免疫酶組織化學(xué)技術(shù)聰明出于勤奮，天才在于積累免疫酶組織化學(xué)技術(shù)免疫酶組織化學(xué)技術(shù)聰明出于勤奮，天才在于積累第三章免疫酶組織化學(xué)技術(shù)免疫酶組織化學(xué)技術(shù)酶辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶.酶標(biāo)記已知Ab(或Ag)+組織細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的Ag(或Ab)抗原抗體復(fù)合物(酶標(biāo))底物有色沉淀定位;圖像分析儀半定量“和諧教育”課堂模式要求在教學(xué)過程中，教師和學(xué)生積極互動(dòng)，共同發(fā)展。注重培養(yǎng)學(xué)生的獨(dú)立性和自主性，引導(dǎo)學(xué)生質(zhì)凝、調(diào)查、探究。同時(shí)教師應(yīng)尊重學(xué)生的人格，關(guān)注個(gè)體差異，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，使每個(gè)學(xué)生得到充分的發(fā)展。“和諧教育”的課堂模式應(yīng)抓住以下三個(gè)環(huán)節(jié)。一、和諧的課堂導(dǎo)入課堂導(dǎo)入是創(chuàng)設(shè)優(yōu)良教學(xué)情境的一個(gè)不可忽視的重要方面，課堂教學(xué)要體現(xiàn)“引人入勝”的藝術(shù)魅力，首先必須從引入教學(xué)開始。著名特級(jí)教師于漪說：“在課堂教學(xué)中要培養(yǎng)、激發(fā)學(xué)生的興趣，首先應(yīng)抓住導(dǎo)入新課的環(huán)節(jié)，開始就把學(xué)生牢牢地吸引住。”所以精心設(shè)計(jì)導(dǎo)入，為完成整堂教學(xué)作好準(zhǔn)備是十分重要的。那么如何進(jìn)入優(yōu)質(zhì)的課堂導(dǎo)入呢？1.通過問題引入一個(gè)好的問題引入要有藝術(shù)性、趣味性、啟發(fā)性，能激發(fā)學(xué)生的思維興趣。實(shí)踐證明：疑問是思維的啟動(dòng)機(jī)，它可以讓學(xué)生的求知欲望從潛伏狀態(tài)轉(zhuǎn)入活躍狀態(tài)，有力地調(diào)動(dòng)學(xué)生的思維興趣。例如在教學(xué)《端午的鴨蛋》時(shí)，一開始便提問：祖國(guó)有哪些傳統(tǒng)節(jié)日？這些節(jié)日都有些什么傳統(tǒng)習(xí)俗？在學(xué)生暢所欲言之后，引入到本文――今天大家學(xué)習(xí)的課文中作者就寫了端午時(shí)節(jié)家鄉(xiāng)的一些習(xí)俗。2.以小故事形式引入一個(gè)好的故事里應(yīng)該有事、有趣、有理，使事、趣、理融為一體，具有藝術(shù)的感染力。學(xué)生比較喜歡，在引入教學(xué)時(shí)如應(yīng)用得當(dāng)，就能起到很好的效果。3.創(chuàng)設(shè)教學(xué)情境引入指教師在開始教學(xué)時(shí)采用多媒體等手段，從一開始就吸引學(xué)生的注意力，啟發(fā)學(xué)生對(duì)課堂學(xué)習(xí)的積極情感和樂趣，如教學(xué)《羅布泊，消逝的仙湖》時(shí)，為了讓學(xué)生對(duì)羅布泊有一個(gè)整體上的印象感知，在課件中首先為學(xué)生收集了一些羅布泊以前的圖片，讓學(xué)生感受到這一仙湖的美麗，也由此自然而然地引發(fā)學(xué)生對(duì)這一美麗仙湖消逝原因的思考。二、和諧的教學(xué)過程有了良好的教學(xué)引入，怎樣保持學(xué)生高昂的學(xué)習(xí)熱情，做到課堂教學(xué)過程的和諧統(tǒng)一，是決定一堂課成效的關(guān)鍵。1.激勵(lì)學(xué)生積極參與到教學(xué)中來(lái)“和諧教學(xué)”是關(guān)注全體同學(xué)的教學(xué)，因此教學(xué)中要鼓勵(lì)各個(gè)層次的學(xué)生積極參與使每個(gè)學(xué)生都有所獲，德國(guó)著名教育家第斯多惠說得好：“我們認(rèn)為教學(xué)的藝術(shù)不在于傳授本領(lǐng)，而在于激勵(lì)、喚醒、鼓舞?！闭n堂上教師激勵(lì)學(xué)生參與，是創(chuàng)設(shè)教學(xué)高潮的重要手段，例如在課堂上多為下層次的學(xué)生創(chuàng)設(shè)回答問題的機(jī)會(huì)，在學(xué)生回答正確的情況下及時(shí)評(píng)點(diǎn)表?yè)P(yáng)，并多鼓勵(lì)他們參與課堂活動(dòng)。