1、精選優質文檔-傾情為你奉上骨髓細胞學檢驗第一節骨髓細胞檢查步驟一、骨髓取材（一） 穿刺部位目前骨髓穿刺部位有胸骨、腰椎棘突、髂骨等處，以髂骨前上棘、后上棘穿刺術最常見。2 歲以下小兒主張脛骨穿刺。由于穿刺部位不同，取材可能有明顯差異。如再障貧血往往髂骨首先受損，棘突次之，胸骨增生最好；黑熱病檢查利杜體以腰椎穿刺陽性率較高；惡性組織細胞癥以胸骨穿刺陽性率較高。因此必要時多部位穿刺以便能全面了解骨髓情況。（二） 骨髓液抽取量以02 ml 為佳，抽量過多，易被血液稀釋，失去診斷意義。二、骨髓涂片制備用推片蘸取有骨髓渣的骨髓液少許（若看上去很濃，蘸量少些；如稀，可多蘸些）， 盡量將骨髓渣蘸上，放于載玻

2、片右端，將骨髓液迅速沿玻片與推片接觸面擴散成一均勻的骨髓液粗線。然后將玻片與推片成30 45°角（骨髓液較濃時，角度小些，推的速度慢些；較稀時，角度大些，速度快些），自右向左用力均勻地向前滑動推之，直至玻片尾部。立即將涂好的骨髓片在空氣中來回搖動，使之快干，以免細胞皺縮而形態變異。三、涂片染色標本染色一般選用混合染色法（瑞氏姬姆薩復合染色法） 1染液的配制瑞氏染料10g 姬姆薩染料03g 甲醇（分析純） 500 ml 將全部染料放入研缽中，加少量甲醇，慢慢研磨片刻，吸出上層染液。再加入少量甲醇，繼續研磨后吸出上液。如此反復幾次，使染料全部溶解于500 ml 甲醇。收集于潔凈的棕色瓶中

3、，每天早、晚各振搖3 分鐘，共5 天，存放1 周即可使用。新配染料染色效果較差，放置時間愈長，染色效果愈好，但須蓋嚴瓶以免甲醇揮發或氧化成甲酸。2pH 64 68 磷酸鹽緩沖液磷酸二氫鉀（K H 2PO 4） 664g 磷酸氫二鈉（Na2HP O 4） 256g 加少量蒸餾水溶解，用磷酸鹽溶液調整pH ，加水至1000 ml 。3染色方法（1） 標本平放，最好置于架起的雙玻棒上； （2） 甲醇固定3 分鐘； （3） 加染液3 5 滴覆蓋整個涂片，靜置1 分鐘； （4） 加染液1 15 倍的磷酸鹽緩沖液，使兩液混勻，染色約10 15 分鐘； （5） 沖洗涂片上的染液，沖洗后豎置于片架上自然干燥或

4、用潔凈吸水紙將水吸干。四、骨髓象觀察和細胞分類（一） 骨髓涂片的低倍鏡觀察1觀察骨髓涂片情況是否符合取材標準，即骨髓涂片含有核細胞多，涂片尾部有骨髓小粒、骨髓特有細胞或油滴。涂片厚薄是否適度，細胞分布是否均勻，以及有核細胞著色是否正常，細胞是否清晰易辨。若涂片情況較差，選良好涂片，并將情況填寫記錄。2觀察骨髓有核細胞增生程度根據骨髓涂片中所含有核細胞多少，確定骨髓的增生程度以了解造血功能。通常于骨髓涂片中段選擇幾個細胞分布均勻的視野觀察成熟紅細胞與有核細胞比例，將骨髓增生程度分為5 級（表19 1）。觀察增生情況，同時要注意片體、片尾細胞分布不均的差異。對增生低下的標本應觀察全部送檢髓片，以防

