1、6.1 概述 6.1.1 吸光光度法特點 6.1.2 光吸取基本定律（重點） 6.1.3 比色法和吸光光度法及其儀器6.2 光度分析法設計 6.2.1 顯色反應 6.2.2 顯色條件選擇（難點） 第六章 吸光光度法1第1頁第1頁 6.2.3 測量波長和吸光度范圍選擇 6.2.4 參比溶液選擇 2第2頁第2頁6.1 概述 6.1.1 吸光光度法特點 吸光光度法是基于被測物質對光含有選擇性吸取特性而建立起來分析辦法。 3第3頁第3頁 當一束光照射到某物質溶液時，物質對光吸取含有選擇性，只有當照射光光子能量與被照射物質分子、原子或離子由基態到激發態之間能量之差相等時，這個波長光才被吸取。 4第4頁第

2、4頁1 光基本性質光電磁波性質10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm可 見 光微波射線紫外光紅外光x射線無線電波5第5頁第5頁波動性粒子性 E光折射光衍射光偏振光干涉光電效應光波粒二象性h:Plank常數6.62510236第6頁第6頁單色光、復合光、光互補單色光復合光光互補單一波長光由不同波長光組合而成光若兩種不同顏色單色光按一定強度百分比混合得到白光.7第7頁第7頁2 物質對光吸取E2E0E1E3S3S2S1S0h物質對光吸取滿足Plank 條件8第8頁第8頁3 光吸取曲線或吸取光譜曲線 將不同波長光照射某一固定濃度和液層

3、厚度溶液，并測量每一波長下溶液對光吸取程度（吸光度），以吸光度為縱坐標，對應波長為橫坐標，所得曲線，稱為吸取曲線。 吸取曲線是吸光光度法選擇測定波長主要依據。9第9頁第9頁525Cr2O72-350400500600700350MnO4-1.00.80.60.40.2 A圖為高錳酸鉀和重鉻酸鉀吸取曲線。10第10頁第10頁4 物質對光選擇吸取 物質電子結構不同，所能吸取光波長也不同，顯示顏色也不同，這就組成了物質對光選擇吸取基礎。例：A 物質1 ev = 1.610-19 J.11第11頁第11頁B 物質同理，得：12第12頁第12頁ABAAC增大定性分析與定量分析定性分析基礎定量分析基礎物質

4、對光選擇吸取在一定試驗條件下，物質對光吸取與物質濃度成正比。13第13頁第13頁6.1.2 光吸取基本定律透光率 （透射比）透光率定義：T 取值為0.0 % 100.0 %所有吸取所有透射入射光強度I0透射光強度It14第14頁第14頁A=lg(I0/It)= lg1/T = kbc吸光度介質厚度(cm)透光率k 吸光系數 ，當c單位用molL-1表示時， A bc，K用表示.稱為摩爾吸取系數，L mol 1 cm -1，當c單位用gL-1表示時，K用a表示， Aabc15第15頁第15頁吸光度 與透光率1.00.50ACA100500T %TT = 0.0 %A = T = 100.0 %A

5、 = 0.016第16頁第16頁吸取定律與吸取光譜關系AC吸取定律A吸取光譜AC三維譜圖17第17頁第17頁 S 值表示 單位截面積光程 測得吸光度為 0.001 時，每mL 溶液中待測物質微克數。單位為 g .cm-2。Sandell 靈敏度 SSandell 靈敏度與 關系18第18頁第18頁6.1.3 比色法和吸光光度法及其儀器1 目視比色法 用眼睛觀測、比較溶液顏色深度以擬定物質含量辦法稱為目視比色法。19第19頁第19頁特點利用自然光比較吸取光互補色光準確度低不可分辨多組分辦法簡便，靈敏度高原則系列未知樣品20第20頁第20頁2 吸光光度法 吸光光度法是借助分光光度計來測量一系列原則

6、溶液吸光度，繪制原則曲線，然后依據被測試液吸光度，從原則曲線上求得被測物質濃度或含量。 吸光光度法是有色溶液對某一波長吸取情況，而目視比色法是比較透過光強度。21第21頁第21頁3 分光光度計原理0.575光源單色器吸取池比色皿檢測器顯示22第22頁第22頁光源：發出所需波長范圍內連續光 譜，有足夠光強度,穩定。可見光區：鎢燈，碘鎢燈(3202500nm)紫外區： 氫燈，氘燈(180375nm)單色器：將光源發出連續光譜分解為單色光裝置。棱鏡:玻璃3503200nm, 石英1854000nm23第23頁第23頁光柵: 波長范圍寬, 色散均勻,分辨性能好, 使用以便吸取池：(比色皿)用于盛待測及

7、參比溶液。可見光區：光學玻璃池紫外區：石英池24第24頁第24頁檢測器：利用光電效應，將光能轉換成 電流信號。光電池，光電管，光電倍增管顯示器： 低檔儀器：刻度顯示 中高檔儀器：數字顯示，自動掃描統計25第25頁第25頁26第26頁第26頁要點：1、Plank 條件2、物質電子結構不同，所能吸取光波長也不同，這就組成了物質對光選擇吸取基礎。3、在一定試驗條件下，物質對光吸取與物質濃度成正比。27第27頁第27頁6.2 光度分析法設計6.2.1 顯色反應（詳細內容，自己閱讀） 用光度分析法測定某物質時，假如待測物質本身有較深顏色，就能夠進行直接測定。 但大多數待測物質是無色或很淺顏色，就需要選擇

8、適當試劑與被測離子反應生成有色化合物再進行測定。28第28頁第28頁6.2.2 顯色條件選擇溶液酸度顯色劑用量顯色反應時間顯色反應溫度溶劑共存離子影響29第29頁第29頁6.2.3 測量波長和吸光度范圍選擇無干擾：選擇maxA波長選擇有干擾：吸取度最大，干擾最小A30第30頁第30頁吸光度范圍選擇 A=0.20.86.2.4 參比溶液選擇 參比溶液：將不含待測離子溶液或試劑加入一比色皿中，試液放入另一比色皿中，再調整儀器，使不含待測離子溶液處于T=100%處，此種溶液為參比溶液。31第31頁第31頁選擇原則：扣除非待測組分吸取A （試樣） = A （待測吸光物質） + A （干擾）+ A （池）A （參比） = A （干擾）+ A （池）以顯色反應為