1、不同產(chǎn)地當(dāng)歸中阿魏酸、藁本內(nèi)酯及總多糖含量比擬【摘要】目的通過測定不同產(chǎn)地當(dāng)歸中阿魏酸、藁本內(nèi)酯和總多糖的含量,討論產(chǎn)地對當(dāng)歸藥材質(zhì)量的影響及當(dāng)歸道地性的科學(xué)根據(jù)。方法采用高效液相色譜法和比色法,測定甘肅、云南、四川、陜西等地所產(chǎn)當(dāng)歸中阿魏酸、藁本內(nèi)酯和總多糖的含量。結(jié)果在4個(gè)產(chǎn)地的當(dāng)歸中,阿魏酸、藁本內(nèi)酯和總多糖的含量均以甘肅產(chǎn)當(dāng)歸為最高。結(jié)論甘肅產(chǎn)當(dāng)歸質(zhì)量較好,甘肅當(dāng)歸的道地性是有科學(xué)根據(jù)的。【關(guān)鍵詞】當(dāng)歸；阿魏酸；藁本內(nèi)酯；總多糖；高效液相色譜法abstrat：bjetivetstudytheaffetinfultivatingreginstthequalityfradixangelia

2、esinensisandthesientifibasisfauthentiityfradixangeliaesinensis.ethdstheauntsfferuliaid,ligustilideandttalplysaharideinradixangeliaesinensisultivatedingansu,yunnan,sihuan,shanxiprvineseredeterinedbyhplanduvspetrphtetry.resultsradixangeliaesinensisultivatedingansuprvinepssessesthehighestntentsfferulia

3、id,ligustilideandttalplysaharideangthatfrfurregins.nlusinthequalityfradixangeliaesinensisultivatedingansuprvineisbetterthanthatfrtherregins.itisreasnabletregardradixangeliaesinensisultivatedingansuprvineasauthentiedialherbs.keyrds：radixangeliaesinensis；feruliaid；ligustilide；ttalplysaharide；hpl當(dāng)歸為傘形科

4、植物當(dāng)歸angeliasinensis(liv.)diels的枯燥根,具有補(bǔ)血活血、調(diào)經(jīng)潤腸成效1,主產(chǎn)于甘肅,云南、陜西、四川等地亦有栽培。據(jù)考證,中國歷代一直以現(xiàn)今甘肅岷山山脈所產(chǎn)當(dāng)歸為道地品種,早在公元六世紀(jì)初,就已作為貢品2。為討論產(chǎn)地對當(dāng)歸藥材質(zhì)量的影響及當(dāng)歸道地性的科學(xué)根據(jù),我們對產(chǎn)于甘肅、云南、四川、陜西等地當(dāng)歸中阿魏酸、藁本內(nèi)酯及總多糖含量采用高效液相色譜法和比色法測定。1儀器與材料l-10avp高效液相色譜儀(日本島津),包括l-10avp泵、dadspd-10avp紫外-可見光檢測器,-r6a數(shù)據(jù)處理機(jī)；722g型分光光度計(jì)(上海光學(xué)儀器廠)。阿魏酸對照品(美國siga；s

5、t.luis,)；藁本內(nèi)酯對照品由總后衛(wèi)生部藥檢所提供；右旋糖苷(dextran,分子量10000-20000,美國siga；st.luis,)。當(dāng)歸采自甘肅岷縣、宕昌,云南麗江、中甸,四川寶興、南平,陜西龍縣、平利。經(jīng)過筆者鑒定為當(dāng)歸angeliasinensis(liv.)diels。乙腈為色譜純,其它試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1色譜條件nva-pak18色譜柱(1503.9,4),預(yù)柱nva-pak18(203.9,4)。流動(dòng)相為乙腈-水(磷酸調(diào)至ph4.0),梯度洗脫,010in,5%35%乙腈；1030in,35%70%乙腈；3040in,70%5%乙腈。檢測波長為284n,體

6、積流量為1l/in,柱溫為室溫,進(jìn)樣量20l。在上述色譜條件下,阿魏酸、藁本內(nèi)酯與樣品中其它組分色譜峰可達(dá)基線別離,相鄰色譜峰別離度大于1.5。色譜圖見圖1。2.2對照品溶液的制備及對照品純度檢查精細(xì)稱取阿魏酸、藁本內(nèi)酯對照品(五氧化二磷減壓枯燥36h)適量,加甲醇制成1g/l阿魏酸和2g/l藁本內(nèi)酯的混合對照品溶液,即得。將混合對照品溶液稀釋10倍,備用。汲取混合對照品稀釋溶液和空白試劑各20l,注入液相色譜儀,記錄色譜圖。除去甲醇溶劑峰后,按峰面積歸一化法計(jì)算各對照品純度,2種對照品質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于99%。另精細(xì)稱取右旋糖苷(105枯燥至恒重)0.1g,定容至100l量瓶中,得0.1%右旋糖

7、苷儲藏液。2.3供試品溶液的制備取當(dāng)歸藥粉約0.5g,精細(xì)稱定,置50l離心管中,加甲醇20l,超聲提取(功率120,頻率40khz)40in,離心后搜集上清液,重復(fù)提取1次,合并兩次提取液,回收甲醇至干,精細(xì)加甲醇2l溶解,供阿魏酸、藁本內(nèi)酯測定。另精細(xì)稱當(dāng)歸藥粉5.0g,加水40l,加熱,沸騰后保持40in。煎煮2次,過濾,濾液離心,合并2次上清液,冰凍枯燥,即得。再精細(xì)稱取該提取物0.5g,加水2l溶解,再加95%乙醇使其濃度達(dá)85%。靜置24h,抽濾。濾餅用70%乙醇洗滌5次,然后溶解在60水中,2000r/in離心5in,搜集上清液,加水定容至100l容量瓶中,供測定多糖用。2.4線

