醫(yī)學(xué)動(dòng)物試驗(yàn)操作技術(shù)應(yīng)華忠YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第1頁(yè)動(dòng)物試驗(yàn)：動(dòng)物試驗(yàn)是用試驗(yàn)動(dòng)物作為人替身進(jìn)行各種生命科學(xué)試驗(yàn)過(guò)程。動(dòng)物試驗(yàn)操作技術(shù)：是實(shí)施動(dòng)物試驗(yàn)主要伎倆，在不一樣研究領(lǐng)域有其不一樣目標(biāo)和應(yīng)用，一些基本操作技術(shù)是共同，基本動(dòng)物試驗(yàn)技術(shù)需要訓(xùn)練。

內(nèi)容：動(dòng)物試驗(yàn)準(zhǔn)備、動(dòng)物試驗(yàn)基本操作技術(shù)、動(dòng)物試驗(yàn)后管理技術(shù)以及應(yīng)該注意影響動(dòng)物試驗(yàn)效果原因等YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第2頁(yè)動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果ByChenMin-li動(dòng)物反應(yīng)

：R＝(A+B+C)×D±E式中：R——試驗(yàn)動(dòng)物總反應(yīng)

A——試驗(yàn)動(dòng)物種共同反應(yīng)

B——?jiǎng)游锲贩N及品系特有反應(yīng)

C——?jiǎng)游飩€(gè)體反應(yīng)（個(gè)體差異）

D——環(huán)境影響（包含試驗(yàn)處理）

E——試驗(yàn)誤差(試驗(yàn)操作相關(guān))YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第3頁(yè)第一節(jié)動(dòng)物試驗(yàn)前準(zhǔn)備一、動(dòng)物試驗(yàn)相關(guān)準(zhǔn)備試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)明確（課題設(shè)計(jì)）：研究、申報(bào)新藥資料動(dòng)物試驗(yàn)相配套設(shè)備、儀器、試劑標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)動(dòng)物喂養(yǎng)設(shè)施YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第4頁(yè)二、試驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)準(zhǔn)備

試驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證實(shí)適量飼料和墊料（高脂等特殊飼料）運(yùn)輸中各種原因?qū)υ囼?yàn)動(dòng)物影響，并應(yīng)查看運(yùn)輸檢疫證實(shí)動(dòng)物需要隔離觀察（普通3～7d適應(yīng)觀察）

