華中科技大學02-17生化與分子考研真題及答案華中科技大學02-17生化與分子考研真題及答案華中科技大學02-17生化與分子考研真題及答案華中科技大學02-17生化與分子考研真題及答案編制僅供參考審核批準生效日期地址：電話：傳真:郵編:華中科技大學2002年碩士研究生入學考試試題一、選擇題1.膜蛋白的功能不包括（D）A.作為信號受體B.作為離子通道C.作為酶D.儲藏能量2.蛋白聚糖中的糖包括（C）A.肽聚糖B.幾丁質C.透明質酸D.葡聚糖3.蛋白質中提供糖基化位點的側鏈來自下列哪一種氨基酸殘基（C）A.甘氨酸B.天冬氨酸C.絲氨酸D.色氨酸4.鞘氨醇不是下列什么物質的組成成分（B）A.神經酰胺B.磷脂酰乙醇胺C.神經節苷脂5.在pH7條件下電泳，下列什么物質會向陰極移動（B）A.糖胺聚糖B.磷脂酰膽堿C.多聚谷氨酸D.多聚腺苷酸6.動植物來源的脂肪酸多是（D）A.奇數脂肪酸B.20C-30C之間C.反式脂肪酸D.偶數脂肪酸7.下列哪一種試劑可以用于標記蛋白質的N端（B）A.甲醛B.丹磺酰氯C.二異苯基磷酸P385D.TPCKP3688.屬于同一蛋白質家族成員，其氨基酸序列中的哪些氨基酸出現差異可能性最?。ˋ）A.形成功能部位（活性部位）的氨基酸B.和底物專一性或配基專一性有關的氨基酸C.與種屬來源有關的氨基酸9.認為肽鍵是平面結構的重要依據是（D）A.肽鍵的鍵長0.132nm，等于碳碳雙鍵之長B.肽鍵的鍵長0.132nm，等于碳氮雙鍵之長C.肽鍵的鍵長0.132nm，介于碳碳雙鍵和碳碳單鍵之間D.肽鍵的鍵長0.132nm，介于碳氮雙鍵和碳氮單鍵之間10.不屬于還原糖的糖有（A）A.蔗糖B.麥芽糖C.葡萄糖D.乳糖11.提取細菌膜蛋白時使用去污劑（表面活性劑）的作用是（B）A.破壞二硫鍵B.破壞疏水作用，使非極性基團暴露于水中C.破壞離子鍵D.去掉細胞壁12.以下結合蛋白質多肽鏈與非肽鏈部分不以共價鍵相連的是（A）A.脂蛋白B.膠原蛋白，一種糖蛋白C.琥珀酸脫氫酶，一種含有FAD的黃素蛋白13.蛋白質不具有下述哪種功能（F）A.提供能量B.運輸C.防御D.加速化學反應E.調節F.儲存遺傳信息14.下列哪種肽段易于形成α-螺旋（C）A.多聚甘氨酸B.多聚脯氨酸C.多聚（丙氨酸-纈氨酸）15.如果胰蛋白酶不能消化某種蛋白質，說明該蛋白質在組成上不含（C）A.甘氨酸B.纈氨酸C.精氨酸D.苯丙氨酸16.β轉角中肽鏈主鏈出現（C）度回折A.80B.60C.180D.15017.判斷2,3-二磷酸甘油酸是血紅蛋白別構調節物的證據可能是該物質（A）A.使血紅蛋白的氧合曲線更加S型B.使血紅蛋白的氧合曲線變成雙曲線型C.自身與血紅蛋白結合曲線為S型18.NAD+/NADH+H+輔酶在反應中轉移的電子應表示成（C）A.H-B.HC.2H19.陽光維生素的意思是陽光的能量使動物的某種維生素原變為維生素，這種維生素原是（B）A.β-胡蘿卜素B.7-脫氫膽固醇C.視紫紅質D.色氨酸20.TPCK抑制胰凝乳蛋白酶的根本原因是（C）A.TPCK類似酶的底物B.TPCK與酶的絲氨酸殘基反應，使該絲氨酸不能作為廣義酸堿催化劑C.TPCK與酶的組氨酸殘基反應，使該組氨酸不能作為廣義酸堿催化劑D.TPCK改變了酶的一級結構21.作為典型催化劑的酶具有下列哪一種能量效應（B）A.增加活化能B.降低活化能C.提高產物能量水平D.降低反應物能量水平22.修飾堿基主要存在于下列哪種核酸中（C）A.rRNAB.mRNAC.tRNAD.核DNAE.線粒體DNA23.在溴化乙錠-氯化銫密度梯度離心時，相同分子量的DNA，沉降最快的是（A）A.閉環DNAB.開環DNAC.雙鏈線形DNA24.DNA的Tm不與什么有關（A）A.DNA的分子量B.DNA的GC含量C.DNA的純度D.緩沖液組成25.ACTH作用腎上腺時，導致的細胞響應包括（D）A.受體獲得酪氨酸激酶活性B.受體激活引起細胞膜鉀離子通道改變C.G蛋白激活，抑制腺苷酸環化酶D.cAMP與鈣離子濃度升高26.生物膜中最豐富的脂類是（A）A.磷脂B.膽固醇C.糖脂D.三酰甘油27.Ribozyme是（B）A.蛋白質B.核酸C.糖D.脂28.胰島素與受體結合后，受體細胞質區域（D）A.具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性B.結合G蛋白C.激活磷脂酶D.具有酪氨酸激酶活性29.被絲氨酸蛋白激酶作用的蛋白質將（B）A.去掉磷酸絲氨酸上的磷酸基團B.從ATP獲得一個磷酸基團，使絲氨酸磷酸化C.從GTP獲得一個磷酸基團，使絲氨酸磷酸化D.水解ATP而獲得磷酸基團30.限制性內切酶EcoRⅠ作用對象是（D）A.蛋白質B.RNAC.單鏈DNAD.雙鏈DNA二、分析題1、某同學在提取酶的過程中發現酶已經失活，一個原因是由于操作不當引起酶的變性，請問有哪些因素會引起變性還有什么因素可能引起失活如果認為酶的失活不是由于變性引起的，請提出一種推測，并設計一個實驗路線予以證明。答：①引起變性的因素有：強酸、強堿、重金屬鹽、尿素、胍、去污劑、高溫射線、超聲波等。②抑制劑也可能引起失活。③蛋白質變性是蛋白質在某些物理或化學因素的作用下其特定空間構象被改變，從而導致其理化性質和生物學活性喪失甚至完全喪失。實驗方法：先除可逆抑制（透析、超濾、凝膠過濾等方法），如果酶仍失活，可用以下方法：變性的蛋白更容易受蛋白水解酶的作用，可以將正常的酶和失活的酶被同一種蛋白酶水解，將水解的片段分別經過凝膠電泳，看誰的片段多，誰就是變性。如果兩者差不多,那就是酶受到抑制作用。2、根據所學的知識分析有機磷農藥、溴化乙錠、麻黃堿和白喉毒素對人體有毒性的原因。答：有機磷農藥是強有力的絲氨酸蛋白酶抑制劑。溴化乙錠可以插入DNA中，改變DNA的結構，是強有力的模板抑制劑。麻黃堿可使中樞神經系統興奮，神經系統過敏。白喉素可導致生物神經脫髓鞘，具有抑制蛋白質合成的作用，還可引起心肌脂肪變性。三、綜合題1、通過代謝網絡說明處在給定的情況下的酶的改變及其產物在細胞能量代謝中最可能的變化途徑。（1）肝己糖激酶，當血糖升高時；（2）大豆谷氨酸脫氫酶，當種子吸脹發芽時。答：A：當血糖升高時。己糖激酶受6-磷酸葡萄糖的別構抑制，所以其含量減少。B：種子吸脹發芽過程中需要能量，大豆谷氨酸脫氫酶作用于氨基酸脫氨基作用，釋放能量，所以谷氨酸脫氫酶含量增加。2、大腸桿菌各有什么分子機制應付氨基酸缺乏或紫外線照射

答：可通過SOS反應和直接修復作用。SOS反應是細胞DNA受到損傷或復制系統受到抑制的緊急情況下，細胞為求生存而產生的一種應急措施，包括誘導DNA損傷修復，誘變效應，細胞分裂的抑制以及融源性細菌釋放噬菌體等。在氨基酸缺乏時，細菌通過嚴緊反應來抵御不良條件，保存自己，嚴緊反應導致兩種被稱為魔斑的特殊核苷酸：鳥苷四磷酸和五磷酸的積累，鳥苷磷酸的作用是影響RNA聚合酶與啟動子結合的專一性，從而為細胞內嚴緊控制的關鍵。可在大范圍內做出如抑制核糖體和其他大分子合成等應急反應，活化蛋白水解酶等，以調節或開發能源，渡過難關。紫外線照射可形成環丁烷胸腺嘧啶二體及6-4光化合物，直接修復能夠將形成的這兩種物質還原為單體。

