RET原癌基因的研究進展〔〕:

摘要：RET基因是一個在轉化中發生重排的原癌基因，它編碼細胞膜受體酪氨酸激酶。近些年隨著對酪氨酸激酶家族的深化研究，發現RET基因在多種惡性腫瘤中存在高表達和/或基因重排現象，且RET的表達與這些惡性腫瘤的發生、開展關系親密。RET的表達與腫瘤惡性程度呈正相關，與患者的預后呈負相關，在惡性腫瘤治療方面RET可以作為新的治療靶點。本文就近幾年來對RET原癌基因的研究進展進展綜述。

關鍵詞：RET基因；惡性腫瘤；交融突變；靶向治療

本文引用格式：程前,王勇.RET原癌基因的研究進展[J].世界最新醫學信息文摘,2022,19(96):92-93.

0引言

RET屬于原癌基因，它編碼的蛋白質RET蛋白是一種跨膜蛋白，該蛋白質屬于受體酪氨酸激酶家族。酪氨酸激酶家族是涉及幾乎所有癌癥類型的信號分子家族，同時也是癌癥靶向治療藥物研發的根底。酪氨酸激酶家族成員的基因突變是許多不同種類癌癥發生開展的主要驅動因素。當RET基因發生突變并被激活時，可能會編碼出異常的蛋白質，而異常的RET基因會傳遞異常信號，并造成在細胞生長、生存、侵襲、轉移等多方面的影響。持續的異常信號傳遞可能造成細胞的過度增殖，因此導致腫瘤的發生和開展。

近些年隨著對酪氨酸激酶家族的深化研究，發現RET基因在多種惡性腫瘤中存在高表達和/或基因重排現象，且RET的表達與這些惡性腫瘤的發生、開展關系親密。本文就近些年關于RET與癌癥之間關系的研究進展進展綜述。

1RET基因及酪氨酸激酶家族的生物學特性

1.1RET基因的生物學特性

RET蛋白是一種受體酪氨酸激酶(RTK)，RET基因的18個酪氨酸殘基中至少有14個可以磷酸化，RET磷酸位點對鄰近元素催化核的變構存在著影響，其自磷酸化是RTK在細胞內以時間和空間的調控方式通過細胞外信號在細胞內傳遞信息的最重要途徑之一，它可以從細胞外(配體可用區)和細胞內(催化區)來嚴格控制酪氨酸激酶域的活性。在RET催化域V804M和M918T突變體自磷酸化過程研究中發現，這兩種致癌突變體的自體磷酸化動力學速度比野生型(WT)蛋白較快，與野生型相比，RET側部元素的早期磷酸化位點Y1062和Y687表現出更快的磷酸化動力學速度，其速度變化與兩種突變體的酶活性升高呈一致性。由此可以推測，致癌的RETV804M和M918T催化域突變體均增強了自磷酸化的過程。有研究者還發現，RETM918T在特定位點表現出一定程度的磷酸化，這種現象說明該突變體可能抑制順式調控抑制機制或利用反式調控機制完成其生物學活性，胚胎發育過程中它對神經系統、腎、內分泌型器官、精子等的生長、發育發揮著關鍵的作用，對成體的影響那么主要表如今神經系統。RET基因信號通路通過促進突觸形成、信號傳遞、神經重塑三方面來維持神經功能【1】。