8、性關(guān)系考察精細(xì)汲取阿魏酸、藁本內(nèi)酯混合對照品稀釋液2、4、8、16、32、64l,依次注入高效液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo),各對照品含量(g)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。另精細(xì)汲取右旋糖苷儲藏液0.10、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00l分別置100l容量瓶中,加水定容至刻度,搖勻,得各標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。精細(xì)汲取各標(biāo)準(zhǔn)溶液2.50l于10l具塞試管中,參加5.00l0.2%蒽酮-濃硫酸顯色劑,搖勻,置沸水浴中加熱10in,取出,放至室溫,于625n波長處進(jìn)展比色測定。另取2.5l蒸餾水同樣操作,作空白對照。各對照品的回歸方程、相關(guān)系數(shù)及線性范圍

9、(g/l)如下：阿魏酸：y210-7x0.0362,0.9994,0.11.6；藁本內(nèi)酯：y410-7x0.0132,0.9996,0.812.8；右旋糖苷：y6.0110-3x4.7110-3,0.9991,0.010.11。2.5精細(xì)度試驗(yàn)分別精細(xì)汲取阿魏酸、藁本內(nèi)酯對照品稀釋液20l,重復(fù)進(jìn)樣6次,測定峰面積。另取當(dāng)歸總多糖測定樣品液2.50l,按照樣品多糖含量測定方法測定吸收值,重復(fù)測定5次。結(jié)果阿魏酸、藁本內(nèi)酯和多糖的精細(xì)度rsd分別為1.36%、1.34%、2.21%。2.6重現(xiàn)性試驗(yàn)取當(dāng)歸樣品0.5g,平行制備供試品溶液5份,進(jìn)樣,測定阿魏酸、藁本內(nèi)酯峰面積積分值。另取當(dāng)歸樣品5

10、.0g,平行制備供測定多糖用的供試品溶液5份,按“樣品含量測定項(xiàng)下多糖測定方法操作,測定多糖含量。各對照品重現(xiàn)性rsd為：阿魏酸0.77%,藁本內(nèi)酯1.20%,多糖2.81%。2.7回收率測定精細(xì)稱取2批含量的當(dāng)歸樣品各5份,分別供測定多糖及阿魏酸、藁本內(nèi)酯的回收率。其中供測多糖的樣品每份5.0g,測阿魏酸、藁本內(nèi)酯的樣品每份0.5g。2批樣品分別參加右旋糖苷對照品5.0g,阿魏酸、藁本內(nèi)酯對照品各1.0g,制備供試品溶液,按“樣品含量測定項(xiàng)下各對照品測定法操作,測定各對照品含量,計(jì)算回收率。各對照品平均回收率(%)分別為：右旋糖苷97.12,阿魏酸97.83,藁本內(nèi)酯97.82。其rsd分別

11、為2.39%、1.23%、2.13%。2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)取各供試品溶液,分別于配制后0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12h,按“樣品含量測定項(xiàng)下各對照品含量測定法操作,測定各對照品含量。阿魏酸、藁本內(nèi)酯含量在12h內(nèi)根本穩(wěn)定,多糖在2h內(nèi)穩(wěn)定,其中阿魏酸、藁本內(nèi)酯多糖rsd分別為0.82%、0.50%、2.12%。2.9樣品測定阿魏酸、藁本內(nèi)酯的測定：分別精細(xì)汲取對照品和供試品溶液,注入液相色譜儀,測定峰面積積分值,按外標(biāo)法計(jì)算,即得。多糖測定：精細(xì)量取供試品溶液2.50l,按多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下做比色測定,計(jì)算樣品中多糖含量。含量測定結(jié)果見表1。表1不同產(chǎn)地當(dāng)歸中阿魏酸、藁本內(nèi)酯及總

12、多糖含量測定結(jié)果(略)注：與云南、四川、陜西產(chǎn)當(dāng)歸相比,*p0.01。3討論當(dāng)歸中的有效成分主要是阿魏酸、藁本內(nèi)酯及多糖類。其中阿魏酸具有抑制血小板凝集的作用,藁本內(nèi)酯能抑制子宮平滑肌,多糖類可促進(jìn)造血功能。這些成分通常作為當(dāng)歸質(zhì)量優(yōu)劣的評價(jià)指標(biāo)3-4。因此,本實(shí)驗(yàn)通過測定這些成分的含量來評價(jià)不同產(chǎn)地當(dāng)歸的品質(zhì)。結(jié)果說明：在甘肅、云南、四川、陜西4個(gè)省區(qū)所產(chǎn)的當(dāng)歸中,甘肅產(chǎn)當(dāng)歸中阿魏酸、藁本內(nèi)酯和總多糖含量明顯高于其它產(chǎn)區(qū),具有顯著性差異。因此,甘肅當(dāng)歸質(zhì)量確實(shí)要優(yōu)于其它產(chǎn)區(qū)的當(dāng)歸,其道地性有一定的科學(xué)根據(jù)。【參考文獻(xiàn)】1國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)s.北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2022.71.2胡世林.中國道地藥材.哈爾濱：黑龍江科技出版社,1989.461.3liux,xiapg,lidp.dernres