5、遺漏有代表性的標本。以上分極標準臨床工作中仍感不足，為此在上述劃分的基礎上，將增生減低、活躍和明顯活躍按有核細胞數目的不同各分成 和兩級，共分成8 級： 增生極度活躍有核細胞均數220 ×109 1 ×1012L 增生明顯活躍有核細胞均數238 ×109L 增生明顯活躍有核細胞均數156 ×109L 增生活躍有核細胞均數88 ×109L 增生活躍有核細胞均數61 ×109L 增生減低有核細胞均數41 ×109L 增生減低有核細胞均數31 ×109L 增生重度減低有核細胞均數少于5 ×109L 3計數全片巨

6、核細胞瀏覽計數全部片膜內的巨核細胞，然后轉換油鏡進行分類計數，并觀察巨核細胞及血小板形態。4觀察有無特殊細胞注意涂片尾部、上下邊緣及骨髓小粒周圍有無體積較大或成堆出現的特殊細胞，如轉移癌細胞、高雪細胞、尼曼匹克細胞、多核巨細胞等。（二） 骨髓涂片的油鏡觀察1有核細胞分類從涂片中段開始，由頭部（右） 向尾部（左），上下迂回漸進，計數有核細胞200 500 個。根據細胞形態特點逐一加以辨認，分別計入不同的細胞系統和不同的發育階段，然后計算其百分率。分類計數中破碎細胞和核分裂細胞不計在內（可另計）。2觀察各系統細胞形態（1） 粒細胞系：除觀察增生程度及各階段細胞比值外，同時觀察胞體的大小（如巨幼樣變

7、等），胞核的形態、成熟度（有無Pelger 形核、核出芽、分葉過多、核溶解等）， 胞漿有無顆粒異常、空泡、吞噬物等，嗜酸、嗜堿性粒細胞的比值和有無形態異常。（2） 紅細胞系：除觀察增生程度及各階段細胞比值外，注意有無形態異常（巨幼樣變等），胞核有無固縮、破裂、出芽， 胞漿中有無嗜堿性點彩、Howell Jolly 小體、Cabot 環等。同時觀察成熟紅細胞大小、形態、著色深淺、血紅蛋白含量等是否正常。（3） 巨核細胞：分類計數并觀察細胞形態有無異常，同時觀察血小板數量、大小、形態、聚集性及顆粒變化。（4） 單核細胞、淋巴細胞、漿細胞、網狀細胞、內皮細胞、組織嗜堿細胞、吞噬細胞等有無數量及形態異

8、常。3觀察有無異常細胞及寄生蟲。（三） 結果的計算1計算各系統各階段細胞分別占有核細胞總數的百分率。2計算粒紅比例，將各階段粒細胞百分率的總和與各階段有核紅細胞百分率的總和相比，即為粒紅比值（G E）。（四） 配合觀察血象1低倍鏡檢查觀察涂片及染色是否滿意，估計有核細胞數。2油鏡檢查（1） 分類計數100 有核細胞（包括幼稚細胞），注意細胞形態有無異常。（2） 注意成熟紅細胞形態有無異常。（3） 觀察血小板的數量及形態變化。（4） 觀察有無寄生蟲。五、正常骨髓象（1） 骨髓有核細胞增生活躍。（2） 粒紅比值正常（2 41）。（3） 粒細胞系所占比例最大，約占40 60 ，一般原粒細胞小于2 ，

9、 早幼粒細胞小于5 ，二者之和小于10 ，中、晚幼粒細胞各小于15 ，成熟粒細胞中桿狀核多于分葉核，嗜酸性粒細胞小于5 ，嗜堿性粒細胞小于1 。（4） 紅細胞系占骨髓第二位， 約20 左右，原紅細胞小于1 ， 早幼紅細胞小于5 ，以中、晚幼紅細胞為主，平均各約為10 ，無巨幼紅細胞。成熟紅細胞大小、形態正常。（5） 淋巴細胞占20 （小兒可達40 ），難見到原始淋巴和幼稚淋巴細胞。（6） 單核細胞小于4 ，主要是成熟階段。（7） 漿細胞小于4 ，主要是成熟階段。（8） 巨核細胞，15cm ×3cm 髓膜可見巨核細胞7 35 個，難見原始巨核細胞，其中幼巨核細胞0 5 ，顆粒型巨核細胞