1.2惡性腫瘤發生與RET基因信號轉導

RET基因激活胞外環路磷酸化過程，有助于細胞內所有RET受體酪氨酸激酶的激活。整體細胞效應與個體酪氨酸激酶活動并非一致，因此整體細胞效應不會影響受體激酶活性,但下游信號通路的改變及細胞內產生的效應會對RET磷酸化和激酶的活性產生影響。目前研究已證實許多腫瘤的發生都依賴于酪氨酸激酶受體的激活。最早的研究發現，RET與甲狀腺乳頭狀癌和髓樣癌的形成有關，近些年隨著對RET關聯蛋白激活下游信號轉導通路的機制越來越明晰，該信號在惡性腫瘤發生中的調控作用越來越研究者們重視【2】。目前較為清楚的是Eph/Ephrin信號通路，其在胚胎發育過程中調節多種生理過程，尤其是在細胞形成、增殖、遷移和軸突引導中起著關鍵性作用。如EphrinA(EphA)配體可以使EphA受體在細胞與細胞連接處激活，并且誘導RET受體酪氨酸激酶產生一種反向信號【3】。在過去的20多年里，對RET基因表達、信號傳導和細胞生物學的深化研究為RET在惡性腫瘤發活力制的研究及臨床診斷及藥物治療方面提供了新的思路。

2RET基因在惡性腫瘤中的表達及臨床病理特征

2.1RET基因與多發性內分泌腫瘤〔MEN2〕

MEN2是一種顯性遺傳的影響神經內分泌的癌癥綜合征，是RET原癌基因轉錄過程中發生突變引起的。MEN2A患者受RET基因C634Y、C634R位點突變影響，MEN2B患者受到RET基因M918T位點突變的影響。而C634R突變那么可以增強RET蛋白的表達，改變基因突變的位置。研究發現，單獨使用GDNF〔glialcellline-derivedneurotrophicfactor，GDNF〕處理可以進步RETM918T位點磷酸化程度，并且影響AKT/ERK1/2通路，但是不能導致WT或C614R突變【4】。根據RET基因突變類型的不同組織起源，將腫瘤分為三種不同的臨床亞型，即MEN2A型、MEN2B型、家族性MTC(FMTC)。

2.1.1MEN2A型

此型以甲狀腺髓樣癌(medullarycarcinoma,MTC)為特征性病變，是一種以鈣蛋白分泌旁腺細胞病變為特征的惡性腫瘤。嗜鉻細胞瘤(pheochromocytoma,PC)，是一種腎上腺嗜鉻細胞病變和甲狀旁腺功能亢進為特征的一種腫瘤。MTC是MEN2A所有患者的共同特征(100%)，而PC那么僅見于50%，15-30%的患者見于HPT〔Hyperparathyroidism，HPT〕。

2.1.2MEN2B型

此型患者表現出更為復雜的臨床表現，包括舌唇眼瞼神經節細胞瘤、腸神經節細胞瘤、增厚的角膜神經以及馬凡諾綜合征等。MEN2B的共同特征是100%的患者患MTC，約50%的患者患PC，極少有患者表現出HPT。

2.1.3家族性MTC

FMTC的特點是在受影響的家庭有4個或4個以上成員患病時，會表現出MTC，因此被稱為家族性MTC。也有學者認為FMTC不應該被歸為一種"獨立";的疾病，它應該屬于MEN2A位點突變的一種類型。

2.2RET基因與肺癌

在非小細胞肺癌(NSCLC)、甲狀腺乳頭狀癌和骨髓單核細胞白血病中，均被發現有RET基因重排的現象。在NSCLC中已發現了幾種RET結合物，包括KIF5B-RET、CCDC6-RET、NCOA4-RET和trim33-RET【5】。研究發現約1-2%的肺腺癌中也報道了有RET基因的交融，在腺癌中其可能成為是一個可操控的靶點，新型KIF13A-RET交融物中包含完好的RET激酶構造域，KIF13A的外顯子1-18和RET的外顯子12-20，并且發現與吸煙無相關性【6】。NSCLC早期和中期患者RET陽性表達率較相對較低，其表達率與腫瘤分化程度有關，RET陽性表達成為NSCLC患者中相對獨立的因素，說明RET基因可以成為個性化治療NSCLC的新靶點【7】。