教學(xué)高潮的“勝”境，與主導(dǎo)者的激勵(lì)、點(diǎn)拔、啟導(dǎo)是分不開的，一個(gè)啟發(fā)有方、善于激活學(xué)生思維的教師，總是能夠抓住時(shí)機(jī)，創(chuàng)設(shè)出教學(xué)的高潮。2.師生互動(dòng)，情感交流“和諧教育”的課堂，就像一列快樂的列車，駕駛員是教師，學(xué)生就是乘客。有一位作家說過：“感人的歌聲留給人的記憶是長(zhǎng)遠(yuǎn)的?！蓖瑯樱處熢诮虒W(xué)中感人的語(yǔ)言、感人的動(dòng)作，留給學(xué)生的記憶將是長(zhǎng)久的，甚至終身難忘，所以教師在和諧課堂上盡量多與學(xué)生進(jìn)行情感交流，哪怕是一個(gè)小小的提示，一個(gè)小小的動(dòng)作，都會(huì)拔動(dòng)學(xué)生的心弦。三、和諧的課堂結(jié)尾一個(gè)引人入勝的新課導(dǎo)入，對(duì)于激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣、提高求知欲有著十分重要的作用。而一個(gè)耐人尋味的結(jié)尾，對(duì)于幫助學(xué)生理清知識(shí)脈絡(luò)、掌握知識(shí)重點(diǎn)更有意義。“和諧教育”的課堂結(jié)尾一定是耐人尋味，感人至深的。留下懸念，讓人遐想，從而展現(xiàn)出教師高超精湛、揮灑自如的教學(xué)藝術(shù)和風(fēng)格。四、延伸式結(jié)課法有些課文講完后，把課尾作為課堂內(nèi)外的紐帶，引導(dǎo)學(xué)生向課外延伸，開辟第二課堂，引導(dǎo)學(xué)生去思考，加深對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解和聯(lián)系，理論聯(lián)系實(shí)際，從生活中獲取感受，這樣課內(nèi)指導(dǎo)課外，聯(lián)系生活實(shí)際，既有利于培養(yǎng)學(xué)生分析問題、解決問題的能力，也有利于開闊學(xué)生的視野，激發(fā)濃厚的學(xué)習(xí)興趣。每一位教師都應(yīng)從教學(xué)的實(shí)際需要出發(fā)，重視并進(jìn)行課堂教學(xué)結(jié)課藝術(shù)的學(xué)習(xí)與研究，不斷總結(jié)創(chuàng)造與運(yùn)用課堂結(jié)課方式，創(chuàng)建“和諧教育”的課堂結(jié)構(gòu)模式。對(duì)農(nóng)村初中學(xué)生而言，文言文學(xué)習(xí)是一大難點(diǎn)，老師和學(xué)生在平時(shí)教與學(xué)中都花了很多功夫，但初中生的文言文學(xué)習(xí)現(xiàn)狀依然不盡如人意。學(xué)生背誦文言文困難，或者能背誦課文卻不理解其意思；用現(xiàn)代漢語(yǔ)翻譯文言句子，難以字字落實(shí)、準(zhǔn)確到位；導(dǎo)致初三總復(fù)習(xí)時(shí)對(duì)文言文手忙腳亂。學(xué)生能大致知道一些常見實(shí)詞虛詞的義項(xiàng)，在課外文言文閱讀的具體語(yǔ)境中卻不知做何解釋；能大致理解文言文內(nèi)容卻難以準(zhǔn)確把握作者要表達(dá)的主旨，有些甚至連基本意思都看不懂。這樣就導(dǎo)致學(xué)生在考試時(shí)無(wú)法下筆，失分嚴(yán)重。初中生的文言文學(xué)習(xí)低效有主客觀兩方面的原因：客觀方面是文言文與學(xué)生所處年代相隔較遠(yuǎn)，學(xué)生對(duì)古代文化、人物等不了解也不感興趣；古代漢語(yǔ)與現(xiàn)代漢語(yǔ)相差較大。主觀方面是農(nóng)村初中生語(yǔ)言基礎(chǔ)薄弱，積累量少，處于被動(dòng)接受的狀態(tài)。教師的文言文教學(xué)模式不理想，這些都在一定程度上造成了農(nóng)村初中生文言文學(xué)習(xí)的低效。培養(yǎng)農(nóng)村初中生文言文自主學(xué)習(xí)的指導(dǎo)策略應(yīng)包括以下幾個(gè)方面。（一）激發(fā)學(xué)生自主閱讀興趣瑞士心理學(xué)家皮亞杰曾說：“所有智力方面的工作都要依賴于興趣?！睂W(xué)生學(xué)習(xí)文言文也是如此，只有從內(nèi)心對(duì)文言文學(xué)習(xí)產(chǎn)生了興趣，才會(huì)以積極認(rèn)真的態(tài)度去自主學(xué)習(xí)，才會(huì)想法設(shè)法努力解決學(xué)習(xí)中的疑難，取得良好的學(xué)習(xí)效果。教師要加強(qiáng)自身的文學(xué)修養(yǎng)，經(jīng)常組織學(xué)生開展文言詩(shī)文故事演講、古詩(shī)文朗誦、文言文改寫習(xí)作展示等活動(dòng)。