10、10 27 ，產板型巨核細胞44 60 ，裸核8 30 。髓片約每25 個成熟紅細胞應有一個血小板，無異形和巨大血小板。（9） 非造血細胞，如網狀細胞、吞噬細胞、組織嗜酸細胞等可少量存在，它們百分率雖然很低，但卻是骨髓的標志。（10） 無異常細胞和寄生蟲，不易見核分裂象。第二節骨髓穿刺涂片檢查一、骨髓穿刺檢查的適應證1各種貧血及白細胞減少癥。2急、慢性白血病。3骨髓增殖異常綜合征（M DS）。4血液系腫瘤：如淋巴瘤、惡性組織細胞增生癥、多發性骨髓瘤等。5原發性或繼發性血小板減少癥及血小板增多癥。6紅細胞增多癥。7骨髓纖維化及骨髓壞死。8骨髓轉移癌。9類脂質沉積癥：如尼曼匹克病、戈謝（高雪） 病

11、等。10肝脾腫大及脾功能亢進癥。11類白血病反應。12某些傳染病或寄生蟲病需行骨髓細胞培養或涂片尋找病原體。13發熱待查。二、常用的骨髓穿刺點1髂前上嵴穿刺。2髂后上嵴穿刺。3胸骨體穿刺。4脊椎棘突穿刺。5脛骨前穿刺（適用于2 歲以內小兒）。6局部定向穿刺：有些病損呈局灶性浸潤，如經X 線平片或B 超檢查定位， 可行局部定向穿刺。三、正常成人骨髓象各階段血細胞形態學特征一、紅細胞系統（一） 原紅細胞直徑15 20m ，呈圓形或橢圓形， 邊緣常有鈍角狀或瘤狀突起。胞核圓形或橢圓形，居中或稍偏位，占細胞直徑的45 ，核染色質呈細顆粒狀，有1 2 核仁，大小不均，染淡藍色。胞漿量少，深藍色，不透明，

12、呈油墨藍色，在核周形成淡染區。（二） 早幼紅細胞較原紅細胞小，直徑10 18m ，呈圓形或橢圓形。胞核圓形， 占細胞直徑的23 以上，多居中，核染色質呈較粗粒狀或小塊狀，有聚集現象，核仁模糊或消失。胞漿量相對較多，染深藍色，不透明，因開始合成血紅蛋白，故著色較原紅細胞淡，但不應出現紅色調。瘤狀突起及核周淡染區仍可見。（三） 中幼紅細胞較早幼紅細胞明顯為小，直徑8 15m ，圓形。胞核圓形，占細胞的12 ， 核染色質成塊狀或條索狀，核仁消失。胞漿量明顯增多，由于血紅蛋白含量逐漸增多而與嗜堿性物質同時存在而呈嗜多色性，染灰色、灰藍色或紅藍色。（四） 晚幼紅細胞細胞更小，直徑7 10m ，圓形。胞核

13、圓，居中或偏位，占細胞12 以下，核染色質聚集成碎墨塊狀，染黑色。胞漿量多，呈淡紅或淺灰色。（五） 網織紅細胞為未完全成熟的紅細胞，直徑8 9m ，在正常血液內占5 15 。因胞漿中殘存核糖核酸等嗜堿性物質，煌焦油藍活體染色呈淺藍或深藍色網狀結構。（六） 巨幼紅細胞見于胚胎早期及葉酸、維生素B12 缺乏的巨幼紅細胞貧血。此類細胞亦有原始、早、中、晚幼四個階段，成熟后為巨紅細胞。其形態特點為胞體較大，胞漿豐富，核染色質細致，疏松，有“核晚熟” 現象。1原巨幼紅細胞胞體巨大，直徑15 30m 。胞核亦大，呈圓形或橢圓形，居中或偏位， 核染色質呈細顆粒狀，分布較為均勻，結成疏松纖細的網狀，無任何聚集

