1、乙型肝炎病毒抗體診斷（膠體金法 SOP）測定標(biāo)準(zhǔn)操作程序編寫者：宿金濤日期：2012年3月1日一原理：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗體、e抗原、e抗體、核心抗體檢測試劑盒（膠體 金法）采用膠體金免疫層析分析技術(shù)、將五個診斷意義相關(guān)的試劑通過一個包裝組合在一起，同 時(shí)進(jìn)行乙型肝炎病毒五項(xiàng)標(biāo)志物的檢測，在不影響各自性能的情況下，便于客戶的儲存和使 用。HBsAg檢測試劑采用雙抗體夾心法，試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的抗體。測試時(shí)，標(biāo)本滴入試劑加樣處，標(biāo)本與預(yù)包被的膠體金顆粒結(jié)合的抗HBsAg抗體反應(yīng)。然后，混合物隨之在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析。如是陽性，膠體金抗體在層析過程中先于標(biāo) 本中的HBsA

2、g結(jié)合，隨后家何物會被固定在膜上的抗HBsAg抗體結(jié)合，在測 試區(qū)內(nèi)（T）會 出現(xiàn)一條紫紅色帶。這條帶是HBsAg抗體-HBsAg-HBsAg抗體金標(biāo)粒 子的復(fù)合物在膜上結(jié)合 形成的。如是陰性，則測試區(qū)內(nèi)（T）將沒有紫紅色帶。無論HBsAg是否存在于標(biāo)本中，一條紫紅色帶都會出現(xiàn)在指控內(nèi)（C） o質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）所顯現(xiàn)的 紫紅色條帶是判定是否有足夠標(biāo)本，層析過程是否正常的標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。HBsAb檢測試劑雙抗原夾心法，試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的乙肝表面抗體。測試時(shí)，標(biāo)本滴入試劑加樣處，標(biāo)本與預(yù)包被的膠體金顆粒結(jié)合的HBsAg反應(yīng)。然后，混合物隨之在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析。如

3、是陽性，膠體金抗體在層析過程中先于標(biāo)本中的 HBsAg結(jié)合，隨后結(jié)合物會被固定在膜上的HBsAg抗體結(jié)合，在測試區(qū)內(nèi)（T）會出現(xiàn)一條紫 紅色條帶。這條帶是HBsAgHBsAbHBsAg金標(biāo)粒子的復(fù)合物在膜上結(jié)合形成的。如果陰 性，則測試區(qū)內(nèi)（T）將沒有紫紅色條帶。無論HBsAg是否存在于標(biāo)本中，一條紫紅色條帶都 會出現(xiàn)在質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）。質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）所顯現(xiàn)的紫紅色條帶是判定是否有足夠標(biāo)本，層析過 程是否正常的標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。HBeAg檢測試劑采用雙抗體夾心法，試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的乙肝e抗體。測試時(shí)，標(biāo)本滴入試劑加樣處，標(biāo)本與預(yù)包被的膠體金顆粒結(jié)合的HBeAg抗

4、體反應(yīng)。然后，混合物隨之在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析。如是陽性，膠體金抗體在層析過程中先于標(biāo)本 中的HBeAg結(jié)合，隨后結(jié)合物會被固定在膜上的HBeAg抗體結(jié)合，在測試區(qū)內(nèi)（T）會出現(xiàn) 一條紫紅色條帶。這條帶是HBeAg抗體-HBeAg-HBeAg抗體金標(biāo)粒子的復(fù)合物在膜上結(jié)合形 成的。如果陰性，則測試區(qū)內(nèi)（T）將沒有紫紅色條帶。無論HBeAg抗 體是否存在于標(biāo)本中， 一條紫紅色條帶都會出現(xiàn)在質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）。質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）所顯現(xiàn)的 紫紅色條帶是判定是否有足夠標(biāo)本，層析過程是否正常的標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。HBeAb,HBcAb檢測試劑才有競爭抑制法，試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的抗 體

5、。測試時(shí)，血清或血漿標(biāo)本滴入試劑加樣處，隨之標(biāo)本在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析。如標(biāo) 本中含有相應(yīng)的抗體，貝U同膜上測試區(qū)（T）的抗體競爭與預(yù)包被在金標(biāo)粒子的相應(yīng)抗體反 應(yīng)。如果標(biāo)本中沒有相應(yīng)抗體，預(yù)包被在金標(biāo)粒子的復(fù)合物的相應(yīng)抗原則同膜上測試 區(qū)（T）的 抗體全部結(jié)合。陽性標(biāo)本，測試區(qū)內(nèi)（T）將沒有紫紅色條帶，陰性標(biāo)本，測試區(qū)內(nèi)（T）將會 出現(xiàn)明顯的紫紅色條帶。無論相應(yīng)的抗體是否存在于標(biāo)本中，一條紫紅色條帶都會出現(xiàn)在質(zhì)控區(qū) 內(nèi)（C）。質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）所顯現(xiàn)的紫紅色條帶是判定是否有足夠標(biāo)本，層析過程是否正常的標(biāo) 準(zhǔn)，同時(shí)也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。二試劑：英科新創(chuàng)乙肝五項(xiàng)檢測卡（膠體金法）。規(guī)格為25人份/盒。