讓學(xué)生感受到求知的樂趣，也能有機(jī)會(huì)展示自己的所得，得到同學(xué)、老師的贊許，得到成功的滿足感。（二）提高學(xué)生自主學(xué)習(xí)的意識(shí)現(xiàn)在許多文言課堂老師講解過多，留給學(xué)生思考的空間很少，且過高地估計(jì)了初中學(xué)生的接受能力。這樣一來(lái)，學(xué)生的自主學(xué)習(xí)意識(shí)就會(huì)淡化。而且教師課堂上越“包辦”，學(xué)生進(jìn)步的可能性越小。我們要切實(shí)把學(xué)生作為學(xué)習(xí)的主體，真正將課堂還給學(xué)生，當(dāng)學(xué)生理解有偏頗時(shí)，或“找”得不全面時(shí)，老師再適當(dāng)引導(dǎo)一下。這樣會(huì)更有效地推動(dòng)學(xué)生的文言文學(xué)習(xí)。（三）創(chuàng)設(shè)自主學(xué)習(xí)的環(huán)境筆者在教學(xué)中曾在兩個(gè)班嘗試過不同的教學(xué)模式，一種是以帶領(lǐng)學(xué)生逐字逐句翻譯、講解為主，一種則主要讓學(xué)生自主翻譯、解讀，找出疑問后，先小組探討解決，小組探討后解決不了的，老師才帶領(lǐng)全班一起探討。顯然后一種教學(xué)模式課堂氣氛更活躍，學(xué)生學(xué)習(xí)積極性更高，尤其是對(duì)一些較長(zhǎng)的文言課文還能縮短教學(xué)時(shí)間。而從學(xué)后的檢測(cè)效果來(lái)看，后一種教學(xué)模式的效果要明顯好過前一種，因?yàn)閷W(xué)生是主動(dòng)自主學(xué)習(xí)質(zhì)疑釋疑的，印象深刻，也能為后續(xù)文言文學(xué)習(xí)打下良好基礎(chǔ)。（四）教給學(xué)生自主學(xué)習(xí)的方法一是反復(fù)誦讀培養(yǎng)語(yǔ)感。古人說“讀書百遍，其義自見”，就是針對(duì)文言文的。所以應(yīng)重視指導(dǎo)學(xué)生一些文言文朗讀技巧，讓學(xué)生能在反復(fù)誦讀中讀準(zhǔn)字音、讀清停頓、讀通思路、讀出情感。學(xué)生在反復(fù)的朗讀中，漸漸培養(yǎng)起文言語(yǔ)感，而且熟讀后能加深對(duì)內(nèi)容的理解和把握。二是利用工具書進(jìn)行自學(xué)。筆者讓每個(gè)學(xué)生準(zhǔn)備一本《古漢語(yǔ)常用字字典》，先教會(huì)他們使用，以后他們遇到不認(rèn)識(shí)不理解的字詞不再等著老師來(lái)解說，能自行查閱工具書，而自主尋求答案的快感又推動(dòng)了他們文言文學(xué)習(xí)的積極性。三是梳理歸納文言知識(shí)。文言文學(xué)習(xí)中文章是一篇一篇地教，知識(shí)點(diǎn)是一個(gè)一個(gè)地積累，但學(xué)生腦子里的文言知識(shí)還是零散的，一些基礎(chǔ)薄弱的農(nóng)村初中生腦子里更是如一團(tuán)亂麻。筆者在教學(xué)中，運(yùn)用計(jì)算機(jī)培訓(xùn)中學(xué)習(xí)的畫思維導(dǎo)圖的方法，將文言文課文中紛亂的知識(shí)點(diǎn)清晰地梳理歸納，成倍地提高了學(xué)習(xí)效率，還增進(jìn)了學(xué)生的理解和記憶能力。四是鼓勵(lì)學(xué)生進(jìn)行多形式的文言創(chuàng)作和互相評(píng)測(cè)。筆者在教學(xué)中喜歡讓學(xué)生選擇一些簡(jiǎn)短的文言文進(jìn)行擴(kuò)寫、續(xù)寫或改寫，并要求學(xué)生寫好后互評(píng)互改，然后挑一些全班展示。從他們的習(xí)作中看，可以發(fā)現(xiàn)學(xué)生的想象力真是豐富，習(xí)作展現(xiàn)的似乎是一幕幕電影場(chǎng)景，哪怕是基礎(chǔ)很薄弱的一些學(xué)生，也擴(kuò)寫得有模有樣，可知學(xué)生不僅理解了文言語(yǔ)義，文章的主旨也理解透了。這類的學(xué)習(xí)活動(dòng)能真正提高學(xué)生文言文閱讀興趣和能力，也能提高作文水平，可謂一舉兩得。《為學(xué)》中說：“天下事有難易乎，為之，則難者亦易矣；不為，則易者亦難矣?！彪m然目前文言文學(xué)習(xí)現(xiàn)狀不盡如人意，但筆者相信通過師生的共同努力，教學(xué)相長(zhǎng)，農(nóng)村中學(xué)生文言文學(xué)習(xí)也會(huì)迎來(lái)它的春天的！免疫酶組織化學(xué)技術(shù)聰明出于勤奮，天才在于積累免疫酶組織化學(xué)技1第三章免疫酶組織化學(xué)技術(shù)第三章2免疫酶組織化學(xué)技術(shù)酶辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶.