1、實驗六 維生素C含量的測定2, 6-D滴定法一、目的意義o人類營養中最重要的維生素之一。缺乏時引人類營養中最重要的維生素之一。缺乏時引起壞血病。起壞血病。o果蔬質量的重要目的之一。果蔬質量的重要目的之一。o不同栽培條件，不同成熟度都可以影響水果、不同栽培條件，不同成熟度都可以影響水果、蔬菜中維生素蔬菜中維生素C C的含量。的含量。o水果、蔬菜保鮮貯藏必需測定維生素水果、蔬菜保鮮貯藏必需測定維生素C C含量，含量，了解果蔬質量量的高低。了解果蔬質量量的高低。測定方法：滴定管活塞操作滴定操作2.6-2.6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法滴定操作2.6-2.6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法o維

2、生素維生素C: 強的復原性強的復原性o將染料將染料2.6-D 復原成無色的復原成無色的2.6-Do2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚:強的氧化性強的氧化性o中性中性/堿性堿性: 藍色藍色o酸性酸性:紅色紅色復原型復原型抗壞血酸抗壞血酸氧化型氧化型2.6-2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚 紅色紅色復原型復原型2.6-2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚 無色無色氧化型氧化型2.6-2.6-二氯酚靛酚藍色二氯酚靛酚藍色 O =C |HO C HO C | H C |HO CH | CH2OHO O =C | O = C | O = C | H C |HO CH | CH2OHO脫氫脫氫抗壞血酸抗壞血酸=NO-Cl

3、|O= |Cl=NOHCl |O= |ClNOHCl |HO |Cl |HH+OH-三、操作步驟三、操作步驟1. 1. 樣品提取樣品提取 2. 2.染料標定及樣品中染料標定及樣品中VcVc測定測定試劑ml空白染料標定1染料標定2樣品測定1樣品測定22%草酸100000規范Vc 0101000樣品提取液00010102, 6-D滴定值y1Vy0l y1- y1-滴定空白所用染料滴定空白所用染料mlml數數l y0- y0-滴定樣品所用染料滴定樣品所用染料mlml數數l A-1mL A-1mL染料溶液相當的抗壞血酸的染料溶液相當的抗壞血酸的mgmg數數四、結果計算樣品重樣品重(g) 1001001

4、0抗壞血酸含量抗壞血酸含量mg/100g mg/100g 鮮重鮮重 = =y0-y1A從上述標定求出從上述標定求出五、本卷須知1. Vc1. Vc不穩定，在空氣中易被氧化，研磨時，盡能夠要快，不穩定，在空氣中易被氧化，研磨時，盡能夠要快，以減少以減少VcVc的氧化。的氧化。2. 2% 2. 2% 草酸可以有效抑制草酸可以有效抑制VcVc氧化酶活性。假設用樣品含有大氧化酶活性。假設用樣品含有大量量Fe2+Fe2+，可用，可用8%8%醋酸溶液提取，因在醋酸溶液提取，因在2%2%草酸中草酸中Fe2+ Fe2+ 仍仍可以復原可以復原2,6-D, 2,6-D, 改用改用8%8%醋酸溶液提取，醋酸溶液提取

5、，Fe2+Fe2+不會很快與不會很快與染料起作用。染料起作用。3. 3.維生素維生素C C提取時要避光、防止與銅鐵接觸，以免提取時要避光、防止與銅鐵接觸，以免VcVc氧化。氧化。4. 樣品提取液定容時假設泡沫太多，可加幾滴乙醚或樣品提取液定容時假設泡沫太多，可加幾滴乙醚或辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。5. 當樣品本身帶有顏色時，可以用白陶土脫色。當樣品本身帶有顏色時，可以用白陶土脫色。6. 滴定時間普通不超越滴定時間普通不超越2分鐘，滴定終點以淡紅色存分鐘，滴定終點以淡紅色存在在30秒為準。由于樣品中某些雜質亦能復原秒為準。由于樣品中某些雜質亦能復原2,6-D，但速度較但速度較Vc慢，假設滴定速度過慢，其它物質也會慢，假設滴定速度