2.3甲狀腺癌

甲狀腺乳頭狀癌(PTC)和甲狀腺髓樣癌(MTC)以RET基因重排和點突變為病變特征。富含亮氨酸的重復序列和免疫球蛋白樣構造域1(LRIG1)是多種酪氨酸激酶受體的抑制因子。不同癌癥類型的RET-LRIG1表達程度與患者存活率之間關系親密[8]。在甲狀腺乳頭狀癌(PTC)和髓質癌(MTC)亞群中，激活受體酪氨酸激酶導致RET基因突變已被確認為是驅動正常組織癌變的關鍵因素。從基因和藥理兩方面證實了RET致癌基因和編碼的構造活性癌蛋白能成為潛在治療靶點[9]。研究證實BRAFV600E突變和RET/PTC易位重排可促進惡性腫瘤的進展,包括炎癥介質的表達和淋巴結的轉移，從而加速患者PTC開展的進程。此外，RET突變也是鑒高度侵襲性散發型MTC的可靠生物分子標志物，因此它可以幫助臨床醫生更好地評估患者的預后[10]。

2.4神經母細胞瘤

在神經母細胞瘤中，RET轉錄下降先于RET蛋白下降。有學者研究發現，在神經母細胞瘤細胞系中，當ALK激活或抑制時，ETV5在蛋白和mRNA程度上都受到影響，而這種影響先于RET對它的調節。Chip-seq分析證實，ETV5與RET啟動子結合，激活了啟動子上游的增強子，因此ETV5驅動了RET基因的轉錄。在MYCN和alkf1178l驅動的小鼠神經母細胞瘤實驗中，結合使用RET抑制劑和ALK抑制劑比單一用藥更能有效的抑制腫瘤的生長速度。這些結果可以推測出ERK-ETV5-RET通路成為激活ALK下游神經母細胞瘤腫瘤發生的關鍵[11]。NB〔neuroblastomacells，NB〕細胞增殖需要RET，因此RET高表達會導致NB患者預后不良。小分子抑制劑雷格列尼regorafenib〔BAY73-4506〕可阻斷NB細胞中的膠質細胞衍生出神經營養因子(GDNF)繼而誘導RET的信號通路，還可以抑制NB在體內外的生長。RET是NB潛在的治療靶點，因此使用新型RET抑制劑如regorafenib可以改善患者的預后[12]。

2.5嗜鉻細胞瘤及先天性巨結腸

研究中發現，25%的嗜鉻細胞瘤或副神經節瘤患者存在錯義或無意義的生殖系基因變異，包括c.SDHB基因136C>T(p.R46X)變異、RET基因的1901G>A(C634Y)變異、c.2071G>A(p.G691S)和c.RET基因的2712C>G(p.S904S)變異。前兩種變異已經被證實具有致病性，這些變異存在于嗜鉻細胞瘤和/或副神經節瘤患者中，因此對嗜鉻細胞瘤和/或副神經節瘤患者進展c.SDHB和RET基因檢測顯得較為重要[13]。先天性巨結腸病(Hirschsprungdisease,HSCR)是一種復雜的腸神經系統遺傳疾病，最常見的發病原因是腸道細胞完全喪失神經元、神經節。而80%以上的致病發生在RET基因突變上。通過免疫熒光染色和PCR擴增RET基因，發現生成的iPSCs表達了OCT4、SSEA4、SOX2、tra1-60和NANOG多種標記物，研究還發現hscrp-pscs陽性的細胞體外培養可以分化為三胚層細胞，證實RET基因突變可引起HSCR[14]。

3RET基因的抑制劑

在臨床治療中，患者耐藥越來越容易發生，而且某些藥物具有很明顯的非靶向毒性，因此我們必須考慮尋找新的的治療方案(例如使用抑制劑個性化治療變構區域)，這種思路適用于RET激酶域交融和/或RET陽性人類癌癥(如肺癌、甲狀腺癌、結腸癌等)治療的研究。