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第5頁(yè)三、試驗(yàn)動(dòng)物分組隨機(jī)化標(biāo)準(zhǔn)：樣本含有極好代表性，非試驗(yàn)原因方面含有極好均衡性,提升試驗(yàn)資料可比性與結(jié)論說(shuō)服力。完全隨機(jī)化效果是否永遠(yuǎn)最好?不一定。關(guān)鍵取決于樣本含量大小。若樣本含量很大,完全隨機(jī)化效果比較理想;若樣本含量比較小,有時(shí)完全隨機(jī)化結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)一些偏差。比如：24只小鼠,其中16只雌性,8只雄性,若采取完全隨機(jī)化方式均分成2組,則有可能一組中12只小鼠全是雌性,另一組中有4只雌性、8只雄性小鼠。“性別”這個(gè)主要非試驗(yàn)原因就嚴(yán)重地影響試驗(yàn)。此時(shí),宜采取“分層隨機(jī)化”。隨機(jī)化方法有各種,能夠查“隨機(jī)數(shù)字表”、“隨機(jī)排列表”或查“用計(jì)算機(jī)產(chǎn)生偽隨機(jī)數(shù)字表”YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第6頁(yè)試驗(yàn)單位隨機(jī)分為三組分組情況動(dòng)物號(hào)碼123456789101112131415隨機(jī)數(shù)字186240191240839534194491690330余數(shù)321131221121333歸組CBAACABBAABACCCA組346910B組2781112C組15131415YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第7頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第8頁(yè)動(dòng)情前期可見大量有核上皮細(xì)胞YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第9頁(yè)動(dòng)情期可見大量角化上皮細(xì)胞YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第10頁(yè)交配后大鼠陰道分泌物，可見精子YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第11頁(yè)四、試驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)與標(biāo)識(shí)1、染色法：用化學(xué)試劑或藥品在試驗(yàn)動(dòng)物體表不一樣部位進(jìn)行涂染，并用不一樣顏色區(qū)分各組動(dòng)物。編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)是先左后右，從前到后，從上到下。有時(shí)用兩種顏色一個(gè)代表十位、一個(gè)代表個(gè)位。慣用染色劑有3%~5%苦味酸（黃色）、2%硝酸銀溶液（咖啡色）、0.5%中性品紅溶液（紅色）和煤焦油酒精溶液（黑色）。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第12頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第13頁(yè)2、耳緣剪孔法：是在動(dòng)物耳邊緣剪出不一樣缺口或打成不一樣小孔進(jìn)行標(biāo)識(shí)方法。為預(yù)防孔、口愈合，普通在打孔后用消毒滑石粉涂抹在孔、口局部。由打孔或剪切位置和孔數(shù)代表編號(hào)，普通在耳內(nèi)按上、中、下打孔，分別代表1、2、3，在對(duì)應(yīng)位置剪缺口代表4、5、6，剪兩個(gè)缺口代表7、8、9，無(wú)孔或缺口為10。普通左耳代表個(gè)位數(shù)、右耳代表十位數(shù)。3、烙印法：用烙印鉗或刺針將號(hào)碼刺在或烙印在動(dòng)物無(wú)體毛或顯著部位，如耳、面、鼻部及四肢等，然后用溶在酒精中黑墨在針刺處涂抹。這種方法適合用于大中型試驗(yàn)動(dòng)物，操作時(shí)要注意預(yù)防感染。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第14頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第15頁(yè)（四）號(hào)牌法：用特制金屬號(hào)牌固定在試驗(yàn)動(dòng)物耳上或頸項(xiàng)部，掛牌時(shí)要注意避開血管。此法適合用于小動(dòng)物,尤其是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物培育和試驗(yàn)。（五）籠子編號(hào)法：不在動(dòng)物身體上作標(biāo)識(shí)而把裝動(dòng)物籠子進(jìn)行編號(hào)，也叫替換法。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第16頁(yè)第一節(jié)、試驗(yàn)動(dòng)物抓取與固定YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第17頁(yè)第二節(jié)試驗(yàn)動(dòng)物抓取和固定YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第18頁(yè)

1、小鼠抓取保定：

器材：小鼠喂養(yǎng)盒+面罩1套。

方法步驟：

1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部將小鼠提起，放在喂養(yǎng)合面罩上。

2、用左手拇指和食指快速、準(zhǔn)確地捏住小鼠兩耳后、頸背部皮膚，將小鼠提起。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第19頁(yè)