6、產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號:YZB/國 0378-2009 o三操作步驟：1將待測標(biāo)本從儲存條件下取出，平衡至室溫（18-25 C）并編號。2、將膠體金測試卡從包裝盒中取出，打開鋁箔包裝袋，平置于臺面上。編號（與樣品相 對應(yīng)）；3、用塑料滴管加滴樣本血清或血漿，加入試劑板的五個加樣孔。4、等待紫紅色條帶的出現(xiàn)，測試結(jié)果應(yīng)在測定開始后20分鐘開始讀取。30分鐘后判斷 無效。四參考范圍：正常人為陰性。五、結(jié)果判定HBsAg HBsAb HBeAg陽性：兩條紫紅色條帶出現(xiàn)。一條位于測試區(qū)（T）內(nèi)，另一條位于質(zhì)控區(qū)（C） o陽性結(jié) 果表明：標(biāo)本中含有待測物質(zhì)。陰性：僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色條帶，在測試區(qū)（T）內(nèi)

7、無紫紅色條帶出現(xiàn)。陰性結(jié) 果表明：標(biāo)本中檢測不出待測物質(zhì)無效：質(zhì)控區(qū)（C）未出現(xiàn)紫紅色條帶，表明不正確的操作過程或試劑已變質(zhì)損壞。在此情 況下，應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書，并用新的試劑重新測試。如果問題仍然存在，應(yīng)立即停止使用此 批號產(chǎn)品，并與當(dāng)?shù)毓?yīng)商聯(lián)系。注意：測試區(qū)（T）內(nèi)的紫紅色條帶可顯現(xiàn)出顏色深淺的現(xiàn)象。但是，在規(guī)定的觀察時(shí)間 內(nèi)，不論該色帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應(yīng)判定為陽性結(jié)果。HBeAb HBcAb陽性：僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色條帶，在測試區(qū)（T）內(nèi)無紫紅色條帶出現(xiàn)。陽性結(jié) 果表明：標(biāo)本中含有待測物質(zhì)。陰性：兩條紫紅色條帶出現(xiàn)，一條位于測試區(qū)（T）內(nèi)，另一條位于質(zhì)控區(qū)（C

8、）。陰性結(jié) 果表明：標(biāo)本中檢測不出待測物質(zhì)。無效：質(zhì)控區(qū)（C）未出現(xiàn)紫紅色條帶，表明不正確的操作過程或試劑已變質(zhì)損壞。在此情況 下，應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書，并用新的試劑重新測試。如果問題仍然存在，應(yīng)立即停止使用此批號產(chǎn)品，并與當(dāng)?shù)毓?yīng)商聯(lián)系庁HBeMiHBcM出卿n'秤竄見楔式1 *4FC）富性咼¥：惑毅越向恢晝；慢世明馬鮭撻苦者；隹 染擺芻即緒刪耳際三HI.S'imt2 +急性或慢性乙甦拝畑站 嗯不腳，復(fù)制.慣躬劉 即昭的30沁3 過去和現(xiàn)在未感染過HBV電 _1換境期!懸鳩可乩抗-映木出酣Tio*朮圧往眩皿E攜帶著-往感梁過金¥；念性HK感染恢復(fù)期：5t+

9、由）少數(shù)標(biāo)本仍看傳塾性.KEY感染已過；抗KBs.M 現(xiàn)前前zfch* ii 4+H曠:ox6 （1）注射址乙肝吊自先疫；既往愿染：惻E性.T _急性冊¥逼后康復(fù).6m有L性垃寸畫卑：©慢性腸M帶著；傳探由玉10*15*9+既往感翼，仍有免貶無測愿染，恢良須*血八“六. 臨床意義：乙肝肝炎病毒引起的感染帶來了嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。母嬰傳播、性傳播和血液傳播是最主要的傳播途徑。盡早的發(fā)現(xiàn)感染可以有效的減少疾病的傳播。乙肝五項(xiàng)檢測卡（膠體金法）定性檢測人血清、血漿中的乙肝表面抗原、表面抗體、e抗 體、核心抗體、用于乙型肝炎病毒感染的輔助診斷。七. 病人及樣本要求：1、本品適用于血

10、清、血漿樣本，血漿樣本對臨床常用抗凝劑（EDTA肝素、枸椽酸鈉）無要求；樣本的采集須遵循常規(guī)的醫(yī)療樣本的采集方法并遵守相關(guān)的醫(yī)學(xué)規(guī)定。2、采集靜脈血樣本必須在無菌條件下操作，并避免樣品溶血。3、如果血清和血漿樣品收集后7天內(nèi)檢測，樣品須放在2-8 C保存；大于7天須-20 C 以下冷凍保存。4、溶血、粘稠及高脂標(biāo)本不適于本試劑。含特珠物質(zhì)（如強(qiáng)氧化劑）的標(biāo)本可能會導(dǎo)致檢 測結(jié)果不穩(wěn)定，在檢測前須清除。八. 注意事項(xiàng)：1、檢測必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范和物物安全守則的規(guī)定，操作時(shí)必須戴手套、穿工作月艮、嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。2、乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗體、e抗原、e抗體、核心抗體檢測試劑盒（膠 體金 法）適用于測試血清或血漿標(biāo)本，其他標(biāo)本或溶液進(jìn)行檢測可能出現(xiàn)異常結(jié)果。3、由于在技術(shù)上和操作上可能出現(xiàn)的失誤，同時(shí)也由于標(biāo)本中存在干擾物質(zhì)，檢測 結(jié)果有 可能錯誤。4、請保證適量的標(biāo)本用于檢測，過多或過少的標(biāo)本量都有可能導(dǎo)致結(jié)果的偏差。5、測試結(jié)果應(yīng)在測定開始后20分鐘讀取，30分鐘后判定無效。6本產(chǎn)品為目視讀取結(jié)果，為保證判定結(jié)果的正確，請勿在光線昏暗處對結(jié)果進(jìn)行判讀。7、試劑可在室溫下保