酶標(biāo)記已知Ab(或Ag)+組織細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的Ag(或Ab)抗原抗體復(fù)合物(酶標(biāo))底物有色沉淀定位;圖像分析儀半定量免疫酶組織化學(xué)技術(shù)3免疫組化方法酶標(biāo)抗體免疫組織化學(xué)直接法間接法◆非酶標(biāo)抗體免疫組織化學(xué)酶橋法PAP法、APAAP法免疫組化方法4酶標(biāo)抗體免疫組織化學(xué)染色法(一)原理直接法和間接法直接法是將酶標(biāo)記在第一抗體上,直接檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)特異性抗原。間接法一兩步法抗:是細(xì)胞組織內(nèi)抗原的特異性抗體;二抗:是抗一抗的抗體,并且已用酶標(biāo)記(注意:第二抗體與第一抗體須是不同種屬動(dòng)物制備的,因?yàn)榈诙贵w往往是用第一種動(dòng)物的IgG所制備。)酶標(biāo)抗體免疫組織化學(xué)染色法5酶標(biāo)抗體法-直接法原理:將酶直接標(biāo)記在一抗上過氧化粉然后直接與相應(yīng)抗原特異地結(jié)合。形成抗原一抗體_酶復(fù)合物,最后用底物顯色劑顯色第一體優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速、特異性強(qiáng)非特異性背景反應(yīng)低缺點(diǎn):浪費(fèi)抗體、敏感性極低圍》1兔組化直法依靠化學(xué)連接(共價(jià)鍵)對(duì)酶及抗體活性有影響。每種抗原必須分別用其抗體的酶標(biāo)記物。酶標(biāo)抗體法-直接法6酶標(biāo)抗體法-間接法二抗原理:將酶標(biāo)記在二抗上,先將一抗與相應(yīng)的抗原結(jié)合,形成抗過化原抗體復(fù)合物,再用二抗(酶標(biāo)抗體)與復(fù)合物中的特異抗體結(jié)合,第一抗形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗體復(fù)合物最后用底物顯色劑顯色優(yōu)點(diǎn):只需一種酶標(biāo)抗體即可?！鳌饕籱E塊:教感性低,但優(yōu)于直接法圍22免疫組化國(guó)接法依靠化學(xué)連接對(duì)酶及抗體活性有影響。酶標(biāo)抗體法-間接法7令免疫酶組織化學(xué)方法最終的生成物是帶有酶標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物,再依據(jù)酶與底物作用生成不溶性的有色產(chǎn)物沉積在抗原抗體反應(yīng)原位,并借此確定該抗原的性質(zhì)、存在的部位和含量。令顯色反應(yīng):令酶+底物=不溶性的色素標(biāo)記酶:辣根過氧化物酶(HRP)堿性磷酸酶(ALP)葡萄糖氧化酶(GOD)β-D-半乳糖苷酶.令免疫酶組織化學(xué)方法最終的生成物是帶有酶標(biāo)記81辣根過氧化物酶HRP顯色:產(chǎn)物棕褐色HRP與底物過氧化氫和DAB作用產(chǎn)物棕褐色,有嗜鋨性DAB性質(zhì):電子供體,較敏感,室溫時(shí)較穩(wěn)定,顯色后切片可長(zhǎng)期保存?？芍掳?可將DAB制成10倍濃度儲(chǔ)存液,分裝后-20℃貯存注意事項(xiàng):孵育時(shí)間和配置方式易產(chǎn)生背景著色濃縮的DAB—按照說明書;注意校正蒸餾水的PH值;粉劑DAB—溶解時(shí)濾去不溶性顆粒;現(xiàn)用現(xiàn)配保存時(shí)可產(chǎn)生氧化物沉積在切片上,形成斑點(diǎn)。臨用前加H2O21辣根過氧化物酶HRP91辣根過氧化物酶HRP:3344491辣根過氧化物酶HRP:102堿性磷酸酶ALP顯色:產(chǎn)物藍(lán)色或紅色令以磷酸萘酚ASMX為底物,被ALP水解后生成萘酚AS-MX,再與孵育液內(nèi)的堅(jiān)牢藍(lán)B鹽或堅(jiān)牢紅TR鹽等偶聯(lián)生成不溶性染料(堅(jiān)牢藍(lán)或堅(jiān)牢紅)而成令優(yōu)點(diǎn):細(xì)胞和組織內(nèi)的內(nèi)源性堿性磷酸酶很容易被抑制和破壞,而不會(huì)產(chǎn)生內(nèi)源性酶顯色,從而提高特異性。