3、翻轉(zhuǎn)左手掌，以左手掌心和中指夾小鼠背部皮膚，使小鼠整個(gè)呈一條直線。

4、用左手無(wú)名指壓住小鼠背部皮膚，小指壓住小鼠尾巴根部。

5、松開捏住小鼠尾巴右手拇指和食指。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第20頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第21頁(yè)手術(shù)固定法：用乙醚等麻醉藥品麻醉后，用長(zhǎng)20~30cm線繩分別系在四肢上，再把四肢線繩分別系在固定板四角釘子上，而且在頭部上顎切齒地方牽一根線繩到達(dá)完全固定。在靜脈給藥時(shí)，先依據(jù)小鼠大小選擇適當(dāng)固定器，打開鼠筒蓋，把小鼠放在里面，只露出尾巴；或者用倒放燒杯將鼠扣住，只露出尾巴并壓住。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第22頁(yè)二、大鼠抓取與固定2、大鼠抓取與固定抓取方法：4~5周齡以內(nèi)大鼠同小鼠；周齡較大大鼠其尾部皮膚輕易被剝脫，所以用左手從背部中央到胸部捏起來(lái)抓住。抓取時(shí)最好帶防護(hù)手套，但手套不宜過(guò)厚。手固定法：同小鼠。手術(shù)固定法：同小鼠。靜脈給藥或采血時(shí)同小鼠。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第23頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第24頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第25頁(yè)三、豚鼠抓取與固定抓取方法：抓取幼小豚鼠時(shí)，用手捧起來(lái)；成熟大豚鼠，用手大把抓起胸肋部即可。注意不能粗野，更不能抓取腰腹部，這么輕易造成肝破裂而死亡。手固定法：⑴將左手食指和中指放在豚鼠頸背部?jī)蓚?cè)，拇指和無(wú)名指放在肋部，分別用手指夾住左右前肢抓起來(lái)。⑵反轉(zhuǎn)左手，用右手拇指和食指夾住右后肢，用中指和無(wú)名指夾住左后肢是豚鼠整體伸直成一條直線。⑶一個(gè)人固定操作時(shí)，坐在椅子上，用右手拿著豚鼠后肢夾在兩腿之間，用大腿代替右手夾住。手術(shù)固定法：同大、小鼠。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第26頁(yè)

方法步驟：

1、先用左手輕輕扣、按住豚鼠背部。

2、順勢(shì)抓緊其肩胛上方皮膚，拇指和食指環(huán)箍其頸部。

3、用右手輕輕托住其臀部，即可將豚鼠抓取保定。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第27頁(yè)四、家兔抓取與固定抓取方法：用一只手大把抓住頸背部皮膚提起來(lái)，另一只手托住其臀部，讓其重心落在托其臀部手上，運(yùn)輸時(shí)，還要抓住頸肩部皮膚抱著兔子運(yùn)輸。手固定法：在灌胃給藥時(shí)，人坐在椅子上，用一只手抓住頸背部皮膚，另一只手抓住兩后肢放在兩腿之間，大腿夾住兔子下半身，用空著手抓住兩前肢固定之，抓住頸背部手同時(shí)捏著兩只耳朵，不讓頭部轉(zhuǎn)動(dòng)。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第28頁(yè)固定器固定法：耳靜脈給藥或采血時(shí)用盒式固定法；從頸動(dòng)脈采血或手術(shù)試驗(yàn)時(shí)用臺(tái)式固定法。盒式固定法：把兔子放在盒子里，只露出頭部，用轉(zhuǎn)扭擰固定器固定家兔。臺(tái)式固定法：將麻醉兔子仰臥，用紗布條依次將四肢捆綁固定于固定臺(tái)兩側(cè)，然后把頭部放在金屬制首伽和咀環(huán)上固定。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第29頁(yè)兔抓取保定方法1：步驟：