2003年碩士研究生入學考試試題一、名詞解釋1.DNAdoublehelixDNA雙螺旋結構：一種核酸的構象。在該構象中，兩條反向平行的多核苷酸鏈相互纏繞形成一個右手的雙螺旋結構。2.Secondmessenger第二信使：受細胞外信號的作用，在胞質溶膠內形成或想胞質溶膠釋放的細胞內小分子。通過作用于靶酶或胞內受體，將信號傳遞到級聯反應下游，如環腺苷酸、環鳥甘酸、鈣離子、肌醇三磷酸和肌醇磷脂等。3.Activesite活性中心：一般情況下，多相催化劑只有局部位置才產生活性，稱作活性中心，現多稱為活性部位。活性中心可以是原子、原子團、離子、表面缺陷等，形式多種多樣。4.F0-F1-ATPaseATP合酶：結合于線粒體內膜、葉綠體類囊體膜和細菌質膜上由多亞基組成的復合物。在氧化磷酸化和光合磷酸化過程可催化ATP的合成。5.Glycogencosis糖原合成：體內由葡萄糖合成糖原的過程稱為糖原合成過程。主要合成場所為肝和肌肉。包括UDPG途徑和三碳途徑。6.Promotor啟動子：基因轉錄起始所必須的一段DNA序列。是基因表達調控的上游順式作用元件之一。7.Geneticcode遺傳密碼：核苷酸序列所攜帶的遺傳信息。編碼20種氨基酸和多肽鏈起始及終止的一套64個三聯核苷酸密碼子。二、選擇題1.透明質酸的酸性源自分子中的哪一種基團（A）A.COO-B.SO3C.PO3D.-OH2.Fuc是哪一種糖的英文縮寫符號（B）A.果糖B.巖藻糖C.甘露糖D.木糖3.乳糜微粒中不含有（A）A.神經節苷脂B.膽固醇C.三酰甘油D.蛋白質4.欲提取紅細胞膜脂類，可選用下列何種試劑（D）A.磷酸鹽緩沖溶液B.乙醇C.乙醚D.氯仿-甲醇5.在蛋白質酸水解物中分離到一種與茚三酮反應生成黃色產物的物質，該物質是（C）A.組氨酸B.賴氨酸C.脯氨酸D.天冬氨酸6.蛋白質中與CNBr作用的基團是（B）A.-COOHB.-SHC.-CO-NH-D.-NH27.什么蛋白質富含脯氨酸（C）A.絲心蛋白B.胰島素C.膠原蛋白D.酪蛋白8.血紅蛋白氧解離曲線向右移是由于（D）A.降低氧氣的壓力B.增加氧氣的壓力C.增加pH值D.增加CO2的壓力9.OswaldAvery.ColinMacLcod,andMaclynMcCarty做出的重大發現是（B）A.發現核酸B.DNA引起致病性轉移C.發現DNA雙螺旋結構D.堿基配對10.D2對稱屬于（B）A.點群對稱B.二面體對稱C.螺旋對稱11.以下關于蛋白質分子內氫鍵的描述何者是錯誤的（C）A.是一種局部電荷間的相互作用B.穩定蛋白質的二級結構C.只發生在蛋白質與水發生相互作用時D.形成過程具有協同性12.拉氏構像圖（RamachandranPlot）中揭示的事實不包括（D）A.使肽鍵穩定的ψ和φ只占很少百分比B.右手螺旋和左手螺旋都有穩定的C.β-折疊是穩定的D.膠原三股螺旋處在不穩定區13.使酶分子帶上親和標記的過程是（D）A.化學反應B.表面吸附C.可逆過程D.非競爭性的14.核酶（Ribozymes）是一種（D）A.蛋白質B.tRNAC.rRNAD.核蛋白體15.細胞乙酰CoA的來源不包括（D）A.丙酮酸氧化B.脂肪酸β氧化C.氨基酸氧化D.葡萄糖酵解16.所有生物中能集合并清除氨基的氨基酸不包括（B）A.谷氨酸B.甘氨酸C.天冬氨酸D.谷氨酰胺17.直接判斷細菌DNA正在復制的根據是（B）A.看到復制原點B.看到復制叉C.看到多核糖體D.看到DNA聚合酶18.大腸桿菌的DNA聚合酶Ⅰ的功能不包括（D）A.5′→3′外切酶活性B.3′→5′外切酶活性C.5′→3′DNA聚合酶活性D.3′→5′DNA聚合酶活性19.DNA光解酶（DNAPhotolyase）作用于（B）A.甲基胞嘧啶B.胸腺嘧啶二聚體C.8-氧鳥嘌呤D.一段損傷區20.下列哪個反應需要鳥苷三磷酸（GTP）（C）A.核糖體上肽鍵的合成B.核糖體上肽的釋放C.氨基酸被氨基酰-tRNA合成酶的激活D.多核糖體的形成21.下列哪個位點最可能含有高度重復序列（A）A.著絲粒B.蛋白質基因C.啟動子D.增強子22.mRNA的帽子結構在翻譯中的功能是（D）A.供tRNA識別B.延長mRNA使用壽命C.幫助mRNA在核糖體上定位D.供起始因子識別23.細菌饑餓時培養基中積累（A）A.Guanosine3’,5’-tetraphosphate(ppGpp)B.cAMPC.磷酸D.ADP24.一分子丙醋酸徹底氧化為CO2和H2O凈產生的ATP分子數為（C）A.18B.12C.15D.325.細胞催化蘋果酸轉變為草酰乙酸的酶是（C）A.蘋果酸酶B.水化酶C.蘋果酸脫氫酶26.6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化反應的產物不含有（C）A.CO2B.FADH2C.NADPH27.能夠從外周血中攝取膽固醇并送回肝臟中因而能降低血清膽固醇的脂蛋白是（B）A.乳糜微粒B.HDLC.LDLD.VLDL28.參與血液凝固的維生素是（C）A.維生素BB.維生素CC.維生素KD.維生素A29.CRP（代謝活化劑蛋白）與cAMP結合后的效應不包括（C）A.與乳糖操縱子親和力增加B.自身構象改變C.與σ亞基結合D.促進轉錄30.下面哪種氨基酸參與了嘌呤核苷酸的從頭合成（D）A.丙氨酸B.蘇氨酸C.精氨酸D.天冬氨酸三、判斷正誤（對）1.結構域（domain）是三級結構中局部折疊的比較緊密的部分。（錯）2.球蛋白是指具有球型形狀的蛋白質。（對）3.別構活化中酶的構象應從T-R平衡轉向R態。（對）4.理論上二面角φ和ψ在正負180度范圍。（對）5.胰凝乳蛋白酶催化肽鍵斷裂過程中該肽鍵C端部分與酶共價連接形成?；钢虚g體。（錯）6.能障或自由能障指底物的始態與終態之間的自由能差。（對）7.肝中的糖原磷酸化酶可以催化肝糖原產生G-1-P，進入糖酵解。（對）8.一基因與其等位基因（allete）的序列相同。（對）9.定點誘變（Site-DirectedMutagenesis）是一種生物體突變發生機制。（錯）10.下游指RNA的3′方向。（對）11.環己亞胺是一種很好的翻譯抑制劑。（對）12.人工染色體應含有復制原點、端粒和著絲粒三個基本結構組分。（錯）13.真核RNA聚合酶Ⅱ和原核RNA聚合酶都可以獨立啟動基因轉錄。（對）14.無義突變是指終止密碼的突變。（錯）15.信號肽是N端有堿性氨基酸的肽。四、問答題1、在分子生物學中有哪些可轉移的遺傳因子被使用，它們的應用范圍如何？擇一例說明其如何轉移外源基因，并使其復制和轉錄。答：①有轉座子、質粒、噬菌體、COS質粒。②質粒：一般只能攜帶10kb以下的DNA片段，構建原核生物基因庫，cDNA文庫。噬菌體DNA：適用于構建真核生物的基因組合cDNA文庫。COS質粒：容量大，可攜帶45kb外源DNA片段，常用構建高等生物基因組文庫。③質粒DNA能夠將外源基因與自身基因組連接，然后轉化宿主細胞的基因組并隨宿主的復制而復制。2、比較真核基因組的三類結構基因（rRNA基因、tRNA基因和蛋白質基因）的基因組織特點，并分析該特點在功能上和進化上的意義。答：細胞的整個基因組中只有很少一部分（2%-3%）的DNA序列用以編碼蛋白質。具有大量串聯重復序列。

2004年碩士研究生入學考試試題一、選擇題1.Fuc是（D）的英文縮寫符號A.果糖B.棕櫚酸C.唾液酸D.鹽藻糖2.以下（C）不屬于葡聚糖A.淀粉B.幾丁質C.木質素D.纖維素3.神經節苷脂中不含有（C）A.糖B.脂肪酸C.甘油D.氨基醇4.以下氨基酸或氨基酸衍生物中（D）不含有S元素A.CysB.牛磺酸C.輔酶AD.肌酸5.下列酶中（D）對于N端具有芳香烴側鏈的肽鍵具有最強的專一性A.胰凝乳蛋白酶B.羧肽酶C.胰蛋白酶D.胃蛋白酶6.下列名詞中（C）可以描述在肽鏈或多核苷酸鏈中出現一種隨機的彎曲。A.cycleB.turnC.loopD.fold7.下列維生素中的（A）的輔酶形式能在代謝反應中轉移HA.煙酸B.泛酸C.抗壞血酸D.葉酸8.共價閉環式超螺旋的構象改變需要（A）A.至少有一個磷酸二酯鍵斷裂B.磷酸二酯鍵的兩側都斷開C.組蛋白結合到DNA上D.鹽物質質量濃度超過1.0mol/L9.細胞從頭合成嘌呤核苷酸的原料不包括（C）A.甘氨酸B.天冬氨酸C.谷氨酸D.CO210.膽固醇生物合成不經歷（A）反應A.乙酰CoA→丙二酸單酰CoAB.甲瓦龍酸→活性異戊二烯單位C.鯊烯→羊毛固醇D.乙酰CoA→3-羥-3-甲-戊二酰CoA（HMG）11.乳糖操縱子的體內功能性誘導物是（D）A.乳糖B.半乳糖C.葡萄糖D.異構乳糖12.