令缺點(diǎn):顯色彌散,不如過氧化物酶系統(tǒng)的清晰和明確2堿性磷酸酶ALP11免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理12免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理13免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理14免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理15免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理16免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理17免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理18免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理19免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理20免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理21免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理22免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理23免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理24免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理25免疫酶組織化學(xué)技術(shù)課件整理2626、要使整個(gè)人生都過得舒適、愉快，這是不可能的，因?yàn)槿祟惐仨毦邆湟环N能應(yīng)付逆境的態(tài)度?！R梭

27、只有把抱怨環(huán)境的心情，化為上進(jìn)的力量，才是成功的保證。——羅曼·羅蘭

28、知之者不如好之者，好之者不如樂之者?！鬃?/p>

29、勇猛、大膽和堅(jiān)定的決心能夠抵得上武器的精良?！_(dá)·芬奇

30、意志是一個(gè)強(qiáng)壯的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本華謝謝！2726、要使整個(gè)人生都過得舒適、愉快，這是不可能的，因?yàn)槿祟惐孛庖呙附M織化學(xué)技術(shù)聰明出于勤奮，天才在于積累免疫酶組織化學(xué)技術(shù)免疫酶組織化學(xué)技術(shù)聰明出于勤奮，天才在于積累第三章免疫酶組織化學(xué)技術(shù)免疫酶組織化學(xué)技術(shù)酶辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶.酶標(biāo)記已知Ab(或Ag)+組織細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的Ag(或Ab)抗原抗體復(fù)合物(酶標(biāo))底物有色沉淀定位;圖像分析儀半定量“和諧教育”課堂模式要求在教學(xué)過程中，教師和學(xué)生積極互動(dòng)，共同發(fā)展。注重培養(yǎng)學(xué)生的獨(dú)立性和自主性，引導(dǎo)學(xué)生質(zhì)凝、調(diào)查、探究。同時(shí)教師應(yīng)尊重學(xué)生的人格，關(guān)注個(gè)體差異，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，使每個(gè)學(xué)生得到充分的發(fā)展?！昂椭C教育”的課堂模式應(yīng)抓住以下三個(gè)環(huán)節(jié)。一、和諧的課堂導(dǎo)入課堂導(dǎo)入是創(chuàng)設(shè)優(yōu)良教學(xué)情境的一個(gè)不可忽視的重要方面，課堂教學(xué)要體現(xiàn)“引人入勝”的藝術(shù)魅力，首先必須從引入教學(xué)開始。著名特級(jí)教師于漪說：“在課堂教學(xué)中要培養(yǎng)、激發(fā)學(xué)生的興趣，首先應(yīng)抓住導(dǎo)入新課的環(huán)節(jié)，開始就把學(xué)生牢牢地吸引住。”所以精心設(shè)計(jì)導(dǎo)入，為完成整堂教學(xué)作好準(zhǔn)備是十分重要的。那么如何進(jìn)入優(yōu)質(zhì)的課堂導(dǎo)入呢？1.通過問題引入一個(gè)好的問題引入要有藝術(shù)性、趣味性、啟發(fā)性，能激發(fā)學(xué)生的思維興趣。實(shí)踐證明：疑問是思維的啟動(dòng)機(jī)，它可以讓學(xué)生的求知欲望從潛伏狀態(tài)轉(zhuǎn)入活躍狀態(tài)，有力地調(diào)動(dòng)學(xué)生的思維興趣。例如在教學(xué)《端午的鴨蛋》時(shí)，一開始便提問：祖國(guó)有哪些傳統(tǒng)節(jié)日？這些節(jié)日都有些什么傳統(tǒng)習(xí)俗？