14、傾向， 核仁2 6 個， 圓形，常融合。胞漿量豐富，染色深藍，著色不均，核周淡染區明顯。2早巨幼紅細胞直徑13 22m ，圓形，胞核大， 核染色質開始聚集，因而略粗糙疏松， 有時可見核仁。胞漿豐富，呈藍色或嗜多色性。3中巨幼紅細胞直徑10 20m ，圓形。胞核圓形，核染色質聚集成較粗的網狀，但較正常中幼紅細胞細致，看不見核仁。胞漿豐富，胞漿著色已近于正常成熟紅細胞。4晚巨幼紅細胞直徑8 18m ，核呈橢圓形，常居一側，可見多核、多核分裂或碎核等異常，核染色質比中巨幼紅細胞粗，但比正常晚幼紅細胞細致，大多數尚有網狀結構痕跡，線條甚粗。胞漿充滿血紅蛋白，呈粉紅色。二、粒細胞系統（一） 原粒細胞I

15、型直徑10 18m ，圓形或橢圓形。胞核占細胞直徑的23 以上， 圓形或橢圓形，居中或稍偏一側，核染色質呈細砂粒狀，分布均勻似一層薄紗，核仁2 5 個，呈藍色或無色。胞漿量少，呈透明天藍色或水彩藍色。（二） 原粒細胞型具有原粒細胞I 型形態特點，不同的是胞漿中有少量細小顆粒，但無具體標準，解釋為量很少、無粗大顆粒。（三） 早幼粒細胞直徑12 20m ，是粒細胞系各階段細胞中最大者， 呈圓形。胞核圓形或橢圓形， 多偏位，核染色質開始聚集，呈顆粒狀， 多數細胞可見核仁。胞漿量較原粒細胞為多， 呈淡藍色、藍色或深藍色，漿中出現大小不等、形態多樣、多少不一、分布不均的紫紅色嗜天青顆粒。（四） 中幼粒細

16、胞直徑10 18m ，圓形。胞核橢圓形或一側變平， 占細胞直徑的23 12 ，核染色質呈粗粒狀或凝集小塊，核仁消失。胞漿中出現特異性顆粒，將中幼粒細胞分為： 1中性中幼粒細胞胞漿中含細小密集的紫紅色或紅色中性顆粒。2嗜酸性中幼粒細胞略大于中性中幼粒細胞，直徑15 20m 。胞漿中充滿大小均勻、排列緊密的橘紅色顆粒，較中性顆粒大，有折光性。3嗜堿性中幼粒細胞略小于中性中幼粒細胞，直徑10 12m 。胞漿中含有數目不多、大小不等、排列不均的深藍色顆粒。（五） 晚幼粒細胞直徑10 16m ，圓形。胞核明顯凹陷， 呈腎形、馬蹄形、半月形， 但凹陷程度不超過核假設直徑的12 ，核染色質粗糙。胞漿量增多，

17、淡紅色，充滿特異性顆粒。根據胞漿中的顆粒性質分為：中性、嗜酸性和嗜堿性晚幼粒細胞。（六） 桿狀核粒細胞直徑10 13m ，圓形。胞核凹陷大于假設直徑的12 ，呈帶狀、馬蹄狀、S 形等。根據胞漿中顆粒性質分為：中性、嗜酸性和嗜堿性桿狀核粒細胞。（七） 分葉核粒細胞直徑10 13m ，圓形。核分葉，葉與葉之間有一條線連接， 中性粒細胞分為2 5 葉；嗜酸性粒細胞分為2 葉；由于大量嗜堿性顆粒散布在細胞核上，嗜堿性粒細胞分葉狀態常看不清。根據胞漿中顆粒性質分為：中性、嗜酸性、嗜堿性分葉粒細胞。三、淋巴細胞系統（一） 原淋巴細胞直徑10 18m ，圓形或橢圓形。胞核圓形或橢圓形，居中或稍偏位，核染色質