1、用右手把兔兩耳拿在手心并抓住頸后部皮膚，把兔提起。

2、然后用左手托住兔臀部。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第30頁(yè)方法2：器材：兔保定架步驟：1、打開保定架上蓋，抓取并將兔放進(jìn)架內(nèi)，快速關(guān)上保定架上蓋。2、右手抓住兔耳朵將頭部拉過(guò)保定架卡栓，將兔脖子保定。3、假如兔掙扎，可用手在它背上輕輕撫摩，使其平靜。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第31頁(yè)五、犬抓取與固定抓取方法：先給犬帶上系有鐵鏈條脖套，對(duì)于性情兇猛犬，要用特制鉗式長(zhǎng)柄犬夾夾住犬頸部將犬按倒后，再系脖套和鏈條。手固定法：首先綁住犬嘴，方法是喂養(yǎng)員或犬主人從側(cè)面靠近并輕輕撫摩其頸部皮毛，然后快速用布帶綁住犬嘴，布帶從下頜繞到上頜打一個(gè)結(jié)，再繞到下頜打一個(gè)結(jié)，然后將布帶繞到頭后頸，在頸后部再打一個(gè)結(jié)，最終打一個(gè)活結(jié)，對(duì)于未經(jīng)馴服犬，可用長(zhǎng)柄犬夾夾住犬頸部按倒后強(qiáng)制綁嘴。手術(shù)臺(tái)固定法：麻醉后，松開布帶，將犬仰臥在手術(shù)臺(tái)上，先固定四肢，再固定頭部。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第32頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第33頁(yè)六、猴抓取與固定抓取方法：從籠內(nèi)抓取時(shí)，喂養(yǎng)人員應(yīng)右手持短柄網(wǎng)罩，左臂緊靠門側(cè)，以預(yù)防籠門敞開時(shí)猴逃出。右手將網(wǎng)罩塞入籠內(nèi)，由上而下罩捕。當(dāng)猴被罩住后，應(yīng)馬上將網(wǎng)罩翻轉(zhuǎn)取出籠外，罩猴在地，由罩外抓住猴頸部，清掀網(wǎng)罩，再提取猴手臂反背握住。固定方法：1.徒手固定：將猴兩前肢反背其背后，操作者用一只手握著，用另一只手將猴兩后肢捉住即可固定。2.固定架固定：使用“猴限制椅”或“猴固定架”進(jìn)行固定YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第34頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第35頁(yè)七、豬抓取與固定抓取方法：小豬常采取雙手提起后肢，兩膝夾住豬背倒立固定；成豬可采取站立固定。固定方法：可將豬仰放在“V”字型槽內(nèi)固定，也可用木制三角固定架和帆布吊兜固定（挖四個(gè)孔使其四肢下伸）。如沒有三腳架，也能夠用犬固定臺(tái)。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第36頁(yè)一、慣用麻醉劑（一）揮發(fā)性麻醉劑包含乙醚、氯仿、異氟烷（Isoflurane）。（二）非揮發(fā)性麻醉劑包含苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉(Pentobarbitol)、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙脂、水合氯醛、氯胺胴（Ketamine）、噻啦嗪（Xylazine）、速眠新、烏拉坦。（三）中藥麻醉劑包含洋金花、氫溴酸東莨菪堿等。第三節(jié)、試驗(yàn)動(dòng)物麻醉YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第37頁(yè)二、動(dòng)物麻醉方法（一）全身麻醉1.吸入麻醉：多采取乙醚做麻醉藥。把帶有乙醚棉球放入玻璃容器內(nèi)，揮發(fā)后將動(dòng)物放入容器內(nèi)4~6分鐘，動(dòng)物失去運(yùn)動(dòng)力后馬上取出動(dòng)物以防止麻醉過(guò)深致死。此法多用于短期操作性試驗(yàn)，乙醚麻醉優(yōu)點(diǎn)是清醒快，不過(guò)對(duì)呼吸道刺激性大，長(zhǎng)時(shí)間輕易窒息死亡。2.注射麻醉：大、小鼠和豚鼠常采取腹腔注射法進(jìn)行全身麻醉，犬、貓、兔等既可腹腔注射也可靜脈注射給藥。注射時(shí)，先用麻醉藥總量2/3，親密觀察動(dòng)物生命體征改變，如已經(jīng)到達(dá)所需麻醉程度，余下麻醉藥則不用，防止麻醉過(guò)深抑制大腦呼吸中樞造成動(dòng)物死亡YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第38頁(yè)

各種動(dòng)物慣用全身麻醉劑劑量及路徑劑量(mg/kg體重)動(dòng)物注射戊巴比巴比苯巴比硫噴異戊巴氯胺酮氯醛糖烏拉坦路徑妥鈉妥鈉妥鈉妥鈉妥鈉比妥鈉(20%~25%)(1%~3%)(1%~2%)(5%~10%)(10%)小鼠i.p50~80200/15~20100100~200//i.m///////1350大鼠i.p40~50200/40~100100100~200550/i.m///////1350s.c//100~110////800~1000豚鼠i.p30~50100//100///i.m///20~50///1350兔i.p25~40///80~120///i.v20~30225~300/15~2040~50/80~100750~1000犬i.p30//20~5080~10010~40//i.v3022550~10015~2040~50/60750~1000