在學(xué)生暢所欲言之后，引入到本文――今天大家學(xué)習(xí)的課文中作者就寫了端午時(shí)節(jié)家鄉(xiāng)的一些習(xí)俗。2.以小故事形式引入一個(gè)好的故事里應(yīng)該有事、有趣、有理，使事、趣、理融為一體，具有藝術(shù)的感染力。學(xué)生比較喜歡，在引入教學(xué)時(shí)如應(yīng)用得當(dāng)，就能起到很好的效果。3.創(chuàng)設(shè)教學(xué)情境引入指教師在開始教學(xué)時(shí)采用多媒體等手段，從一開始就吸引學(xué)生的注意力，啟發(fā)學(xué)生對(duì)課堂學(xué)習(xí)的積極情感和樂趣，如教學(xué)《羅布泊，消逝的仙湖》時(shí)，為了讓學(xué)生對(duì)羅布泊有一個(gè)整體上的印象感知，在課件中首先為學(xué)生收集了一些羅布泊以前的圖片，讓學(xué)生感受到這一仙湖的美麗，也由此自然而然地引發(fā)學(xué)生對(duì)這一美麗仙湖消逝原因的思考。二、和諧的教學(xué)過程有了良好的教學(xué)引入，怎樣保持學(xué)生高昂的學(xué)習(xí)熱情，做到課堂教學(xué)過程的和諧統(tǒng)一，是決定一堂課成效的關(guān)鍵。1.激勵(lì)學(xué)生積極參與到教學(xué)中來(lái)“和諧教學(xué)”是關(guān)注全體同學(xué)的教學(xué)，因此教學(xué)中要鼓勵(lì)各個(gè)層次的學(xué)生積極參與使每個(gè)學(xué)生都有所獲，德國(guó)著名教育家第斯多惠說得好：“我們認(rèn)為教學(xué)的藝術(shù)不在于傳授本領(lǐng)，而在于激勵(lì)、喚醒、鼓舞?！闭n堂上教師激勵(lì)學(xué)生參與，是創(chuàng)設(shè)教學(xué)高潮的重要手段，例如在課堂上多為下層次的學(xué)生創(chuàng)設(shè)回答問題的機(jī)會(huì)，在學(xué)生回答正確的情況下及時(shí)評(píng)點(diǎn)表?yè)P(yáng)，并多鼓勵(lì)他們參與課堂活動(dòng)。教學(xué)高潮的“勝”境，與主導(dǎo)者的激勵(lì)、點(diǎn)拔、啟導(dǎo)是分不開的，一個(gè)啟發(fā)有方、善于激活學(xué)生思維的教師，總是能夠抓住時(shí)機(jī)，創(chuàng)設(shè)出教學(xué)的高潮。2.師生互動(dòng)，情感交流“和諧教育”的課堂，就像一列快樂的列車，駕駛員是教師，學(xué)生就是乘客。有一位作家說過：“感人的歌聲留給人的記憶是長(zhǎng)遠(yuǎn)的?！蓖瑯?，教師在教學(xué)中感人的語(yǔ)言、感人的動(dòng)作，留給學(xué)生的記憶將是長(zhǎng)久的，甚至終身難忘，所以教師在和諧課堂上盡量多與學(xué)生進(jìn)行情感交流，哪怕是一個(gè)小小的提示，一個(gè)小小的動(dòng)作，都會(huì)拔動(dòng)學(xué)生的心弦。三、和諧的課堂結(jié)尾一個(gè)引人入勝的新課導(dǎo)入，對(duì)于激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣、提高求知欲有著十分重要的作用。而一個(gè)耐人尋味的結(jié)尾，對(duì)于幫助學(xué)生理清知識(shí)脈絡(luò)、掌握知識(shí)重點(diǎn)更有意義?！昂椭C教育”的課堂結(jié)尾一定是耐人尋味，感人至深的。留下懸念，讓人遐想，從而展現(xiàn)出教師高超精湛、揮灑自如的教學(xué)藝術(shù)和風(fēng)格。四、延伸式結(jié)課法有些課文講完后，把課尾作為課堂內(nèi)外的紐帶，引導(dǎo)學(xué)生向課外延伸，開辟第二課堂，引導(dǎo)學(xué)生去思考，加深對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解和聯(lián)系，理論聯(lián)系實(shí)際，從生活中獲取感受，這樣課內(nèi)指導(dǎo)課外，聯(lián)系生活實(shí)際，既有利于培養(yǎng)學(xué)生分析問題、解決問題的能力，也有利于開闊學(xué)生的視野，激發(fā)濃厚的學(xué)習(xí)興趣。每一位教師都應(yīng)從教學(xué)的實(shí)際需要出發(fā)，重視并進(jìn)行課堂教學(xué)結(jié)課藝術(shù)的學(xué)習(xí)與研究，不斷總結(jié)創(chuàng)造與運(yùn)用課堂結(jié)課方式，創(chuàng)建“和諧教育”的課堂結(jié)構(gòu)模式。對(duì)農(nóng)村初中學(xué)生而言，文言文學(xué)習(xí)是一大難點(diǎn)，老師和學(xué)生在平時(shí)教與學(xué)中都花了很多功夫，但初中生的文言文學(xué)習(xí)現(xiàn)狀依然不盡如人意。