18、細粒狀，但較原粒細胞染色質粗，核仁及核膜周圍分布較密，核仁1 2 個。胞漿量極少， 呈藍色或天藍色，透明，無顆粒，可見核周淡染區。（二） 幼淋巴細胞直徑10 16m ，圓形或橢圓形。胞核圓形或橢圓形，核染色質較原淋巴細胞粗糙， 核仁模糊或消失。胞漿量增多，染淡藍色，可出現少量紫紅色嗜天青顆粒。（三） 淋巴細胞分大小兩種，大淋巴細胞，直徑12 15m ，胞核圓形、橢圓形或腎形， 核染色質排列緊密，無核仁，胞漿量較豐富，淡藍色，透明，常有可數的幾顆嗜天青顆粒。小淋巴細胞，直徑6 9m ，胞核圓形， 可有切跡，核染色質致密，塊狀聚集，無核仁，胞漿量極少或近無漿，無顆粒。四、單核細胞系統（一） 原單核

19、細胞直徑15 20m ，圓形、橢圓形或不規則形。胞核圓形或不規則形， 核染色質纖細呈疏松網狀，較其它原始細胞淡薄， 核仁1 3 個。胞漿量較其它原始細胞豐富，灰藍色，不透明，有時有偽足突出。（二） 幼單核細胞直徑15 25m ，圓形或不規則形。胞核圓形或不規則形，可扭曲折疊或分葉，核染色質較原單細胞粗糙，仍呈網狀，核仁可有可無。胞漿呈灰藍色，可見多數細小的紫紅色天青胺藍顆粒。（三） 單核細胞直徑12 20m ，不規則形。胞核形態不規則，呈馬蹄形、腎形、S 形、分葉形、筆架形，并有明顯扭曲折疊，核染色質呈疏松網狀或條索狀。胞漿豐富，染灰藍色，半透明，如毛玻璃樣，含較多細小灰塵樣的紫紅色嗜天青顆粒

20、。五、漿細胞系統（一） 原漿細胞直徑14 18m ，圓形或橢圓形。胞核圓形， 占細胞直徑的23 以上，居中或偏位， 核染色質呈粗顆粒網狀，核仁3 5 個不等。胞漿量較多，深藍色，不透明，較其它原始細胞胞漿著色深而暗，無顆粒，有時有空泡。（二） 幼漿細胞直徑12 16m ，橢圓形。胞核圓形或橢圓形，占細胞12 ，居中或偏位，核染色質較原漿細胞粗糙緊密，開始聚集，核仁不清或消失。胞漿最多，染灰藍色，不透明，有混濁或泡沫感，可見核周淡染區，偶見嗜天青顆粒。（三） 漿細胞直徑8 15m ，圓形或橢圓形。胞核縮小，圓形或橢圓形，常偏位，核染色質緊密成塊，常排列成車輪狀，無核仁。胞漿豐富，染藍色或紅藍相混

21、色，有泡沫感，可見核周淡染區，有空泡，偶見少數嗜天青顆粒。六、巨核細胞系統（一） 原巨核細胞直徑15 30m ，圓形或不規則形。胞核圓形或腎形，常有小切跡， 核染色質呈粗大網狀，染深紫褐色或淡紫紅色， 可見2 3 個核仁， 染淡藍色。胞漿量較豐富，邊緣不規則，染深藍色，無顆粒。（二） 幼巨核細胞直徑30 50m ，外形不規則。胞核較大且不規則，核染色質粗糙， 呈粗顆粒狀或小塊狀，核仁可有可無。胞漿最多，呈藍色或淺藍色，近核處呈淺藍色或淡粉紅色，可有嗜天青顆粒。（三） 巨核細胞1顆粒型巨核細胞直徑40 70m ，有時可達100m ，形態不規則。胞核較大， 圓形、不規則形或分葉狀，核染色質粗糙，呈塊狀或條索狀。胞漿量極豐富，染粉紅色，夾雜有藍色，充滿大量細小紫紅色顆粒，但無血小板形成。2產板型巨核細胞是完全成熟的巨核細胞，是骨髓中最大的細胞，與顆粒型巨粒細胞不同是胞漿中局部或全部形成血小板。3裸核型巨核細胞產板型巨核細胞的胞漿解體后，血小板完全脫落，只剩下一胞核