口服/350////1001500注:i.p指腹腔注射,i.m指肌肉注射,s.c指皮下注射,i.v指靜脈注射YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第39頁(yè)（二）局部麻醉1.表面麻醉:利用局部麻醉藥組織穿透作用，透過(guò)粘膜，阻滯淺表神經(jīng)末梢，稱為表面麻醉。慣用利多卡因，眼部用藥點(diǎn)滴、鼻內(nèi)用要涂敷、咽喉氣管用藥噴霧、尿道灌注給藥。2.區(qū)域阻滯麻醉：在手術(shù)區(qū)內(nèi)四面和底部注射麻醉藥阻斷疼痛向心傳導(dǎo)，稱為區(qū)域阻滯麻醉。慣用普魯卡因。3.神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉：在神經(jīng)干(叢)四面注射麻醉藥，阻滯其傳導(dǎo)，使其所支配區(qū)域疼痛感覺消失，稱為神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉。慣用利多卡因。4.局部浸潤(rùn)麻醉：沿手術(shù)切口逐層注射局部麻醉藥，阻滯組織中神經(jīng)末梢，稱為局部浸潤(rùn)麻醉。慣用普魯卡因。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第40頁(yè)三、麻醉注意事項(xiàng)1.有些麻醉藥，如乙醚揮發(fā)性很強(qiáng)，易燃，使用時(shí)應(yīng)遠(yuǎn)離火源，平時(shí)應(yīng)妥善保留。2.應(yīng)尤其注意各種麻醉藥劑量和給藥路徑，切莫因藥量過(guò)大而引發(fā)中毒或死亡。3.注射時(shí)，普通要求遲緩注入，并隨時(shí)觀察動(dòng)物肌肉擔(dān)心性、角膜反射、呼吸頻率、疼痛反射等指標(biāo)。4.注意保溫，采取試驗(yàn)桌內(nèi)裝燈、電褥、臺(tái)燈照射等。5.萬(wàn)一麻醉過(guò)量，依據(jù)不一樣情況采取辦法，如施行人工呼吸、給予清醒劑或注射強(qiáng)心劑、咖啡因、腎上腺素、可拉明等，也能夠靜脈注射5%溫?zé)崞咸烟侨芤骸HZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第41頁(yè)一、小鼠給藥方法：

(一)灌胃給藥（經(jīng)口給藥）原理：將藥液直接注入小鼠胃內(nèi)。器材：小鼠灌胃針1支、注射器1支、小鼠喂養(yǎng)盒+面罩1套、生理鹽水、燒杯。第四節(jié)給藥方法YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第42頁(yè)

方法步驟：1、將灌胃針連接在注射器上，吸入一定量藥液。2、左手捉持小鼠，使小鼠頭部向上。3、右手將灌胃針頭尖端從小鼠口角處進(jìn)針?lè)胚M(jìn)小鼠口咽部，順咽后壁輕輕往下推，灌胃針會(huì)順著食管滑入小鼠胃內(nèi)。灌胃針插入約3cm.4、用右手食指將針?biāo)聣海瑢⒆⑸淦髦兴幰汗嗳胄∈笪钢小HZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第43頁(yè)最大劑量：0.4ml／10g體重。注意：在灌胃過(guò)程中，防止誤插入氣管。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第44頁(yè)（二）注射給藥1、皮下注射給藥：原理：將藥液注入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。器材：1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第45頁(yè)

方法步驟：

(1)注射部位：選小鼠項(xiàng)背部皮下。(2)常規(guī)消毒注射部位皮膚，用注射針頭取一銳角角度刺入皮下，

(3)將針頭輕輕向左右擺動(dòng)，易擺動(dòng)則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無(wú)回血，可遲緩地將藥品注入皮下。注射量：0.01ml—0.03ml／g體重。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第46頁(yè)2、肌肉注射給藥

原理：將藥液注入動(dòng)物肌肉組織，經(jīng)毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

