1、胃切除術對大鼠骨密度及鈣磷含量的影響【摘要】目的討論胃切除術對大鼠骨密度及鈣、磷含量影響的實驗研究。方法采用胃切除術建立大鼠骨質疏松模型共60只，并將其分為5組：胃竇切除術組、胃底切除術組、全胃切除術組、空白對照組和假手術組各12只；術后6個月，應用雙能X線吸收法DEXA檢測大鼠股骨骨密度，應用全自動生化分析儀檢測鈣、磷等骨代謝生化指標，對結果進展比擬。結果與空白對照組比擬，胃切除術組大鼠股骨骨密度值顯著降低P0.05；血清堿性磷酸酶、甲狀旁腺激素、血清無機磷均升高P0.05；血清總鈣、降鈣素、骨鈣素均降低P0.05。結論胃切除術后可以顯著降低大鼠股骨的骨密度和骨礦含量，血清ALP、P升高，腸

2、鈣吸收低下，分泌減少，BGP分泌減少，分泌亢進的情況下，骨吸收明顯增強，這樣骨吸收遠遠大于骨形成，導致骨質疏松的發生?！娟P鍵詞】胃切除術；骨質疏松癥；大鼠；骨密度；鈣；磷Abstrat:bjetiveTexplretheeffetsfGastretynbneineraldensityandaliuandphsphrusinrats.ethdsThegastretyasusedtestablisharatdelfsteprsis.60ratseredividedintfivegrupsand12ineahgrup:Antralresetingrup,Gastriresetingrup,Ttalg

3、astretygrup,ntrlgrup,Sha-peratedgrup.Aftersixnths,DEXAasadptedtdetetratfeurBD,andAutatibiheialanalyzerasusedtdetetaliuandphsphrus.Resultsparedithntrlgrup,gastretyP0.05;ALP,PTH,PereinreasedP0.05;a,T,BGPeredereasedP0.05.nlusinGastretyansignifiantlyredueferalBDandBinrats，inreaseALP、P,lerintestinalabsrp

4、tinfaliuandT,BGPseretin，PTH.Keyrds:Gastrety;steprsis;Rats;BD;a;P骨質疏松癥是以骨強度下降、骨折風險性增加為特征的骨骼系統疾病,骨強度反映了骨骼的兩個主要方面,即骨礦密度和骨質量。在我國骨質疏松委員會參考世界衛生組織(H)的標準提出了骨質疏松診斷的試行標準。這個標準根據的主要手段是應用雙能X線吸收法診察。本研究通過對大鼠采用胃切除術后骨密度及鈣、磷含量變化的影響，討論繼發性骨質疏松癥的病理機制。1材料1.1動物清潔級SD大鼠60只，雄性，體質量300350g,月齡45月，由中國人民解放軍第四軍醫大學實驗動物中心提供。答應證編號：軍。

5、1.2試劑及儀器甲狀旁腺素和降鈣素放射免疫分析試劑盒均購自原子高科股份；血清骨鈣素BGP放免藥盒購自北京福瑞生物工程公司。雙能X線骨密度儀DEXA，LUNAR.PRDIGY,美國GE；全自動生化分析儀LYPUSAU2700；湘儀離心機TD5A-S；電子天平(SPS202F)；放射免疫計數器G-1200中佳光電。2方法2.1分組及手術方法成年雄性SD大鼠60只，隨機分為5組，每組12只，并記錄每只大鼠的體質量，A組為空白對照組、B組為假手術組、組為胃竇切除術組、D組為胃底切除術組、E組為全胃切除術組。2.2模型制備及取材正常適應性飼養1周后，觀察并記錄鼠毛的色澤與疏密、眼睛的色澤與靈敏性、大便和

6、大鼠的活動情況。實驗組SD大鼠禁食24h，禁水8h后，在3%戊巴比妥鈉麻醉下按無菌操作法分別行胃竇切除術組、胃底切除術D組、全胃切除術E組，假手術B組在同等手術條件下行胃體周圍局部脂肪組織切除術。術后給予青霉素80萬單位肌肉注射，0.1l/只，單籠飼養，禁食2d，禁水1d，第3天少量粉末飼料，飲水不拘，第6天正常飲食。術后飼養期間每周測量并記錄每只鼠的體質量1次，觀察并記錄鼠毛的色澤與疏密、眼睛的色澤與靈敏性、大便及大鼠的活動情況1次，術后6個月實驗到期，在3%戊巴比妥鈉麻醉下心臟采血510l，-20冰箱保存。處死大鼠，完好取出大鼠右股骨，剔凈軟組織后，用含生理鹽水容器浸泡，將股骨編號，置于-