利用自己的位點專一重組酶把自己從寄主基因組中的一個地方移到一個地方的遺傳元件叫（B）A.啟動子B.轉座子C.T-DNAD.順反子13.（B）的密碼子可作為起始密碼子A.酪氨酸B.甲硫氨酸C.色氨酸D.蘇氨酸14.下列（A）不是順式作用元件A.SP1轉錄因子B.增強子C.GGGCGG框D.啟動子核心序列15.Western雜交用于分析（C）A.RNAB.DNAC.蛋白質D.ABC都是16.由于DNA是由4種堿基組成的，所以任何限制性核酸內切酶的切割頻率的理論值應該是（C）A.104B.n4C.4nD.41017.以DNA為模板，RNA聚合酶作用時，不需要（B）A.NTPB.dNTPC.ATPD.Mg2+/Mn2+18.原核DNA合成酶中（C）的主要功能是合成先導鏈及岡崎片段。A.DNA聚合酶ⅠB.DNA聚合酶ⅡC.DNA聚合酶ⅢD.引物酶19.（B）決定tRNA上所攜帶的氨基酸種類。A.副密碼子B.反密碼子C.密碼子D.同義密碼子20.細胞蛋白激酶根據底物蛋白質被磷酸化的氨基酸殘基種類可分為3類，不包括（D）。A.組氨酸型B.酪氨酸型C.絲氨酸/蘇氨酸型D.天冬氨酸二、判斷正誤（錯）1.糖胺聚糖由于含有氨基而呈堿性。（對）2.短肽的旋光性等于其組成氨基酸的旋光性之和。（錯）3.蛋白質的序列信息對于使用X-衍射技術與NMR技術測定蛋白質構象而言是不需要的。（錯）4.可以被有機汞失活的酶其活性部位含有Ser殘基。（錯）5.其嘧啶堿基含量較高的DNA的Tm高于嘌呤堿基含量較高的DNA。（錯）6.質膜的兩層的蛋白質和糖是不對稱的，但是脂類是對稱的。（對）7.腎上腺素的第二信使是cAMP。（錯）8.2,4-二硝基酚可以引起線粒體P/O比減少。（錯）9.百米賽跑的運動員的肌肉能量來自葡萄糖的完全氧化。（錯）10.肉堿分子可以獨立攜帶脂肪酸進出線粒體。（錯）11.在高鹽和低溫條件下由DNA單鏈雜交形成的雙螺旋表現出幾乎完全的互補性，這一過程可看做是一個復性（退火）反應。（錯）12.B型雙螺旋DNA是左手螺旋，而Z型是局部的右手螺旋。（對）13.原核生物基因表達的調控主要發生在轉錄水平，真核生物基因表達調控可以發生在各個水平，但主要也是在轉錄水平。（錯）14.Ac-Ds體系是果蠅中的轉座子。（錯）15.所謂引物就是同DNA互補的一小段RNA分子。（錯）16.NO的神經毒作用主要是破壞DNA。（錯）17.煙草花葉病毒是單鏈多組分RNA病毒。（錯）18.所有高等真核生物的啟動子中都有GC區。（錯）19.葉綠體的rRNA核糖體是由16S、5S、23S、5.8S組成的。（）20.抗體的基本結構是兩條重鏈與兩條輕鏈通過3個二硫鍵相互連接成的Y型結構。三、名詞解釋1.別構效應&別構效應劑某種不直接涉及蛋白質活性的物質，結合于蛋白質活性部位的其他部位（別構部位），引起蛋白質分子構象的變化，而導致蛋白質活性改變的現象?？煞譃橥傩彤惔傩獌深?。能影響蛋白質活性的物質稱為別構效應劑。2.絲氨酸蛋白酶類一個蛋白酶家族，它們的作用是斷裂大分子蛋白質中的肽鍵，使之成為小分子蛋白質。其激活是通過活性中心一組氨基酸殘基變化實現的，它們之中一定有一個是絲氨酸。3.親和層析將具有特殊結構的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中，當要被分離的蛋白混合液通過層析柱時，與吸附劑具有親和能力的蛋白質就會被吸附而滯留在層析柱中，這種分離純化蛋白質的方法稱為親和層析。4.修飾堿基tRNA中的一些不常見的堿基，如腺嘌呤、鳥嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶的修飾形式。5.必需氨基酸指存在食物中，動物無法合成只能從食物中攝取的氨基酸，這些氨基酸被稱為必須氨基酸。動物需攝取必須氨基酸以制造蛋白質。由于不同物種的化合能力不同，對于某一物種是必須氨基酸的，對另一物種則不一定是必須氨基酸。6.啟動子一段能使基因進行轉錄的DNA序列。啟動子可以被RNA聚合酶辨認，并開始轉錄。在RNA合成中，啟動子可以和決定轉錄開始的轉錄因子產成相互作用，繼而控制細胞開始生產哪一種蛋白質。7.岡崎片段DNA復制過程中，一段屬于不連續合成的延長鏈，且長度相對較短的DNA片段。岡崎片段之所以存在，是因為DNA聚合酶無法以3′往5′的方向合成DNA，因此產生了許多以5′到3′方向合成的岡崎片段，再由DNA連接酶將其粘合。8.分子伴侶一類協助細胞內分子組裝和協助蛋白質折疊的蛋白質。如HSP。9.無義突變編碼某一氨基酸的三聯體密碼經堿基替換后，變成不編碼任何氨基酸的終止密碼子UAA、UAG或UGA。雖然無義突變并不引起氨基酸編碼的錯誤，但由于終止密碼出現在一條mRNA的中間部位，使翻譯的多肽鏈就此終止，形成一條不完整的多肽鏈。10.增強子指增加與其連鎖的基因轉錄頻率的DNA序列。增強子是通過啟動子來增加轉錄的。有效的增強子可以位于基因的5′端，也可以位于基因的3′端，有的還可位于基因的內含子中。增強子的效應很明顯，增強子的作用同增強子的取向無關，甚至遠離靶基因達幾千kb也仍然有增強作用。四、計算題1、已知天冬氨酸的α-COOH、α-NH3+和R基團的pKa分別為2.09，3.86和9.82。如何用pH為5.0，0.1mol/L的天冬氨酸溶液和NaOH配置pH6.8，0.1mol/L的天冬氨酸-NaOH緩沖液？

2、假設濃度為2×10-4mol/L的某抑制劑抑制了一個酶催化反應的75%，計算這個非競爭性抑制劑的Ki。把數據代入非競爭性抑制劑的速度計算公式進行計算，看是否正確即可。3、大腸桿菌染色體的分子量大約是3.3×109Da，核苷酸的平均分子量是330Da。鄰近核苷酸對之間的距離是0.34nm，雙螺旋每一轉的高度（即螺距）是3.4nm，（1）該分子有多長；（2）該DNA有多少轉。答：⑴堿基對數=3.3×109Da/（330Da×2），分子長度=堿基對數×0.34nm⑵轉數=分子長度/3.4nm4、現分離了一DNA片段，可能含有編碼多肽的基因的前幾個密碼子。該片段的序列組成如下：5′CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG3′3′GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC5′（1）哪一條鏈作為轉錄的模板鏈（2）寫出mRNA序列。答：模板鏈：3′→5′鏈五、問答題1、運用所學的生物化學知識簡要解釋下列生物學現象。（1）陰雨連綿不但延遲果實成熟且結的果實不甜；（2）植物細胞浸入蔗糖溶液中一段時間后，發現蔗糖溶液pH升高（胞外堿化）。答：（1）果實的甜與否主要與其積累的糖分有關，連著陰天時，由于光照不足，導致光合作用減弱，合成的糖類減少，積累也減少，故味不甜；此外，糖積累少了，糖代謝不順暢，色素轉變存在問題，乙烯合成受阻，促成熟減慢。（2）從葡萄糖的運輸和質子泵的關系入手，轉運等2、解釋弱相互作用（次級鍵）并舉例論述其在穩定大分子構象中的作用。3、PCR和細胞內DNA復制兩者有哪些主要的相同點和不同點？各舉出3個。答：同：兩者都符合半保留復制模型，即兩條鏈都可作為模板，子代鏈中一條鏈來自于親代鏈，另一條鏈是新合成的；兩者都需要引物；兩者都依賴DNA的DNA聚合酶；兩者的底物都是dNTP；DNA合成時都是在DNA聚合酶作用下按堿基配對原則往3′-OH上加dNTP，形成3′，5′磷酸二酯鍵；兩者新合成鏈延伸方向都是5′→3′；兩者DNA合成的保真度（精確性）都較高。異：復制為半不連續復制，而PCR兩條鏈的合成都是連續的；復制時引物是由引發酶或引發體合成的，而PCR引物是在反應前加到反應體系中；復制需要在特定的復制原點開始，并且有終止點，而PCR在有特異引物存在時在任何序列都可起始，并且沒有終止點；復制時兩條模板鏈是在解旋酶的作用下局部打開雙鏈，而PCR兩條模板鏈通過變性完全打開雙鏈；復制時兩條鏈的合成時同步進行的，而PCR兩條鏈的合成可能不同步；PCR的DNA聚合酶是耐熱的DNA聚合酶，而復制的聚合酶一般不耐熱；復制一般為雙向復制，而PCR反應中DNA合成時單向的；復制時由多種蛋白因子參與，而PCR只有DNA聚合酶參與。4、簡述原核生物與真核生物在基因結構及其基因表達調控上的異同點。