器材：1ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第47頁(yè)方法步驟：(1)操作時(shí)1人先將小鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住小鼠1條后肢，右手拿注射器，常規(guī)消毒注射部位皮膚。(3)將注射器針頭在動(dòng)物后肢大腿外側(cè)肌肉豐富處呈60度角快速刺入后注入藥液。注射量：0.01m1／g體重。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第48頁(yè)3、靜脈注射給藥

原理：將藥液注入小鼠尾靜脈。

器材：1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、金屬籠或小鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第49頁(yè)

方法步驟：

(1)將小鼠放在金屬籠或小鼠固定器中，經(jīng)過(guò)金屬籠或小鼠固定器孔拉出小鼠尾巴。(2)用左手捏住小鼠尾巴中部，用75％酒精棉球重復(fù)擦拭尾部。

(3)注射時(shí)，以左手拇指和中指捏住鼠尾兩側(cè)，用食指從下面托起尾巴，以無(wú)名指夾住尾巴末梢。(4)右手持4號(hào)針頭注射器，使針頭與靜脈平行（小于30度角）。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第50頁(yè)(5)從小鼠尾巴下1／4處進(jìn)針，仔細(xì)觀察，假如無(wú)阻力，無(wú)白色皮丘出現(xiàn)，說(shuō)明已刺入血管，即可注入藥品。(6)拔出針頭后，用干棉球壓住注射部位約l、2min，預(yù)防出血。

注射量：

0.05m1—0.025m1／g體重。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第51頁(yè)

4、腹腔注射給藥

原理：將藥液注入小鼠腹腔。

器材：注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第52頁(yè)

方法步驟：

(1)用左手將小鼠捉持保定，使鼠腹部朝上，鼠頭略低于尾部。

(2)右手持注射器將針頭在下腹部靠近腹白線兩側(cè)進(jìn)行穿刺。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第53頁(yè)(3)針頭刺入皮下后進(jìn)針3mm左右，接著使注射針頭與皮膚呈45度角刺入腹肌，穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔，當(dāng)針尖穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定針頭，保持針尖不動(dòng)，回抽針?biāo)ǎ鐭o(wú)回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量：

0.5m1—1m1／只。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第54頁(yè)二、大鼠給藥方法：

(一)灌胃給藥

原理：將藥液直接注入大鼠胃內(nèi)。

器材：大鼠灌胃針1支、注射器1支、大鼠喂養(yǎng)盒+面罩l套、生理鹽水、燒杯。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第55頁(yè)方法步驟：

1、將灌胃針連接在注射器上，吸入一定量藥液。2、左手捉持保定大鼠，右手將灌胃針頭尖端放進(jìn)大鼠口咽部，順咽后壁輕輕往下推，灌胃針會(huì)順著食管滑入大鼠胃內(nèi)。灌胃針插入約5cm.YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第56頁(yè)

3、用右手食指將針?biāo)聣海瑢⒆⑸淦髦猩睇}水灌入大鼠胃中。劑量：2ml／100g體重。注意：在灌胃過(guò)程中，防止誤插入氣管。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第57頁(yè)(二)注射給藥

1、皮下注射給藥

原理：將藥液注入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

器材：5ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第58頁(yè)

方法步驟：

(1)注射部位：選大鼠項(xiàng)背部皮下。(2)常規(guī)消毒注射部位皮膚，用注射針頭取一銳角角度刺入皮下。(3)將針頭輕輕向左右擺動(dòng)，易擺動(dòng)則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無(wú)回血，可遲緩地將藥品注入皮下。注射量：0.01ml／g體重。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第59頁(yè)2、肌肉注射給藥

原理：將藥液注入動(dòng)物肌肉組織，經(jīng)毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

器材：1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第60頁(yè)

方法步驟：

(1)操作時(shí)1人先將大鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住大鼠1條后肢，右手拿注射器，常規(guī)消毒注射部位皮膚。(3)將注射器針頭在動(dòng)物后肢大腿內(nèi)側(cè)肌肉豐富處呈90度角，快速刺入后注入藥液。注射量：0.5m1-1m1。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第61頁(yè)

