1、單基因性繼發(fā)性高血壓的基因診斷瑞金醫(yī)院高血壓科 上海市高血壓研究所朱鼎良單基因性繼發(fā)性高血壓糖皮質(zhì)激素抑制性醛固酮增多癥（GRH）表征性鹽皮質(zhì)激素增多癥（AME）11羥化酶缺乏癥17羥化酶缺乏綜合征Liddle 綜合征Gordon 綜合征孤立型嗜鉻細(xì)胞瘤II A 型多發(fā)性內(nèi)分泌瘤II B 型多發(fā)性內(nèi)分泌瘤Von Hippel-Lindau綜合征 I 型神經(jīng)纖維瘤高血壓伴短指畸形糖皮質(zhì)激素抑制性醛固酮增多癥表征性鹽皮質(zhì)激素增多癥17羥化酶缺乏綜合征11 羥化酶缺乏癥Liddle 綜合征II A 型多發(fā)性內(nèi)分泌瘤II B 型多發(fā)性內(nèi)分泌瘤I 型神經(jīng)纖維瘤Von Hippel-Lindau 綜合征G

2、ordon綜合征CYP11B1/CYP11B2HSD11B2CYP17CYP11B1 SCNN1B, SCNN1GRET proto-oncogeneRET proto-oncogene NF1gene VHL tumour suppressor geneWNK1、WNK4致病基因（單基因性繼發(fā)性高血壓） 單基因性繼發(fā)性高血壓基因診斷（國(guó)內(nèi)） 病名 Liddle 綜合征IIa型多發(fā)性內(nèi)分泌瘤糖皮質(zhì)激素抑制性醛固酮增多癥*Gordon綜合征單位高研所、北醫(yī)高研所內(nèi)研所 高研所 歷史 (Liddle 綜合征) 1963 Liddle 首例報(bào)道1994 Shimkets 腎上皮鈉通道亞單位 基因突變

3、 1995 Hansson 腎上皮鈉通道亞單位 基因突變特征 (Liddle綜合征) 遺傳 臨床表現(xiàn) 常染色體顯性遺傳病 （16p)腎上皮鈉通道（ENaC) 基因突變高血壓低醛固酮低血鉀 低血漿腎素活性（PRA） Liddle 綜合征家系-1Liddle綜合征家系先證者的臨床特征 男, 25 歲 18 歲發(fā)生高血壓 血壓：230/140 mmHg 血鉀: 2.7mmol/L 高血壓家族史: 母、兄弟、侄女 Liddle綜合征家系先證者的臨床特征低PRA: 0 ng/ml/h (0.1-5.5)低尿醛固酮 ：0.7 ug/24h (3.4-12.7)聯(lián)合用降壓藥無(wú)效安替舒通治療無(wú)效氨苯喋啶（tr

4、iamterene）治療和低鈉飲食后高血壓和低血鉀明顯改善 1985年住院資料氨苯喋啶和低鈉治療前后血壓和生化指標(biāo)改變 血壓 血鉀 尿ald (mmHg) (mmol/L) (ug/24h) 治療前 230/140 2.7 0.7 治療后 110/84 4.2 6.4 Liddle家系一級(jí)親屬的臨床及生化檢查 病人 血壓 年齡 發(fā)病年齡 (歲) (mmHg) (歲) 高血壓 卒中-1 130/8076-1* 120/80 46 33 43-3* 126/9241 18 32-5* 138/106 37 18-7* 144/108 31 14 23-2* 160/120 24 15-3 105/

5、7521-4 110/8015-5 98/78 9病人 PRA 血漿 alt. 尿 ald 血鉀 尿鉀 (ng/ml /h) (ng/ml / h) (ng/dl) (mmol/l) (mmol/l) -1 4.03-1* 1.02 7.4 3.5 3.52 46.6-3* 1.24 10.1 1.3 3.54 40.4-5* 1.08 9.6 0.4 4.07 22.1-7* 0.77 7.7 2.7 3.37 42.0-2* 0 2.1 0.4 3.64 55.7-3 3.80-4 4.25-5 4.06Liddle家系一級(jí)親屬的臨床及生化檢查基因診斷方法 (Liddle綜合征) 制備基因

6、組DNA 從外周血（5-10ml）白細(xì)胞中抽提DNADNA 直接測(cè)序 PCR 擴(kuò)增 ENaC 513-638密碼子 和 ENaC 524-631密碼子 PCR純化產(chǎn)物用 ABI 377 測(cè)序儀進(jìn)行序列分析基因診斷結(jié)果 (Liddle綜合征家系-1) 5名家系成員 (II-1,3,5,7, III-2)， ENaC基因616密碼子存在CCC - CTC (pro-Leu)的錯(cuò)義突變 先證者父親(I-1)和其他年青子女 (III-3,4,5)未檢出這一突變Liddle家系成員 ENaC基因序列分析 II-1 II-3 II-5 II-7CCC-CTCP616L已報(bào)道的Liddle綜合征ENaC基因

7、的致病突變 亞單位 密碼子 堿基改變 蛋白改變 564 CGA-TGA Arg-stop codon 582 deletion stop codon 589 CAG-TGA Gln-stop codon 592 ACG-ACCG Thr-frame shift 594 CCC-CCCC Pro-frame shift 615 CCC-TCC Pro-Ser 616 CCC-CTC Pro-Leu 616 CCC-TCC Pro-Ser 618 CTA-TTA Tyr-His 574 TGG-TGA Trp-stop codon Liddle 綜合征家系-2基因診斷結(jié)果 (Liddle綜合征家系

8、-2) 3名家系成員 (II-5, III-1,4)， ENaC基因616密碼子存在CCC - TCC （pro-Ser) 的錯(cuò)義突變 其他家系成員 (II-2,3,4,6,7,8, III-2,3)未檢出這一突變基因診斷結(jié)果 (Liddle綜合征家系-2) 3名CCC-TCC突變者同時(shí)存在632密碼子的GAC-CAC（Asp-His)變異 150名無(wú)關(guān)個(gè)體測(cè)序未發(fā)GAC-CAC變異，證明這是一種突變。該突變與Liddle 綜合征發(fā)病間關(guān)系有待研究Liddle 家系-2的 P616S突變 (CCC - TCC, Pro - Ser)Liddle 家系-2 D632H 突變(GAC - CAC,

9、 Asp - His)ENaC 亞單位 ENaCNH2COOH subunit突變位點(diǎn)Nedd 4 結(jié)合部位II型多內(nèi)分泌腺瘤（MEN-II) MEN- IIa型：甲狀腺髓樣癌（MTC）、甲狀旁腺腺瘤或增生、嗜鉻細(xì)胞瘤 MEN- IIb型：MTC、嗜鉻細(xì)胞瘤、粘膜神經(jīng)節(jié)瘤、馬凡氏體型II型多內(nèi)分泌腺瘤（MEN-II) Sipple 1961年報(bào)道第一例 MEN-II a型（瑞金1998，2002） MEN-II b型（瑞金2002）多內(nèi)分泌腺瘤病IIa型家系圖MEN-II a 家系先證者（III-2） 女、51歲、“血壓升高7年、陣發(fā)性心悸、多汗2年”、 97年入院、160/100 mm Hg B 超：雙側(cè)甲狀腺實(shí)質(zhì)性腫塊、雙側(cè)腎上腺多發(fā)性占位 性病變 CT：雙側(cè)甲狀腺占位性病變、雙側(cè)腎上腺占位性病變 甲狀腺及頸前淋巴結(jié)穿刺：甲狀腺髓樣癌、頸前淋巴轉(zhuǎn)移