7、80冰箱保存。2.3指標的檢測方法骨量指標的測定：測定時將標本放置于美國GE，LUNAR，PRDIGY型雙能X線骨密度儀的探頭下，應用小動物軟件進展股骨的掃描，記錄骨密度數據。骨代謝生化指標的測定：包括堿性磷酸酶、血清總鈣、無機磷的檢測，均采用全自動生化分析儀LYPUSAU2700檢測其大鼠血清；骨鈣素、甲狀旁腺激素、降鈣素的檢測，均采用放射免疫計數器G-1200檢測其大鼠血清，測得指標。2.4統計學處理應用軟件進展數據處理，實驗結果計量資料皆以s表示，主要采用單因素方差分析進展數據處理，組間兩兩比擬，采用LSD檢驗。以=0.05為檢驗標準,以P0.05為差異有顯著意義。3結果3.1胃切除術對

8、骨轉換的評價指標-骨密度的影響結果見表1。表1胃切除術對大鼠右股骨骨密度，骨礦鹽含量的影響略表1顯示,胃切除術三組與空白對照、假手術組比擬BD和B均降低，且有顯著性差異(P0.01)，而空白對照組與假手術組差異無顯著性(P0.05)，且胃竇切除術組與胃底切除術組作用相似，差異無顯著性(P0.05)。3.2胃切除術對骨代謝生化指標的影響結果見表2。表2胃切除術對骨吸收指標血清總鈣、清無機磷的影響略表2顯示,胃切除術3組a程度均低于空白對照和假手術組(P0.05)；而胃切除術3組P程度均高于空白對照和假手術組(P0.05)，且a、P指標，空白對照組與假手術組差異無顯著性(P0.05)，胃竇切除術組

9、與胃底切除術組作用相似，差異無顯著性(P0.05)。表3胃切除術對骨形成指標血清堿性磷酸酶、骨鈣素的影響略表3顯示ALP指標，胃切除術3組程度均高，于空白對照組和假手術組(P0.05)，而BGP指標：胃切除術3組程度均低于空白對照組和假手術組(P0.05)；且ALP、BGP指標空白對照組與假手術組差異無顯著性(P0.05)，胃竇切除術組與胃底切除術組作用相似，差異無顯著性(P0.05)。表4胃切除術對鈣磷代謝調節指標：甲狀旁腺激素及降鈣素的影響略表4顯示,胃切除術3組PTH程度均高于空白對照和假手術組(P0.05)；而HT指標那么胃切除術3組均低于空白對照和假手術組(P0.05)，且PTH、H

10、T指標，空白對照組與假手術組差異無顯著性(P0.05)，胃竇切除術組與胃底切除術組作用相似，差異無顯著性(P0.05)。轉貼于論文聯盟.ll.4討論骨質疏松癥steprsis，簡稱P是以骨量降低和骨組織顯微構造破壞為特征，導致骨脆性增加和易于骨折的代謝性骨病1。中醫“骨痿與現代醫學的P概念根本相似。就病因病機而言,歷代醫家多從“腎主骨，“腎藏精,主骨生髓等方面出發,認為與“腎虛有關。腎為先天之本,脾為后天之本,脾主運化,充養腎精,?素問五臟生成篇?:“腎之合骨也,其榮在發,其主脾也,假設脾虛,腎失所養,進一步可導致腎虛,從而使骨髓失養而致骨痿。P的發生是一個漸進的過程，BD的改變比骨代謝生化標

11、志物的改變要慢，血中骨代謝生化檢查能較早發現骨代謝異常，因此在P的早期診斷中具有重要價值。將BD法和骨代謝生化標志物檢測結合應用，能早期、快速地作出正確診斷，判斷療效，調整治療方案。4.1胃切除術對模型大鼠股骨骨密度、骨礦含量的影響骨密度BD是指骨骼單位面積中礦物質的含量。骨礦物含量減少即骨密度下降是骨質疏松的主要病理表現。H以骨密度測值法中“T-2.5SD為診斷骨質疏松癥的“金標準2。BD是目前診斷骨質疏松、估計骨質疏松的程度、預測脆性骨折風險和評價藥物干預療效的最正確定量指標3。對于正常骨骼形態、骨質代謝及吸收性骨病，骨吸收與骨合成的動態平衡起著決定性作用。故本實驗以骨密度作為評價模型制備

12、成功的標準。測量BD的方法多種多樣，目前對骨量或骨密度主要采用定量測量的方法，尤以雙能X線吸收法(DEXA)是目前國內、外測量的最常用方法。DEXA具有準確性高、準確度高、輻射劑量低、掃描時間短、調節穩定、重復檢查誤差小等優點。DEXA在人體骨量、骨密度測量以及骨質疏松的預防、診斷和治療過程中均起著重要的作用4，5。目前認為雙能X線吸收法(DEXA)是骨密度(BD)檢測的“金標準6。本實驗研究說明，雄性大鼠胃切除術6個月后，胃切除術組股骨BD低于空白對照組，差異顯著，尤其全胃切除術組顯著差異，說明動物模型復制成功。其機理可能是胃切除術造成胃腸營養吸收障礙，抑制成骨細胞活性，使骨形成減少，同時可