3、靜脈注射給藥

原理：將藥液注入大鼠尾靜脈。

器材：

1ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、金屬籠或大鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第62頁(yè)

方法步驟：

(1)將大鼠放在金屬籠或大鼠固定器中，經(jīng)過(guò)金屬籠或鼠夾孔拉出大鼠尾巴。

(2)用左手捏住大鼠尾巴中部，用75％酒精棉球重復(fù)擦拭尾部。

(3)注射時(shí)，以左手拇指和中指捏住鼠尾兩側(cè)，用食指從下面托起尾巴。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第63頁(yè)

(4)右手持4號(hào)針頭注射器，使針頭與靜脈平行(小于30度角)。（5)從大鼠尾巴下1／4或1／3處進(jìn)針，仔細(xì)觀察，假如無(wú)阻力，無(wú)白色皮丘出現(xiàn)，說(shuō)明已刺入血管，即可注入藥品。注射量：0.05—0.25ml／10g體重。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第64頁(yè)

4、腹腔注射給藥

原理：將藥液注入大鼠腹腔。

器材：注射器1支、生理鹽水、燒杯。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第65頁(yè)

方法步驟：

(1)用左手將大鼠捉持保定，使鼠腹部朝上，鼠頭略低于尾部。

(2)右手持注射器將針頭在下腹部靠近腹白線兩側(cè)進(jìn)行穿刺。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第66頁(yè)(3)針頭刺入皮下后進(jìn)針3mm左右，接著使注射針頭與皮膚呈45度角刺入腹肌，穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔，當(dāng)針尖穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定針頭，保持針尖不動(dòng)，回抽針?biāo)ǎ鐭o(wú)回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量：0.01—0.02m1／g體重。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第67頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第68頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第69頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第70頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第71頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第72頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第73頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第74頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第75頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第76頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第77頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第78頁(yè)三、豚鼠給藥方法：

(一)灌胃給藥

原理：將藥液直接注入豚鼠胃內(nèi)。

器材：灌胃針1支、注射器1支、生理鹽水、燒杯。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第79頁(yè)

方法步驟：

1、將灌胃針連接在注射器上，吸入一定量生理鹽水。

2、左手捉持保定豚鼠，右手將灌胃針頭尖端放進(jìn)豚鼠口咽部，順咽后壁輕輕往下推，灌胃針會(huì)順著食管滑入大鼠胃內(nèi)。灌胃針插入約5cm。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第80頁(yè)3、用右手食指將針?biāo)聣海瑢⒆⑸淦髦猩睇}水注入豚鼠胃中。

劑量：1—5ml。

注意：在灌胃過(guò)程中，防止誤插入氣管。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第81頁(yè)

(二)注射給藥

1、皮下注射給藥原理：將藥液注入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。器材：

1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第82頁(yè)

方法步驟：

(1)注射部位：選豚鼠項(xiàng)背部皮下。(2)常規(guī)消毒注射部位皮膚，注射針頭取一銳角角度刺入皮下。(3)將針頭輕輕向左右擺動(dòng)，易擺動(dòng)則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無(wú)回血，可遲緩地將藥品注入皮下。注射量：0.01ml／g。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第83頁(yè)

2、肌肉注射給藥

原理：將藥液注入動(dòng)物肌肉組織，經(jīng)毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。

器材：1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第84頁(yè)

方法步驟：

(1)操作時(shí)1人先將豚鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住豚鼠1條后肢，右手拿注射器，常規(guī)消毒注射部位。(3)將注射器針頭在動(dòng)物后肢大腿外側(cè)肌肉豐富處呈60度角，快速刺入后注入藥液。注射量：0.01ml／g。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第85頁(yè)

四、兔給藥方法

(一)灌胃給藥

原理：將藥液直接注入兔胃內(nèi)。

器材：兔開口器、14號(hào)胃管、注射器1支、生理鹽水、燒杯、石蠟油。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第86頁(yè)

