血細胞吸水破裂，后者用來稀釋NaCl溶液C前者用來分離細胞核與細胞質，后者用來提取DNAD前者使DNA從核中分離出來，后者使DNA析出4在DNA的粗提取和鑒定的實驗中，提取含雜質較少的DNA時必須用（ ）A0.14 mol/L的NaCl溶液 B玻璃棒充分攪拌直至絲狀物溶解C經充分預冷的95的酒精溶液 D0.lg/mL的檸檬酸鈉溶液5在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，有兩次DNA的沉淀析出，其依據的原理（ ）DNA在氯化鈉的物質的量濃度為0.14mol/L時溶解

6、度最低DNA在冷卻的體積分數為95%的酒精中能沉淀析出A兩次都是B兩次都是C第一次是，第二次是D第一次是，第二次是6與析出DNA粘稠物有關的敘述，不正確的是（ ）A.操作時緩緩滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度 B.在操作過程時，用玻璃棒輕緩攪拌，以保證DNA分子完整 C.加蒸餾水可同時降低DNA和蛋白質的溶解度，兩者均可析出D.當絲狀粘稠物不再增加時，此時NaCl的濃度相當于0.14mol/L7在DNA提取過程中，最好使用塑料試管和燒杯，目的是（ ）A.不易破碎 B.減少提取過程中DNA的損失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷8下列操作中，對DNA的提取量影響最小的是（ ）A.使雞血細胞在蒸餾

7、水中充分破裂，放出DNA等核物質B.攪拌時，要使用玻璃棒沿一個方向輕緩攪拌C.在“析出DNA粘稠物”時，要緩緩加蒸餾水，直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA時，要使用冷酒精，甚至再將混合液放入冰箱中冷卻二、非選擇題9如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗的相關操作。(1)圖中實驗材料A可以是_等，研磨前加入的B應該是_。(2)通過上述所示步驟得到濾液C后，再向濾液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_，再過濾得到濾液D，向濾液D中加入蒸餾水的目的是_。(3)在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，將含有一定雜質的DNA絲狀物分別放入體積為2 mL的4種溶液中，經攪拌后過濾，獲得如表所示的

8、4種濾液，含DNA最少的是濾液_。1B液中研磨攪拌后過濾濾液E22 mol/L的NaCl溶液攪拌后過濾濾液F30.14 mol/L的NaCl溶液中攪拌后過濾濾液G4冷卻的95%的酒精溶液中攪拌后過濾濾液H(4) DNA鑒定的原理是_ _10回答下列有關“DNA的粗提取和鑒定”實驗的問題。(1)下列有關“DNA的粗提取和鑒定”實驗原理的敘述，正確的是()ADNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的降低而減小B利用DNA不溶于酒精的性質，可除去細胞中溶于酒精的物質而得到較純凈的DNACDNA是大分子有機物，不溶于水而溶于某些有機溶劑D在沸水中，DNA遇二苯胺會出現紫色反應(2)如下圖為該實

9、驗過程中的一些重要操作示意圖。正確的操作順序是_。上圖C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是_和_。圖A步驟中所用酒精必須是經過_才能使用，該步驟的目的是_。(3)為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可滴加_試劑，沸水浴，如果出現_，則該絲狀物的主要成分為DNA。11.某生物興趣小組在學習完“蛋白質的提取和分離”后，聯系相關實驗，準備從豬肝臟研磨液中初步提取過氧化氫酶，設計的“過氧化氫酶提取、分離流程圖”如下：試回答下列有關問題：（1）向肝細胞懸液中加入一定量的pH=7.0的緩沖液并充分攪拌，可以破碎肝細胞，破碎細胞的原理是 。與使用蒸餾水相比，使用緩沖液的優點是_。（2）蛋白質粗分離階段透析的目的是_。（