2005年碩士研究生入學考試試題一、名詞解釋1.多順反子mRNA一個mRNA包含多個蛋白質的編碼信息，即包含多個開放可讀框（ORF），這種mRNA稱為多順反子mRNA。這些蛋白質通常具有同一種相關的功能，并且成組的被一個操縱子所調控，原核生物mRNA通常是這種情況。2.attenuator弱化子：是在研究大腸桿菌的色氨酸操縱子表達弱化現象中發現的。在TrpmRNA5′端trp正基因的起始密碼前與一個長162bp的DNA序列稱為前導區，其中第123~150位核苷酸如果缺失，trp基因的表達可提高6倍?；蛘撸谏彼岵倏v子中的一個區域，此區域以形成不同二級結構的方式，利用原核生物轉錄與翻譯的偶聯對轉錄進行調節。此區域只存在于原核生物合成代謝的操縱子中。3.cDNA文庫以mRNA為模板，經反轉錄酶催化，在體外反轉錄成cDNA，與適當的載體（常用噬菌體或質粒載體）連接后轉化受體菌，則每個細菌含有一段cDNA，并能繁殖擴增，這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細胞的cDNA文庫。4.wobblehypothesis擺動假說：解釋遺傳密碼簡并性的假說，克里克于1966年提出。對氨基酸專一的密碼子的頭兩個堿基與相應tRNA上反密碼子的第二個和第三個堿基互補配對，而密碼子的第三個堿基（3′端）與反密碼子5′端堿基的配對專一性相對較差，被稱為擺動配對。（wobblepairing）5.semiconservativereplication半保留復制：一種雙鏈脫氧核糖核酸的復制模型，其中親代雙鏈分離后，每條單鏈均作為新鏈合成的模板。因此，復制完成時將有兩個子代DNA分子，每個分子的核苷酸序列均與親代分子相同，這是1953年沃森和克里克在DNA雙螺旋結構基礎上提出的假說，1958年得到證實。二、填空題1.糖蛋白的糖基大多結合在蛋白質的Asn殘基、Thr殘基與Ser殘基上。2.甾醇類化合物的核心結構是環戊烷多氫菲，鞘脂類的核心結構是神經酰胺。3.蛋白質的超二級結構或motifs的基本組合形式為αα、ββ和βαβ等。4.溫度對酶活力影響分別為溫度升高，反應速率加快和溫度過高，酶蛋白變性失活。5.tRNA分子結合氨基酸和識別mRNA的兩個結構區分別稱為3′端受體臂和反密碼子環。6.膜酯PIP2被磷脂酶C水解產生的兩種起第二信使作用的有機小分子分別是IP3和DAG。7.DNA的回文序列的特征是反向重復。8.“基因”的分子生物學定義是產生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列。9.DNA后隨鏈合成的起始要一段短的RNA引物，它是由DNA引物酶以核糖核苷酸為底物合成的。10.大腸桿菌中DNA聚合酶Ⅱ的生理功能主要是起修復DNA的作用。11.寫出兩種合成后不被切割或拼接的RNA：真核生物5SrRNA和原核中的mRNA。12.許多氨基酸都有多個密碼子，除了Met、Ser只有一個密碼子外。13.PCR反應主要有變性、退火、延伸三個步驟。14.癌基因可分為兩類：原癌基因和病毒癌基因。三、判斷正誤（錯）1.堿性的組蛋白和堿都能降低雙鏈DNA的Tm值。（對）2.如果DNA樣品A的Tm低于DNA樣品B的Tm，那么樣品A含有的A-T堿基對高于樣品B。（錯）3.血紅蛋白與氧的親和力較肌紅蛋白更強。（錯）4.酶活性中心一般由在以及結構中相鄰的若干氨基酸殘基組成。（對）5.胰島素的作用不需要G蛋白。（對）6.Km是酶的特征常數，只與酶的性質有關，與酶濃度無關。（對）7.B族維生素都可以作為輔酶的組分參與代謝。（錯）8.維持蛋白質三級結構最重要的作用力是氫鍵。（對）9.某細菌生長的最適溫度是25℃，若把此細菌從25℃移到37℃的環境中，細菌細胞膜的流動性將增加。（錯）10.自然界DNA超螺旋都是負超螺旋。（錯）11.B型雙螺旋是DNA的普遍構型，而Z型則被確定為僅存在于某些低等真核細胞中。（錯）12.在先導鏈上DNA沿5′→3′方向合成，在后隨鏈上則沿3′→5′方向合成。（對）13.HIV基因組是由兩條單鏈正鏈RNA組成。（錯）14.我們把與mRNA序列互補的那條DNA鏈稱為編碼鏈或稱有義鏈。（對）15.DNA的復制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。（錯）16.所有高等真核生物的啟動子中都有TATA盒結構。（錯）17.核酸分子在電場中向正極移動，蛋白質向負極移動。（錯）18.原核生物轉錄負調控時，調節基因的蛋白質產物是基因活性的一種激活物，而在正調控時，調節基因的產物是一種阻遏物。（對）19.所有免疫球蛋白中，C區的氨基酸序列差別較小，V區的氨基酸序列差別較大。（對）20.操縱子和啟動子的調控是反式隱性、順式顯性的，而編碼阻遏蛋白基因的調控既是反式顯性又是順式顯性。四、選擇題1.一未知三糖，可被β-半乳糖苷酶水解，產物中檢測到有麥芽糖和半乳糖，推測其分子結構中含有（D）A.1分子β-D-半乳糖和2分子α-D-葡萄糖B.1分子α-D-葡萄糖和2分子β-D-半乳糖C.1分子β-D-半乳糖、1分子β-D-葡萄糖和1分子α-D-葡萄糖C.1分子β-D-半乳糖、1分子α-D-葡萄糖和1分子D-葡萄糖2.縮醛磷脂與其他磷酸甘油脂結構上顯著不同的是（B）A.所有縮醛磷脂都有相同的頭基團B.其甘油的C-1被長鏈脂肪醇醚化C.與其甘油的C-1相連的脂肪酸是不飽和脂肪酸D.烴鏈中出現環狀結構3.欲構成雙分子層組成，其內外均為水相的封閉囊泡，最好選擇（A）A.卵磷脂B.硬脂酸鈉C.膽固醇D.腦苷脂4.常用的化學修飾劑DFP可以修飾蛋白質的（C）殘基A.LysB.AsnC.SerD.His5.將抗體固定在層析柱的載體，使抗原從流經此柱的蛋白質樣品中分離出來，這技術屬于（D）A.吸附層析B.離子交換層析C.分配層析D.親和層析6.下列有關β-折疊的敘述錯誤的是（A）A.β-折疊是纖維狀蛋白質的特有結構B.β-折疊靠肽鏈的C=O與N-H間形成的兩條鏈之間的氫鍵而穩定C.α-螺旋可以通過加熱處理而轉變成β-折疊D.β-折疊有平行的β-折疊和反平行的β-折疊7.下列聚合物在中性pH下可能形成α螺旋的是（C）A.多聚甘氨酸B.多聚谷氨酸C.多聚亮氨酸D.多聚脯氨酸8.多食糖類需補充（A）A.維生素B1B.維生素B2C.維生素B5D.維生素69.代表了隨機順序機制的雙底物雙產物反應是（B）A.B.C.10.四肽Ser-Val-Trp-His與FDNB反應后，用6mol/LHCL水解得到（C）A.DNP-Ser，Val-Trp-HisB.DNP-Ser，Val，Trp，HisC.DNP-Ser，Val，HisD.DNP-His，Ser，Val，Trp11.一種茶堿的類似物Aminophyline經常被用來與腎上腺素一起治療急性哮喘，它的作用可能是（D）A.促腎上腺素與受體結合B.幫助G蛋白結合激活腺苷酸環化酶C.有cAMP樣作用D.抑制磷酸二酯酶，防止cAMP水解12.某雙鏈DNA樣品，含20摩爾百分比的腺嘌呤，其鳥嘌呤的摩爾百分比應為（A）A.30B.20C.50D.1013.對于一個遵循米氏動力學的酶而言，當［S］=Km時，若v=35μmol/min。Vmax是（B）A.35μmol/minB.70μmol/minC.17.5μmol/minD.105μmol/min14.DNA共價閉環式超螺旋的構象改變只能發生在（A）A.