步驟：

1、將兔放進(jìn)保定架內(nèi)，助手用手輕輕壓住兔背部，防止兔掙扎。

2、灌胃者用在手拇指和中指擠壓兔兩頰，將下頜擠開使兔被動(dòng)張口。3、右手將開口器從一側(cè)口角插入口腔并固定。4、用泡在石蠟油中胃管，經(jīng)開口器孔插入，向前推進(jìn)約15cm，可達(dá)胃內(nèi)。5、在插管時(shí)應(yīng)將胃管另一端泡在水中確認(rèn)沒有冒氣泡，即可用注射器經(jīng)胃管注入藥液。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第87頁(yè)灌胃量：

80-100ml／只／次。注

意：在灌胃過(guò)程中，防止誤插入氣管。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第88頁(yè)三、兔耳緣靜脈或兔耳中央動(dòng)脈穿刺（用于兔給藥、抽血）：

原理：穿刺兔耳緣靜脈或耳中央動(dòng)脈。

器材：兔保定架、注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第89頁(yè)

方法步驟：

(1)將兔放在保定架內(nèi)保定。

(2)酒精消毒并揉搓血管，使兔耳緣靜脈或耳中央動(dòng)脈充盈。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第90頁(yè)(3)用左手食指和中指夾住兔耳緣靜脈或耳中央動(dòng)脈近心端，拇指和小指夾住耳郭邊緣部分，無(wú)名指和小指放在耳郭下作墊。(4)右手拿注射器，針尖斜面朝上，將針頭插入血管，放松對(duì)靜脈近心端壓迫，緩慢把地藥液注射進(jìn)血管，或?qū)⒀撼槌鰜?lái)。注射或采血量：5一10ml。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第91頁(yè)

五、吸入給藥1、氣管內(nèi)滴注法2、經(jīng)口腔和經(jīng)氣管給藥法3、吸入室法大小鼠氣管插管技術(shù)

六、經(jīng)腸給藥1、兔直腸給藥2、麻醉后小腸或十二指腸灌注給藥YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第92頁(yè)

一、小鼠采血——摘除眼球采血法：

原理：將小鼠眼球摘除后取血液方法。器材：眼科彎鑷、試管。第五節(jié)樣品采集方法YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第93頁(yè)方法步驟

(1)左手抓住小鼠頸部皮膚，輕壓在試驗(yàn)臺(tái)上，取側(cè)臥位;(2)左手食指盡可能將小鼠眼周皮膚往頸后壓，使眼球突出。(3)用眼科彎鑷夾去眼球，將鼠倒立，用試管接住流出血液。(4)采血完成馬上用紗布?jí)浩戎寡２裳浚好看?.6-1.0ml/次。

小鼠眼內(nèi)眥取血?jiǎng)赢嬓∈笱劭艉箪o脈叢取血YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第94頁(yè)

二、大鼠采血

眼眶后靜脈叢(竇)取血：器材：毛細(xì)管(玻璃或塑料均可)、

1％肝素溶液、干燥皿、乙醚、試管、干棉球。

YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第95頁(yè)

方法步驟：

1、先將毛細(xì)管浸泡在1％肝素溶液中數(shù)分鐘，然后取出干燥備用。2、將大鼠進(jìn)行麻醉，使大鼠保持側(cè)臥位。3、左手拇指、食指抓住兩鼠耳之間頸部頭皮，并輕輕向下壓迫頸部?jī)蓚?cè)，致大鼠靜脈血回流障礙，眼球外突，眶后靜脈叢充血。4、右手持毛細(xì)管由大鼠內(nèi)毗部插入結(jié)膜，使毛細(xì)管與眶壁平行地向喉頭方向推進(jìn)，深度約3—5mm。5、輕輕旋動(dòng)毛細(xì)管，使其穿破靜脈叢，讓血流順毛細(xì)管流出。采血量：0.4—0.6ml／次。YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第96頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第97頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第98頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第99頁(yè)YHZ醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第100頁(yè)YHZ醫(yī)