13、引起機體鈣、磷和等代謝的變化，促進骨吸收，最終導致骨代謝處于骨吸收大于骨形成的負平衡狀態，出現骨量喪失，誘發P。4.2胃切除術對骨代謝生化指標的影響4.2.1胃切除術對骨形成標志物的影響血清堿性磷酸酶ALP是最常應用的評價骨形成和骨轉換的重要的生化指標，臨床上將其作為P診斷的參考指標。骨形成時成骨細胞可分泌大量的ALP參與骨的礦化，因此，ALP活性反映骨形成的活潑程度，血清中約50%ALP來源于骨，另一半來源于肝臟。Ere等7及Lee等8研究認為，血清ALP含量隨年齡增加而增加，其變化與BGP的變化呈正相關，與骨中礦物質含量的變化呈負相關。從表3可知，與空白對照組相比，胃切除術組ALP明顯升高

14、，說明代償性骨形成增加有統計學意義(P0.05)。其主要機制可能是胃切除術對ALP的分泌具有促進作用，進而引起異常骨代謝。血清骨鈣素(BGP)又稱2羧基谷氨酸蛋白，是一種相對分子質量為52005900KD的依賴維生素K富含谷氨酸的非膠原蛋白，主要由成骨細胞產生和分泌,其生理功能是維持骨的正常礦化速度,血清BGP可作為評估骨轉換率及骨形成的特異指標9。大量研究說明，血循環中BGP濃度反映骨形成速率10。血循環中BGP含量減少或增加是成骨細胞活性變化的結果，與骨吸收無關，它反映骨代謝的瞬間變化11。Delas認為，當骨形成與骨吸收耦聯時，BGP是反映骨轉換的指標；當骨形成與骨吸收解耦聯時，BGP是

15、反映骨形成的特異性指標，可直接反映骨形成的速率。也有學者認為，完好BGP反映骨形成，BGP片段反映骨吸收，這些有待于進一步討論12。從表3可知，胃切除術組BGP明顯低于空白對照組，說明胃切除術對BGP的分泌具有抑制作用，而BGP分泌減少，說明骨形成降低，進而引發P。4.2.2胃切除術對骨吸收標志物的影響血鈣和尿鈣是反映骨吸收的主要生化指標之一，血清鈣和離子鈣對各種代謝性骨病的診斷和鑒別診斷有重要意義。從表2可知:胃切除術對血鈣的分泌具有促進作用。P的病理機制主要是血鈣程度下降，使分泌增多，它作用環磷酸腺苷使其升高，造成破骨細胞活性增強，骨吸收加速，骨鈣溶出，骨吸收超過骨形成，發生P13。而血鈣

16、的降低是由于鈣吸收的下降，鈣吸收低下是由于低鈣飲食，低維生素或低活性維生素及日照缺乏和長期臥床、高磷飲食攝入等造成。從表2可知，與空白對照組比擬，胃切除術組血清無機磷含量明顯升高。P也是反映骨吸收的主要生化指標，磷在體內的含量僅次于鈣，刺激骨釋放、。鈣離子、維生素代謝產物可促進直腸對磷的吸收。其機理可能是高磷可使細胞外液的濃度升高，使細胞內鈣濃度降低，/比率下降，尤其鈣離子濃度下降，使分泌亢進，骨吸收增加，造成骨營養不良，誘發P13。4.2.3胃切除術對骨轉換有關的鈣調激素的影響甲狀旁腺素，能增強破骨細胞活性，促進骨的吸收，使骨鈣釋放入血。還能減少近端腎小管對磷的重吸收，而增加鈣的重吸收，促進腎的活性維生素的轉化，間接促進腸鈣吸收，最終結果是血鈣濃度增加。具有調節機體骨內鈣離子濃度的功能。而合成和分泌與血鈣離子濃度呈負反應機制，即鈣離子濃度降低，刺激分泌增加。從表4可知:胃切除術對的分泌具有促進作用。分泌增加使骨鈣溶出，血鈣增加，骨吸收作用增強，骨量減少，導致P13。從表4可知，與空白對照組比擬，胃切除術組明顯降低。其機理可能是胃切除術對的分泌具有抑制作用，而既能抑制破骨細胞的活性，阻礙骨吸收，又能抑制和活性維生素D的活性，降低血鈣濃度，從而導致P13?？傊?，本實