至少有一個磷酸二酯鍵斷裂B.磷酸二酯鍵的兩側都斷開C.組蛋白結合到DNA上D.鹽物質質量濃度超過1.0mol/L15.寡聚dT-纖維素柱層析用于從真核生物總RNA中純化mRNA，原理是（D）A.真核mRNA含有dAB.真核mRNA內部含有多聚AC.真核mRNA的5＇有一多聚AD.真核mRNA的3＇有一多聚A16.乳糖操縱子的安慰誘導物是（D）A.乳糖B.半乳糖C.異構乳糖D.異丙基巰基半乳糖苷17.復制子（C）A.細胞分裂期同復制產物被分離之后的DNA片段B.復制的DNA片段和在此過程中所需的酶和蛋白C.任何自發復制的DNA序列（它與復制起始點相連）D.復制起點和復制叉之間的DNA片段18.基因組是（D）A.一個生物體內所有基因的分子總量B.一個二倍體細胞中的染色體數目C.遺傳單體D.生物體的一個特定細胞內所有基因的分子的總量19.DNA在10nm纖絲中長度比縮了（A）倍A.6倍B.10倍C.40倍D.240倍20.原核生物中起始氨基酰-tRNA是（A）A.fMet-tRNAB.Met-tRNAC.Arg-tRNAD.Leu-tRNA21.蛋白質生物合成的終止信號由（B）識別A.tRNAB.RFC.EFD.IF（或elF）22.核糖體E位點是（B）A.真核mRNA加工位點B.tRNA離開原核生物核糖體的位點C.核糖體中受EcoRI限制的位點D.真核mRNA起始結合位點五、問答題1、不同pH時測定兩種多聚氨基酸的旋光度，結果如圖（圖為生化書209頁的圖5-15）所示。⑴解釋旋光度急劇變化的原因。⑵旋光度和二級結構有什么關系？答：（1）多聚賴氨酸在pH小于pI時，R基具有正電荷，靜電排斥，不能形成鏈內氫鍵，呈無規則卷曲，而在pH大于pI時，自發的形成氫鍵，同樣對多聚谷氨酸有變化。（2）α-螺旋的比旋不等于構成自身氨基酸的簡單加和，而是無規則卷曲的比旋才和自身氨基酸的比旋加和相等，α-螺旋的旋光度實際上是α碳原子不同構型的不對稱和α-螺旋的構象不對稱的總反應。2、欲配置100mLpH2.4，0.3mol/L甘氨酸-HCl緩沖液，需多少質量的甘氨酸和多少體積的1mol/LHCl（甘氨酸的相對分子質量75.07，pKa1=2.4，pKa2=9.6）答：因為Gly+→Gly0→Gly-。pR=pKa+lg(Gly0/Gly+)，又因為HCl提供H+，所以2［Gly+］=［H+］，［Gly+］+［Gly0］=0.3mol/L，［H+］=0.5×0.3=0.15mol/L。VHCl=0.15mol/L×0.1L/1mol/L=0.015L。MGly=0.03×75.07=2.2521g3、某DNA重組體的插入片段為線狀雙鏈，長度為10.0kbp，被限制性核酸內切酶A和B降解的產物經凝膠電泳分級分離后結果如下：⑴酶A單獨消化時，得到1.5kbp和8.5kbp的2個片段⑵酶B單獨消化時，得到0.5kb、3.0kbp和6.5kbp的三個片段⑶酶A和酶B一起消化時，得到0.5kbp、1.0kbp、2.0kbp和6.5kbp的4個片段根據上述信息畫出該插入片段的限制性內切酶圖譜。答：畫一條線段，在線段上按順序畫上B,A,B三個點。4、DNA連接酶對于DNA的復制是很重要的，但RNA的合成一般卻不需要連接酶。試解釋該現象。答：DNA聚合酶只能延長已有的DNA鏈，而不能從頭合成DNA鏈，但RNA聚合酶能從頭合成RNA鏈。這是與DNA合成區別之一。在DNA復制時，首先由RNA聚合酶合成一小段RNA引物，然后在DNA聚合酶催化下使鏈得到延伸，在DNA復制完成后，需要把原先的RNA引物切除，因此合成的DNA片段之間通過DNA連接酶進行連接。5、大腸桿菌DNA中，鄰近核苷酸對之間的距離是0.34nm，雙螺旋每一轉的高度（即螺距）是3.4nm，若復制叉以每秒500個堿基對的速度向前移動，復制叉前的DNA以多大的速度旋轉？答：3.4/0.34=10,500/10=50r/s6、為何rRNA和tRNA分子比mRNA穩定，怎樣區分某段mRNA是真核mRNA還是原核mRNA？答：mRNA直接負責蛋白質的產生，翻譯后即可降解，由于功能的差異，穩定性也不同，在不同的組織中半衰期也會有差別。rRNA參與核糖體的組裝，而核糖體是一個相對穩定的結構，因此，rRNA比較穩定，tRNA參與翻譯過程，主要功能是攜帶氨基酸到達核糖體，在完成一次攜帶功能后不可能降解而需要繼續下一輪的氨基酸轉運工作。mRNA游離存在于細胞之中，并且被特異的單鏈RNA核酸酶所降解。tRNA和rRNA是部分雙鏈的所以能夠免遭核酸酶的攻擊。另外，rRNA不是游離存在的，通常同蛋白質結合形成核糖體5＇端帽子結構和3＇端PloyA尾。7、結合乳糖操縱子和色氨酸操縱子的調控機制說明原核生物基因調控原理。答：①σ因子決定RNA聚合酶識別特異性②原核生物中操縱子模型普遍性③阻遏蛋白和阻遏機制的普遍性。大腸桿菌乳糖操縱子包括3個結構基因，Z，Y，A和啟動子，控制子，阻遏子等。轉錄時，RNA聚合酶首先與啟動區結合，通過操縱區向右轉錄，從O區中間開始，按Z→Y→A方向進行，每次轉錄出來的一條mRNA鏈上都帶有著3個基因，轉錄的調控在啟動區和操縱區進行。色氨酸操縱子是一種阻遏型操縱子，當無色氨酸時，輔阻遏蛋白不能結合O序列，操縱基因開放，開始轉錄。當細胞內有大量的色氨酸時，輔阻遏蛋白與色氨酸結合后，可結合O序列阻遏基因轉錄。Trp操縱子的另一個調控方式是衰減調控機制，在色氨酸操縱子第一個結構基因和啟動基因之間存在有一弱化區域，當細胞內色氨酸濃度很高時，通過與轉錄想偶聯的翻譯過程，形成一個弱化子結構，使RNA聚合酶從DNA上脫離，轉錄終止。原核生物的基因調控還有其他形式，但是操縱子是它的基本模式。調控方式有正控制和負控制，且往往正負控制同時作用于一個操縱子。這種多重控制比單一控制更有效、精確。在大腸桿菌中已知的操縱子已超過100.但是相對于真核生物的基因調控方式來看，真核生物的基因調控比原核生物復雜得多，這是因為這兩類生物在三個不同水平上存在著重大的差別。8、在生物大分子的結構研究中使用了多種天然的或人工的化學物質。請舉出三種作用類型不同的人工合成的化學物質。按作用類型，說明它們是如何被用于研究大分子結構的。答：人工合成蛋白質：結晶牛胰島素，通過X射線晶體衍射技術進行胰島素結構的研究，如果是溶液，則用NMR技術研究。人工合成核酸：酵母丙氨酸轉移核糖核酸，用二維核磁共振，X射線晶體學。質譜法也可以用于研究蛋白質和核酸結構，用氣相色譜法研究脂肪酸，人工反式脂肪酸（人造奶油）。

2006年碩士研究生入學考試試題一、名詞解釋1.Shuttleplasmidvector穿梭質粒載體：指能在兩種不同的生物中復制的載體。例如既能在原核生物中復制，又能在真核生物中復制的載體。這類載體不僅具有細菌質粒的復制原點及選擇標記基因，還有真核生物的自主復制序列（ARS）以及選擇性標記性狀，具有多克隆位點。通常穿梭載體在細菌中用于克隆，擴增目的基因，在酵母菌中用于基因表達分析。2.oncogene，proto-oncogene，anti-onco-gene癌基因是一類會引起細胞癌變的基因。癌基因有其正常的生物學功能，主要是刺激細胞的正常生長，以滿足細胞更新的需求。只是當癌基因發生突變后，才會在沒有接收到生長信號的情況下仍然不斷地促使細胞生長或使細胞免于死亡，最后導致細胞癌變；癌基因可分為兩類：一類是病毒癌基因，指反轉錄病毒的基因組里帶有可使受病毒感染的宿主細胞發生癌變的基因，簡寫成V-Onc；另一類是細胞癌基因，簡寫成c-onc，又稱原癌基因（proto-oncogene），這是指正常細胞基因組中，一旦發生突變或被異常激活后可使細胞發生惡性轉化的記憶，抑癌基因或腫瘤抑制基因（tumorsuppressorgene）又稱抗癌基因（anti-onco-gene），是指能夠抑制細胞癌基因活性的一類基因，其功能是抑制細胞周期，組織細胞數目增多以及促使細胞死亡。