學(xué)生背誦文言文困難，或者能背誦課文卻不理解其意思；用現(xiàn)代漢語(yǔ)翻譯文言句子，難以字字落實(shí)、準(zhǔn)確到位；導(dǎo)致初三總復(fù)習(xí)時(shí)對(duì)文言文手忙腳亂。學(xué)生能大致知道一些常見實(shí)詞虛詞的義項(xiàng)，在課外文言文閱讀的具體語(yǔ)境中卻不知做何解釋；能大致理解文言文內(nèi)容卻難以準(zhǔn)確把握作者要表達(dá)的主旨，有些甚至連基本意思都看不懂。這樣就導(dǎo)致學(xué)生在考試時(shí)無(wú)法下筆，失分嚴(yán)重。初中生的文言文學(xué)習(xí)低效有主客觀兩方面的原因：客觀方面是文言文與學(xué)生所處年代相隔較遠(yuǎn)，學(xué)生對(duì)古代文化、人物等不了解也不感興趣；古代漢語(yǔ)與現(xiàn)代漢語(yǔ)相差較大。主觀方面是農(nóng)村初中生語(yǔ)言基礎(chǔ)薄弱，積累量少，處于被動(dòng)接受的狀態(tài)。教師的文言文教學(xué)模式不理想，這些都在一定程度上造成了農(nóng)村初中生文言文學(xué)習(xí)的低效。培養(yǎng)農(nóng)村初中生文言文自主學(xué)習(xí)的指導(dǎo)策略應(yīng)包括以下幾個(gè)方面。（一）激發(fā)學(xué)生自主閱讀興趣瑞士心理學(xué)家皮亞杰曾說：“所有智力方面的工作都要依賴于興趣。”學(xué)生學(xué)習(xí)文言文也是如此，只有從內(nèi)心對(duì)文言文學(xué)習(xí)產(chǎn)生了興趣，才會(huì)以積極認(rèn)真的態(tài)度去自主學(xué)習(xí)，才會(huì)想法設(shè)法努力解決學(xué)習(xí)中的疑難，取得良好的學(xué)習(xí)效果。教師要加強(qiáng)自身的文學(xué)修養(yǎng)，經(jīng)常組織學(xué)生開展文言詩(shī)文故事演講、古詩(shī)文朗誦、文言文改寫習(xí)作展示等活動(dòng)。讓學(xué)生感受到求知的樂趣，也能有機(jī)會(huì)展示自己的所得，得到同學(xué)、老師的贊許，得到成功的滿足感。（二）提高學(xué)生自主學(xué)習(xí)的意識(shí)現(xiàn)在許多文言課堂老師講解過多，留給學(xué)生思考的空間很少，且過高地估計(jì)了初中學(xué)生的接受能力。這樣一來(lái)，學(xué)生的自主學(xué)習(xí)意識(shí)就會(huì)淡化。而且教師課堂上越“包辦”，學(xué)生進(jìn)步的可能性越小。我們要切實(shí)把學(xué)生作為學(xué)習(xí)的主體，真正將課堂還給學(xué)生，當(dāng)學(xué)生理解有偏頗時(shí)，或“找”得不全面時(shí)，老師再適當(dāng)引導(dǎo)一下。這樣會(huì)更有效地推動(dòng)學(xué)生的文言文學(xué)習(xí)。（三）創(chuàng)設(shè)自主學(xué)習(xí)的環(huán)境筆者在教學(xué)中曾在兩個(gè)班嘗試過不同的教學(xué)模式，一種是以帶領(lǐng)學(xué)生逐字逐句翻譯、講解為主，一種則主要讓學(xué)生自主翻譯、解讀，找出疑問后，先小組探討解決，小組探討后解決不了的，老師才帶領(lǐng)全班一起探討。顯然后一種教學(xué)模式課堂氣氛更活躍，學(xué)生學(xué)習(xí)積極性更高，尤其是對(duì)一些較長(zhǎng)的文言課文還能縮短教學(xué)時(shí)間。而從學(xué)后的檢測(cè)效果來(lái)看，后一種教學(xué)模式的效果要明顯好過前一種，因?yàn)閷W(xué)生是主動(dòng)自主學(xué)習(xí)質(zhì)疑釋疑的，印象深刻，也能為后續(xù)文言文學(xué)習(xí)打下良好基礎(chǔ)。（四）教給學(xué)生自主學(xué)習(xí)的方法一是反復(fù)誦讀培養(yǎng)語(yǔ)感。古人說“讀書百遍，其義自見”，就是針對(duì)文言文的。所以應(yīng)重視指導(dǎo)學(xué)生一些文言文朗讀技巧，讓學(xué)生能在反復(fù)誦讀中讀準(zhǔn)字音、讀清停頓、讀通思路、讀出情感。學(xué)生在反復(fù)的朗讀中，漸漸培養(yǎng)起文言語(yǔ)感，而且熟讀后能加深對(duì)內(nèi)容的理解和把握。二是利用工具書進(jìn)行自學(xué)。筆者讓每個(gè)學(xué)生準(zhǔn)備一本《古漢語(yǔ)常用字字典》，先教會(huì)他們使用，以后他們遇到不認(rèn)識(shí)不理解的字詞不再等著老師來(lái)解說，能自行查閱工具書，而自主尋求答案的快感又推動(dòng)了他們文言文學(xué)習(xí)的積極性。