3.1RET抑制劑blul-667

研究結果說明，RET抑制劑blul-667平安且耐受性良好，在RET重排的甲狀腺髓質癌或非小細胞肺癌患者中使用后獲得了良好的效果。人體組織內，blu-667在不抑制VEGFR2的情況下，通過多種方式作用于重排的RET基因并阻礙其開展，因此能有效的抑制非小細胞肺癌和甲狀腺癌的轉移和生長。實驗結果說明blul-667能很好地抑制RET信號通路，并在無明顯超靶細胞毒性的條件下使RET突變型NSCLC和MTC患者獲得較好的臨床治療效果，這一結果為選擇性RET靶向治療提供了臨床證據。Blu-667還可以誘導有RET基因突變和交融的腫瘤模型的腫瘤回歸。同時blu-667也減弱了RET的信號，并在有RET基因改變的腫瘤患者中產生持久的治療作用[15]。卡巴坦尼〔Cabozantinib〕是一種受體酪氨酸激酶抑制劑(TKI)，對包括MET、RET、AXL、VEGFR2、FLT3和c-Kit在內的一系列靶點均有作用[16]。小分子酪氨酸激酶抑制劑，包括索拉非尼、舒尼替尼、莫迪沙尼和萬得他尼等等，這些藥物中的大多數被稱為RET抑制劑，它們是多激酶抑制劑，具有抑制酪氨酸激酶受體(比方血管內皮生長因子受體)的抗血管生成作用，在治療其他腫瘤性疾病方面也已經獲得了不錯的療效[17]。

3.2RETI型抑制劑

I型抑制劑是一類抑制劑的統稱。RET基因重排在多發性內分泌腫瘤(MEN2A,MEN2B)、非小細胞肺腺癌、甲狀腺髓樣癌中已有報道，其中僅在甲狀腺乳頭狀癌中，就有十多種RET的交融種類被發現，最常見的是CCDC6-RET和NCOA4-RET。在非小細胞肺癌(NSCLC)中發現的RET重排蛋白中，最多見的是KIF5B-RET型。FDA批準了幾種靶向RET的藥物用于治療癌癥，包括卡波贊替尼(cabozantinib)和萬得他尼(vandetanib)治療甲狀腺髓樣癌；倫瓦替尼(lenvatinib)和索拉非尼(sorafenib)治療分化型甲狀腺癌。所有這些拮抗劑都能與RET的活性構象結合，因此被歸類為I型抑制劑。目前，美國每年估計有1萬例新發的帶有RET突變或RET重排蛋白的腫瘤病例，證明針對RET基因來研制腫瘤的特異性拮抗劑具有應用價值[18]。

3.3RET與ShcD免疫沉淀抑制下游通路

在GDNF的治療中，通過ShcD與SK-N-AS與神經母細胞瘤中的RET結合，發生免疫沉淀反響。ShcD-RET的表達促進了ShcD和RET在體內的結合，導致下游ERK和AKT通路的抑制[19]。轉染過程中重新排列的酪氨酸激酶受體是激活多種癌癥的致癌因子，包括非小細胞肺癌(NSCLC)、髓狀甲狀腺癌(MTC)和甲狀腺乳頭狀癌。因此，結合EGFR和RET抑制osimertinib/blu667可能是這類患者有效的治療策略[20]。

4結語

綜上所述，隨著對RET基因的不斷研究，越來越多的證據證明RET的表達和重排與惡性腫瘤的發生和開展有著親密的關系。RET的表達和變異不僅在惡性腫瘤的發生過程中起到了促進作用，還加速了轉移的速度。因此，深化研究RET的突變和表達與惡性腫瘤的關系，并努力控制或者打破兩者之間的關系，能為臨床治療提供新的思路。如今雖然報道以RET為靶點治療惡性腫瘤獲得了一些臨床效果，但在這方面的研究和技術還缺少很多資料，離廣泛的臨床應用還有較大的差距。因此尋找一種敏感、平安的特異的RET抑制劑來改善RET基因突變腫瘤患者的預后，為癌癥的精準治療和個體化治療的施行需要進展更深化的研究。

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