3.SD序列在原核生物mRNA起始密碼AUG上游7-12堿基處，有一段富含嘌呤的序列，以AG-GA為核心。這段序列可與核糖體30S亞基中16SrRNA3＇端富含嘧啶序列相結合，與翻譯的起始階段作用過程相關。4.SBHsequencingbyhybridization即DNA雜交測序法。如果一段較短的DNA探針能與較長的DNA片段雜交，并形成完全的雙鏈結構，就能推測目標DNA上存在著相應的互補序列，這就是基本原理。5.ORFopenreadingframe開放閱讀框是DNA上的一段堿基序列，由于擁有特殊的起始密碼子和直到可以從該段堿基序列產生合適大小蛋白才出現的終止密碼子，該段堿基序列編碼一個蛋白。6.transcriptionfactor轉錄因子：基因轉錄有正調控和負調控之分。轉錄因子是起正調控作用的反式作用因子。轉錄因子是轉錄起始過程中RNA聚合酶所需的輔助因子。真核生物基因在無轉錄因子時處于不表達狀態，RNA聚合酶自身無法啟動基因轉錄，只有當轉錄因子結合在其識別的DNA序列上后，基因才開始表達。7.allelicexclusion等位基因排斥：形容在特殊淋巴細胞中只有一個等位基因來表達編碼的免疫球蛋白質。參考分子書3468.bZIP亮氨酸拉鏈：出現在DNA結合蛋白質和其它蛋白質中的一種結構基元（motif）。當來自同一個或不同多肽鏈的兩個兩用性的α-螺旋的疏水面（常常含有亮氨酸殘基）相互作用形成一個圈對圈的二聚體結構時就形成了亮氨酸拉鏈。9.attenuator衰減子：是位于細菌操縱子上游的一段核苷酸序列。原核生物中通過翻譯前導肽而實現控制DNA的轉錄的調控方式稱衰減作用。（轉錄衰減是原核生物特有的調控機制）10.molecularhybridization分子雜交：使單鏈DNA或RNA分子與具有互補堿基的另一DNA或RNA片段結合成雙鏈的技術。即核酸分子間的雜交。相互雜交的兩種核酸分子間有時并非完全一致，但必有一定的相關性。二、選擇題1.不屬于β-聚糖的是（A）A.淀粉B.幾丁質C.糖胺聚糖D.纖維素2.Lys是（C）的英文縮寫符號A.甘氨酸B.棕櫚酸C.賴氨酸D.巖藻糖3.肽聚糖中不含有（D）A.D-氨基酸B.L-氨基酸C.氨基糖D.長鏈醇4.以下生物分子中（B）不含有羧基A.精氨酸B.腺苷酸C.透明質酸D.精氨琥珀酸5.右手α-螺旋是一種很穩定的構象，其主要原因是（B）A.螺旋內有芳香氨基酸殘基B.螺旋內所有肽鍵的-NH與>C=O都參與了氫鍵形成C.側鏈基團從螺旋中向外伸出，可以不彼此作用D.每個碳碳連鍵的旋轉度都相同6.下列名詞中（C）可以描述在肽鏈或多核苷酸鏈中出現一種隨機的彎曲A.cycleB.turnC.loopD.fold7.作為典型催化劑的酶具有下列（B）能量效應A.增加活化能B.降低活化能C.提高產物能量水平D.降低反應物能量水平8.酶的親和標記試劑是（B）A.競爭性抑制劑B.不可逆抑制劑C.底物D.非競爭性抑制劑9.可以在木瓜蛋白酶作用了的免疫球蛋白IgG的產物中分離出（D）A.獨立完整的重鏈和獨立完整的輕鏈B.獨立完整的重鏈可變區部分（VH）和獨立完整的輕鏈可變區部分（VL）C.一種僅由重鏈可變區部分和輕鏈可變區部分構成的片段D.一種由全部輕鏈和部分重鏈（含重鏈可變區）構成的片段10.若雙鏈DNA一條鏈中的（A+G）/（T+C）=0.7.則該DNA另一條鏈的（A+G）/（T+C）等于（A）A.1.43B.0.7C.1D.0.311.真核細胞的染色質主要是由以下成分構成的（B）A.DNA、RNA和組蛋白B.DNA、組蛋白和非組蛋白C.DNA、RNA和非組蛋白D.RNA、組蛋白和非組蛋白12.基因剔除（knockcut）的方法主要被用來研究（B）A.基因的結構B.基因的功能C.基因的表達D.基因的調控13.tRNA分子的反密碼子（A）A.位于與氨基酸受體臂相對的環上B.與DNA有義鏈互補C.其序列是TψCD.與核糖體rRNA結合14.紫外線照射對DNA分子的損傷主要是（D）A.堿基替換B.磷酸酯鍵斷裂C.堿基丟失D.形成共價連接的嘧啶二聚體15.下列哪種抗生素可以阻止mRNA與核糖體結合，從而阻止蛋白質的合成（A）A.氯霉素B.鏈霉素C.青霉素D.卡那霉素16.蛋白質生物合成時，活化的氨基酸形式是（D）A.氨基與tRNA的5＇端形成酯B.羧基與tRNA的5＇端形成酯C.氨基于tRNA的3＇端形成酯D.羧基與tRNA的3＇端形成酯17.核酸與蛋白質的合成具有方向性，DNA合成、RNA合成和蛋白質合成方向依次是（C）A.5＇→3＇、3＇→5＇、N端→C端B.5＇→3＇、3＇→5＇、C端→N端C.5＇→3＇、5＇→3＇、N端→C端D.5＇→3＇、5＇→3＇、C端→N端18.端粒酶屬于（B）A.限制性內切酶B.DNA聚合酶C.DNA連接酶D.RNA聚合酶19.有一DNA雙螺旋測得長度為1.7微米，其大約分子量（道爾頓）為（D）A.6.6×106B.3.3×106C.1.7×106D.3.3×10620.下列中易于形成α-螺旋的有（B）A.多聚甘氨酸B.多聚丙氨酸-纈氨酸C.多聚脯氨酸-甘氨酸D.帶正電荷狀態的多聚賴氨酸三、判斷正誤（錯）1.D-構型糖都是右旋糖。（對）2.羧肽酶A中國Zn2+既是活性部位的結合基團，也是催化基團。（錯）3.溶液的pH可以影響氨基酸等電點。（錯）4.核酸的紫外吸收與溶液的pH值無關。（對）5.多數寡聚蛋白質分子其亞基的排列是對稱的。（錯）6.Edman降解的方法可以直接測定所有寡肽的序列。（錯）7.在DNA中連續插入三個核苷酸比只插入一個核苷酸對DNA的功能影響大。（錯）8.纏繞數T相同而連環數L不同的DNA互為拓撲異構體，它們可以通過拓撲異構酶的催化來相互轉變。（對）9.磷酸二酯酶抑制劑可以與刺激cAMP合成的激素協同作用。（對）10.乒乓機制和隨機機制都采用了中間產物學說。四、對下列錯誤論斷給出錯誤分析和反證。示例：（1）自然界的多糖都是由D型單糖構成的。錯誤分析：自然界有少數幾種單糖是L-構型的，它們也見于某些多糖中。反證：構成果膠質的阿拉伯聚糖就是由L-阿拉伯糖聚合而成的。（2）球狀蛋白質能溶于水的原因是其表面有大量電荷。錯誤分析：物質溶解度與其分子與水形成氫鍵有關，因此球狀蛋白質能溶于水的原因是其表面有大量極性基團。反證：向蛋白質溶液加入中性鹽或有機溶劑可以使蛋白質析出。1、血紅蛋白有4個類似肌紅蛋白的亞基，因此血紅蛋白與氧的親和力是肌紅蛋白的4倍。答：沒有任何條件限制2、所謂生物抗氧化劑就是不容易被氧化的生物分子。答：是極易氧化Ve3、所有酶原的激活都是異體激活（非自身激活）。答：胰蛋白酶原4、自然界DNA形成超螺旋時傾向采取負超螺旋，因為只有負超螺旋DA能保持其原來的雙螺旋。答：易于解鏈5、熔點高的不飽和脂肪酸的順式/反式雙鍵比值高。答：越低6、酶的別構效應是一種由產物執行的負反饋機制。答：舉例說明五、計算題1、計算pH7時八肽Gly-Pro-Asp-His-Leu-Glu-Lys-Ala的凈電荷。答：初步根據pK值粗略判斷所帶電荷。參考生化書1662、計算pH5的天冬氨酸（Asp）溶液中Asp-的比例3、已知DNA的260/280值為1.8，RNA的260/280值為2.0。今有一個不含蛋白等雜質的核酸純品，其260/280值為1.9，試問180微克該樣品中RNA和DNA各有多少微克？（注：1OD260的DNA為50微克，1OD260的RNA為40微克）答：不含蛋白質等雜質，即260/280的比值表明只含有DNA和RNA，最終的260/280比值為1.9，小明DNA和RNA的摩爾質量數是相等的。設DNA為xg，則x/50=(180-x)/40，即x=100g4、某酶的Km為4.7×10-5mol/L，Vmax為22μmol/L/min。酶促速度為2×10-4mol/L時，加入5×10-4mol/L抑制劑后，反應速度只有原來的76%。已知抑制劑的Ki為3×10-4mol/L。問該抑制劑是什么類型的抑制劑？