三是梳理歸納文言知識(shí)。文言文學(xué)習(xí)中文章是一篇一篇地教，知識(shí)點(diǎn)是一個(gè)一個(gè)地積累，但學(xué)生腦子里的文言知識(shí)還是零散的，一些基礎(chǔ)薄弱的農(nóng)村初中生腦子里更是如一團(tuán)亂麻。筆者在教學(xué)中，運(yùn)用計(jì)算機(jī)培訓(xùn)中學(xué)習(xí)的畫思維導(dǎo)圖的方法，將文言文課文中紛亂的知識(shí)點(diǎn)清晰地梳理歸納，成倍地提高了學(xué)習(xí)效率，還增進(jìn)了學(xué)生的理解和記憶能力。四是鼓勵(lì)學(xué)生進(jìn)行多形式的文言創(chuàng)作和互相評(píng)測(cè)。筆者在教學(xué)中喜歡讓學(xué)生選擇一些簡(jiǎn)短的文言文進(jìn)行擴(kuò)寫、續(xù)寫或改寫，并要求學(xué)生寫好后互評(píng)互改，然后挑一些全班展示。從他們的習(xí)作中看，可以發(fā)現(xiàn)學(xué)生的想象力真是豐富，習(xí)作展現(xiàn)的似乎是一幕幕電影場(chǎng)景，哪怕是基礎(chǔ)很薄弱的一些學(xué)生，也擴(kuò)寫得有模有樣，可知學(xué)生不僅理解了文言語(yǔ)義，文章的主旨也理解透了。這類的學(xué)習(xí)活動(dòng)能真正提高學(xué)生文言文閱讀興趣和能力，也能提高作文水平，可謂一舉兩得?！稙閷W(xué)》中說：“天下事有難易乎，為之，則難者亦易矣；不為，則易者亦難矣?！彪m然目前文言文學(xué)習(xí)現(xiàn)狀不盡如人意，但筆者相信通過師生的共同努力，教學(xué)相長(zhǎng)，農(nóng)村中學(xué)生文言文學(xué)習(xí)也會(huì)迎來(lái)它的春天的！免疫酶組織化學(xué)技術(shù)聰明出于勤奮，天才在于積累免疫酶組織化學(xué)技28第三章免疫酶組織化學(xué)技術(shù)第三章29免疫酶組織化學(xué)技術(shù)酶辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶.酶標(biāo)記已知Ab(或Ag)+組織細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的Ag(或Ab)抗原抗體復(fù)合物(酶標(biāo))底物有色沉淀定位;圖像分析儀半定量免疫酶組織化學(xué)技術(shù)30免疫組化方法酶標(biāo)抗體免疫組織化學(xué)直接法間接法◆非酶標(biāo)抗體免疫組織化學(xué)酶橋法PAP法、APAAP法免疫組化方法31酶標(biāo)抗體免疫組織化學(xué)染色法(一)原理直接法和間接法直接法是將酶標(biāo)記在第一抗體上,直接檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)特異性抗原。間接法一兩步法抗:是細(xì)胞組織內(nèi)抗原的特異性抗體;二抗:是抗一抗的抗體,并且已用酶標(biāo)記(注意:第二抗體與第一抗體須是不同種屬動(dòng)物制備的,因?yàn)榈诙贵w往往是用第一種動(dòng)物的IgG所制備。)酶標(biāo)抗體免疫組織化學(xué)染色法32酶標(biāo)抗體法-直接法原理:將酶直接標(biāo)記在一抗上過氧化粉然后直接與相應(yīng)抗原特異地結(jié)合。形成抗原一抗體_酶復(fù)合物,最后用底物顯色劑顯色第一體優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速、特異性強(qiáng)非特異性背景反應(yīng)低缺點(diǎn):浪費(fèi)抗體、敏感性極低圍》1兔組化直法依靠化學(xué)連接(共價(jià)鍵)對(duì)酶及抗體活性有影響。每種抗原必須分別用其抗體的酶標(biāo)記物。酶標(biāo)抗體法-直接法33酶標(biāo)抗體法-間接法二抗原理:將酶標(biāo)記在二抗上,先將一抗與相應(yīng)的抗原結(jié)合,形成抗過化原抗體復(fù)合物,再用二抗(酶標(biāo)抗體)與復(fù)合物中的特異抗體結(jié)合,第一抗形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗體復(fù)合物最后用底物顯色劑顯色優(yōu)點(diǎn):只需一種酶標(biāo)抗體即可?！鳌饕籱E塊:教感性低,但優(yōu)于直接法圍22免疫組化國(guó)接法依靠化學(xué)連接對(duì)酶及抗體活性有影響。酶標(biāo)抗體法-間接法34令免疫酶組織化學(xué)方法最終的生成物是帶有酶標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物,再依據(jù)酶與底物作用生成不溶性的有