非競爭性抑制公式：競爭性抑制公式：答：直接代入樹脂，看復合那個公式即可六、簡答題1、DNA保存在純水中和保存在鹽溶液中有什么不同？2、假設從一種細菌中獲得核酸混合物，請出一個流程按可能的核酸種類分離純化該核酸組成。答：確定堿基比率。如果有胸腺嘧啶，為DNA，如果有尿嘧啶，則為RNA。如果為雙鏈分子，那么A與T（或U）的量以及G與C的量應相等。3、簡述核糖體必須包括的幾個活性中心及作用。答：參考細胞生物學書309或分子書相關內容。4、簡述DNA的四種修復方式。5、簡述轉座子的概念和遺傳學效應。七、論述題1、比較原核生物和真核生物的mRNA特征和特性。答：原核生物mRNA的特征：半衰期短；多以多順反子的形式存在；5＇端無帽子結構而有SD序列，3＇端沒有或只有較短的polyA結構。真核生物mRNA的特征：半衰期較長；單順反子形式存在；斷裂基因；5＇端帽子結構，3＇端較長的polyA結構（組蛋白除外）。2、論述弱相互作用（次級鍵）及其在穩定蛋白質構象中的作用。（答題要求：解釋弱相互作用并按種類分別論述）

2007年碩士研究生入學考試試題一、名詞解釋1.GAG糖胺聚糖（glycosaminoglycan）：是由重復的二糖單位構成的長鏈多糖，其二糖單位之一是氨基己糖（氨基葡萄糖或氨基半乳糖）。故稱糖胺聚糖；另一個是糖醛酸。包括：透明質酸、硫酸軟骨素、肝素和硫酸角質素等。2.affinitylabelingreagent親和標記試劑：具有底物類似物的結構，可以和相應的酶結合，同時還帶有一個活潑的化學基因，能與酶分子中的必需基團進行共價修飾，從而抑制酶的活性。因抑制劑是通過對酶的親和力來對酶進行修飾標記的，故稱親和標記試劑。3.Domains&motifs結構域和基序：隨著蛋白質結構與功能研究的深入，發現不少蛋白質分子中的一些二級結構單元，如形成相對穩定的αα、ββ、βαβ等超二級結構，又稱模體（motif）或模序。且單個或多個超二級結構，尚可進一步集結起來，形成在蛋白質分子空間結構中明顯可區分的區域，稱結構域，它們分別又是蛋白質分子中的一個個功能單位，故不嚴格地又稱之為功能域。4.Edman降解從多肽鏈游離N末端測定氨基酸殘基的序列的過程。N末端氨基酸殘基被苯異硫氰酸脂（PITC）修飾，然后從多肽鏈上切下修飾的殘基，再經層析鑒定，余下的多肽鏈（少了一個殘基）被回收再進行下一輪降解循環。5.Tm通常把加熱變性時DNA溶液A260升高達到最大值一半時的溫度稱為該DNA的熔解溫度，Tm是研究該核酸變性很有用的參數。Tm值與DNA分子中GC含量成正比。6.genetherapy基因治療：是指將人的正常基因或有治療作用的基因通過一定方式導入人體靶細胞以糾正基因的缺陷或者發揮治療作用，從而達到治療疾病目的的生物醫學新技術。7.interruptedgene斷裂基因：真核生物的基因組十分復雜，DNA十分富余，其結構基因由許多外顯子和內含子組成相間排列的建個基因，即splittinggene8.initiationtRNA起始tRNA：指能特異性地認別mRNA上的起始密碼子，是使蛋白質合成開始的tRNA。9.nonsensemutation無義突變：編碼某一氨基酸的三聯體密碼經堿基替換后，變成不編碼任何氨基酸的終止密碼UAA、UAG或UGA。雖然無義突變并不引起氨基酸編碼的錯誤，但由于終止密碼出現一條mRNA的中間部位，就使翻譯時多肽鏈的終止就此終止，形成一條不完整的多肽鏈。10.genechip基因芯片，又稱為DNA微陣列（DNAmicroarray），其測序原理是雜交測序法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法。該技術主要包括四個基本要點：芯片方陣的構建、樣品的制備、生物分子反應和信號的檢測。二、填空題1.蛋白質的合成主要包括AA的活化、肽鏈起始、肽鏈延伸、肽鏈終止和折疊與加工5個階段，蛋白質合成抑制劑鏈霉素通過干擾fMet-tRNA與核糖體的結合來阻止蛋白質的合成。2.原核生物的轉錄調控系統根據調控機制的不同可分為正轉錄調控、負轉錄調控，乳糖操縱子是負控誘導系統，色氨酸操縱子是負控阻遏系統。3.在DNA復制過程中，改變DNA螺旋程度的酶叫拓撲異構酶。4.原核生物與真核生物的翻譯相比較，原核生物翻譯過程中的不同點有核糖體的大小、起始因子種類、核糖體結合位點、起始tRNA、釋放因子。5.HIV基因組是由兩條單鏈正鏈RNA組成。乙肝病毒基因組由部分單鏈的環狀雙鏈DNA組成。6.密碼子具有簡并性、普遍性和特殊性、密碼子與反密碼子的相互作用3種性質。三、計算題1、向處于等電點的400ml0.1mol/L甘氨酸中加入100mL0.4mol/L醋酸。試計算（1）混合物中的pH；（2）甘氨酸占優勢的等電形式在混合物中的近似濃度。答：根據H-H的公式計算2、1μg純酶（Mr：9.2×103）在最適條件下，催化反應速率為0.5μmol/L。試計算：（1）酶的比活力；（2）轉換數。3、計算Arg145和Glu270的間距，假定該肽鏈全部為α-螺旋。不考慮內含子，其編碼基因中相應DNA區域的長度為多少nm？

答：（270-145）×0.15=18.75nm；125×3×0.34=127.5nm四、簡答題1、真核生物基因表達在轉錄水平上是如何調控的？2、什么叫內含子有何生物學意義

答：內含子是基因內的間隔序列，不出現在成熟的RNA分子中，在轉錄后通過加工被切除，大多數真核生物的基因都有內含子。在轉錄后的加工中，從最初的轉錄產物除去的內部的核苷酸序列。屬于內含子也指編碼相應RNA內含子的DNA中的區域。內含子的存在對生物體的進化中有很重要的作用。A使同源重組兩DNA分子間鏈的斷裂和再連接可以發生在內含子處，促進重組；B增加了基因組的復雜性C內含子和外顯子是相對的，有時也可以轉化為外顯子D它的存在使得選擇性拼接發揮了很大作用。故不能認為內含子是無用序列。3、DNA復制起始過程如何受DNA甲基化狀態影響？答：親本DNA通常發生種屬特異的甲基化。在復制之后，兩個模板-復制體雙鏈體是半甲基化的。因為半甲基化DNA對膜結合受體比對DnaA有更高的親和力，半甲基化DNA不能復制，從而防止了成熟前復制。4、列舉一個已知的DNA序列編碼一種以上蛋白質的三種方法，并舉一例說明。答：給定一段DNA序列可以以下述方式編碼兩種或兩種以上的蛋白質⑴可讀框中在核糖體結合位點之后含有多重起始位點⑵以一兩個堿基的移碼方式出現重疊的可讀框⑶不同的剪接方式，例如選擇不同的外顯子組合成不同的mRNA。5、說明為什么mRNA僅占細胞RNA總量的一小部分（3%~5%）答：mRNA只占總RNA的3%-5%，這主要是有以下兩個原因：①由于需要大量的核糖體和穩定的tRNA群，因此mRNA合成量比其他RNA的量要少②由于對內切酶與外切酶敏感，mRNA容易自發地降解，所以在原核細胞中MRNA的半衰期只有2-15分鐘，真核細胞中也只有4-24小時。6、試列表比較核酸與蛋白質的結構及作用力。答：從初級結構到高級結構，構象維持的作用力（考察基礎知識）五、問答題1、下圖顯示來自兩種血紅蛋白的氧合曲線。（1）分析該實驗結果。（2）如何根據蛋白質分子結構解釋該曲線

（3）如果同時知道這兩種血紅蛋白的其他信息，例如①它們分別來自胎血和成人血，或者②它們分別來自長期生活在青藏高原和華北平原的男性人體。請推測兩種血紅蛋白各對應兩種假設中的哪一種，并說明理由。2、已知某受體蛋白質與一種激素結合后引起細胞內蛋白激酶活化，問該受體蛋白質是外周蛋白還是內在蛋白？并說明理由。3、現分離到一種新蛋白，試設計實驗對該蛋白的基因進行分子克隆。4、真核生物基因組中有哪些類型的DNA重復序列？簡要說明基因組重復序列可能的生物學意義以及基因組重復序列在分子標記研究中的應用。答：第一代多態性標記是RFLP（restrictionfragmentlengthpolymorphism，限制性片段長度多態性）。第二代多態性標記是短的串聯重復序列包括小衛星DNA和微衛星DNA，其多態性主要來自重復序列拷貝數的變化，小衛星DNA-由15-65bp的基本單位串聯重復而成，長度一般不超過20kb。重復次數（小衛星DNA區的長度）在人群中是高度變異的；按照孟德爾的規律遺微衛星DNA/簡短串聯重復（STR、STRP或SSLP），重復單元2-8bp，通常重復10-60次。第三代多態性標記是單核苷酸的多態性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）分子標記是遺傳標記的一類。遺傳標記主要有3大類：⑴形態標記，如顏色、大小、高矮等⑵蛋白質標記，如同工酶等⑶DNA標記。在這里，分子標記是指DNA標記。DNA標記有許多種，如RFLP、RAPD、AFLP、SCAR、SSR、STS、SSCP和VNTR等。其中的一些標記已成功地應用于植物育種的各個方面。5、以生物大分子的序列互補為題，寫一篇400字左右的短文。答：生物大分子包括：糖類、脂類、核酸、蛋白質序列互補：核酸故以核酸的序列互補配對進行發揮。

2008年碩士研究生入學考試試題一、名詞解釋1.RACErapid-amplificationofcDNAends通過PCR進行cDNA末端快速克隆的技術。2.酶的自殺底物指一些底物類似物能為酶所催化，其形成的產物與酶活性中心共價結合，不可逆地抑制酶的活性的物質。3.逆轉座子在基因組內存在著通過DNA轉錄為RNA后，再經逆轉錄成為cDNA并插入到基因組的新位點上的因子，被稱為逆轉座子。4.衛星DNA一類高度重復序列串聯的DNA，衛星DNA按其重復單元的核苷酸的多少，可以分為兩類。一類是小衛星DNA，由幾百個核苷酸對的單元重復組成。另一類是微衛星DNA，由2到20個左右的核苷酸對的單元重復成百上千次所組成。二、填空題1.核糖核酸經酸完全水解后，分裂為堿基、核糖和核酸三部分。2.DNA的二級螺旋結構有A型、B型、和Z型三種，B型DNA在細胞內占優勢，在堿基數相同時，A型DNA的長度最短。3.起始tRNA能特異性地識別mRNA模板上起始密碼子，原核生物的起始tRNA攜帶甲酰甲硫氨酸，真核生物的起始tRNA攜帶甲硫氨酸。4.限制性核酸內切酶和DNA連接酶的發現和應用被認為是現代基因工程史上最重要的事件，是重組DNA的核心。5.免疫系統是動物的主要防御系統，包括細胞免疫和體液免疫兩部分。6.真核生物基因表達在DNA水平的調控包括基因刪除/丟失、擴增、重排/移位和修飾等方式。7.細菌細胞壁的主要成分是肽聚糖，幾丁質的單糖成分為N-乙酰-β-D-葡糖胺。8.谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成的，它們之間的連接方式是谷氨酸γ-羧基-α-氨基-半胱氨酸α-羧基-α-氨基-甘氨酸。9.構成生物膜的脂類包括磷脂、膽固醇和糖脂。10.蛋白質中能通過側鏈烴基發生O-糖基化的氨基酸殘基是絲氨酸和蘇氨酸。11.認為肽鍵具有部分雙鍵性質的主要依據是-CO-NH-中的C-N鍵長介于C=N與C-N之間。12.DNA的Tm定義為使DNA雙螺旋結構失去一半時的溫度。13.廣義的核酶包括具有催化能力的DNA和RNA。14.輔酶NAD+/NADH和FADH2/FAD在反應中轉移電子，它們轉移電子的形式分別可以表示成H-和H。15.陽光的能量能使動物體的某種維生素原變為維生素，這種維生素原是存在于皮膚中的7-脫氫膽固醇。16.胰島素作用胰島素受體時，直接的效應是受體獲得酪氨酸激酶活性。17.絲氨酸蛋白酶催化三聯體包括Ser-His-Asp。18.推測一多聚谷氨酸，在pH=pI和pH>pI時的構象分別為α螺旋、伸展構象。19.糖原與淀粉結構上的區別是糖原的α-1,6糖苷鍵/α-1,4糖苷鍵的比例高于淀粉。20.溶菌酶是水解酶酶類，作用的對象是肽聚糖的糖鏈的NAM-NAG之間的β-1,4糖苷鍵。三、計算題1、一個線性DNA分子經過連續5代復制后，原始DNA占總DNA的比例是多少？答：每一代DNA的量都加倍。因此，連續5代后DNA量將是原始DNA的32倍（2的5次方）。因此，原始DNA占總DNA的3.125%。2、應該加多少毫升0.1mol/LKOH到450mL0.25mol/L丙氨酸鹽酸鹽中才能配成pH5.0的緩沖液（

丙氨酸的pKa1=2.34，pKa2=9.69）答：⑴加入KOH，丙氨酸鹽酸鹽（Ala+）的解離過程如下：Ala+→Ala0→Ala-根據pH=pKa1+lg［Ala0］/［Ala+］，pH5.0的丙氨酸鹽酸鹽-KOH緩沖液中，［Ala0］/［Ala+］=102.66①⑵設加入的KOH的體積為xL，OH的摩爾數=0.1x；丙氨酸的總離子濃度=0.45×0.25/（0.45+x）(mol/L)，［Ala0］=［OH］=0.1x/（0.45+x）②忽略Ala-，則［Ala0］+［Ala+］=0.45×0.25/（0.45+x）（mol/lL）③解方程①②③得：0.1x/(0.45+x)+10-2.66×0.1x/(0.45+x)=0.45×0.25/(0.45+x)0.1x(1+10-2.66)=0.45×0.25x≈1.125L答：應加1125mL0.1mol/LKOH到450mL0.25mol/L丙氨酸鹽酸鹽中才能配成pH5.0的緩沖液四、簡答題1、原核生物mRNA轉錄準確起始所必需的條件？答：-35（RNA聚合酶結合位點），-10（RNA聚合酶起始位點）啟動子序列和終止子。2、為什么DNA最適合作為遺傳物質？答：DNA是由磷酸二酯鍵連接的簡單核苷酸多具體，其雙鏈結構（二級結構）保證了依賴于模板合成的準確性。DNA以遺傳密碼的形式編碼多肽和蛋白質，其編碼形式的多樣性和復雜性是令人難以想象的。3、有一段長為300個堿基的RNA序列，你怎樣證明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。答：根據序列組成進行判斷：⑴此序列太長不可能是tRNA。如果它是rRNA，應該含有許多特殊元件，如：假尿嘧啶和5-甲基胞嘧啶；同時應具有可以形成發卡環的反向重復序列。如果是mRNA則應有AUG起始密碼子、一段相應的氨基酸密碼子和一個相應的終止密碼子構成的可讀框。4、DNA連接酶催化什么反應，它在DNA復制中的作用是什么？答：DNA連接酶催化兩個DNA片段的共價結合。雙鏈DNA在相鄰的5＇-磷酸基團和3＇羥基之間形成磷酸二酯鍵。即DNA連接酶能夠縫合缺口。DNA連接酶在與DNA有關的幾種反應中均有重要作用。在復制過程中，它將后隨鏈的新生DNA片段相連接，這個過程伴隨著由DNA聚合酶Ⅰ作用的以DNA代替RNA引物的過程。五、問答題1、試述真核生物RNA的加工成熟過程及其生物學意義。答：加帽子反應：mRNA從細胞核向細胞質運轉，翻譯起始加polyA反應：轉錄終止，翻譯起始和mRNA降解RNA的剪接：從mRNA、tRNA和rRNA分子中切除內含子RNA的切割：從前體RNA中釋放成熟tRNA和rRNA2、如何通過動力學測定來完成下列任務？（1）已知某個蛋白質存在2個配基結合位點。證明這2個位點是相互獨立的；（2）證明某個雙底物酶的催化反應是由序反應；（3）在一組化合物中，尋找某酶的最適底物和抑制劑，并確定抑制類型；（4）初步確定某化合物為某寡聚酶的別構調節物。答：⑴與配基結合的動力學曲線是雙曲線。⑵比較每個底物與酶單獨結合時的結合動力學曲線，只可能測到其中一個有。⑶①比較針對每一種化合物的速度曲線，有反應的才是底物。比較底物的酶動力學曲線，求出常數Km（Ki）和Kcat（Vm），比較Kcat/Km，最適底物有最大的Kcat/Km。②在最佳底物確定后，可以比較加有某化合物時酶催化底物的速度曲線，