1、NQO1基因多態性與食管癌易感性的病例比擬研究周美麗，陳華芳，史習舜，周紫荊，李國梁，潘培川，陳子龍，吳清波【摘要】目的研究NQ1基因多態性與食管癌易感性的干系。要領接納1：2配對的病例比擬研究，運用PR,RFLP技能檢測NQ1基因609T多態性。效果NQ1609、T和TT各基因型在病例組中的頻度別離為27.1、43.7和29.2%，在比擬組別離為32.8、50.0和17.2，兩組間的漫衍差異有統計學意義。攜帶NQ1609TT基因型的個別患食管癌的風險高于攜帶609或609T基因型者R=2.019，95I=1.1123.663。吃蔥蒜與NQ1基因型TT之間存在次相乘模子的交互作用(R=9.84

2、9，95I=3.73325.985)；飲燙茶與NQ1TT傷害基因型之間存在次相乘模子的交互作用(R=4.847，95I=1.81712.929)。結論NQ1609TT基因型是食管癌的傷害因素之一；609TT基因型食管癌產生風險的作用有顯著的放大效應。【關鍵詞】食管腫瘤病例比擬研究NQ1基因多態性交互作用Aase,ntrlStudynthePlyrphissfNQ1andSuseptibilityfEsphagealanerKeyrds:esphagealneplass;ase,ntrlstudy;NQ1geneplyrphiss;interatin代謝酶基因多態性是差異個別代謝酶活性差異的重要

3、緣故原由，從而影響個別患癌的易感性。依靠復原型輔酶/：醌氧化復原酶(NQ1)又稱D,硫辛酰胺脫氫酶，催化醌類及其衍生物產生復原反響轉化為氫醌，為人體內一種緊張的相反響酶。而醌是一類在天然界中普及存在的有毒化合物，能誘發哺乳動物細胞癌變和壞死。研究創造NQ1存在多態性，即609T，這個變異使酶活性明顯低落。我們以福建省食管癌高發區安溪縣為研究現場，在舉行環境因素視察研究的同時，對NQ1基因多態性與食管癌的干系舉行了探究，并結合安溪高發區的環境傷害因素對基因與環境的交互作用舉行了開端闡發。1質料與要領1.1研究工具病例組為2022年11月至2022年8月間，經安溪縣病院內窺鏡及病理診斷確診為食管癌

4、的新發病例，剔除年事75歲及體質衰弱者。比擬組按12配對，選擇與病例居住同一墟落、無血緣干系、同民族、同性別、年事相差3歲以內的同期同院的非腫瘤患者如心腦血管疾并外傷等患者為比擬。病例和比擬均為安溪縣住民，并為本地常住戶口(20年以上)。1.2視察要領及內容接納同一體例的視察表，由顛末培訓稽核及格的視察員直接扣問每名研究工具后填寫。視察內容重要有：一樣平常環境、一樣平常生存舉動風俗如吸煙、飲酒、飲茶等、飲食風俗、飲食布局、居住史、家庭消耗環境，消化體系疾病史及食管癌家屬史等。1.3NQ1基因多態性的檢測運用聚合酶鏈反響限定性片斷長度多態性PR,RFLP技能檢測研究工具的NQ1609T基因型。抽

5、取各研究工具外周血5l，置于一次性生化采血管中，離心分層，分裝上層血清和下層血凝塊，置于低溫冰箱70保存。接納通例高鹽沉淀法提取基因組DNA1。(1)引物序列為：PrierF：5,AAGAGAAATTT,3，PrierR：5,GGTTTTTATTT,3，由上海博亞生物技能合成。(2)PR擴增反響體系：反響總體積為25l，此中含10PRbuffer2.5l，1.5l/Lgl2，200l/LdNTPs，引物F、R各0.2l/L，TaqDNA聚合酶BI產物1.5U，基因組DNA80ng100ng。(3)PR循環參數：95預變性5in，然后94變性30s、56復性30s、72延伸45s，35個循環后，

6、72延伸10in。酶切體系為20l，包羅：10buffer2l，Hinf內切酶NEB產物0.5l5U，超純水7.5l，PR擴增產物10l。酶切反響條件為：37水浴6h。酶切產物用2瓊脂糖凝膠含溴化乙錠、電壓90V電泳1h。NQ1基因型的斷定：酶切片斷僅195bp者為純合野生基因型；195bp、119bp和76bp者為雜合基因型T；119bp和76bp者為純合突變基因型TT見圖1。1.4統計闡發要領全部數據接納SPSS12.0軟件創立數據庫。運用2查驗比力NQ1基因頻率的Hardy,Einberg遺傳平衡查驗，NQ1609T基因在病例組和比擬組漫衍的特點和差異。運用叉生闡發的原理不雅察NQ160

7、9T基因型、環境因素、遺傳因素之間的交互作用。參照文獻3的要領評價交互作用：多因素Lgisti回歸模子中包羅單獨遺傳因素、單獨環境因素和兩因素配合構成變量的效應，g、e和eg別離為三者的回歸系數，也即Rg、Re和Reg的天然對數。交互作用系數eg/e，1，表現遺傳因素對環境表露效應有放大作用；1，表現遺傳因素對環境表露效應有削弱作用；1，那么兩者沒有交互作用。當RegReRg為交互作用的相乘模子；RegReRg為交互作用的的超相乘模子；RegReRg為交互作用的次相乘模子；RegReRg-1時，那么為相加模子。2效果2.1病例組和比擬組一樣平常特性的形貌本次研究按12配對，共有96對完成了問卷

8、視察和實行室檢測，此中男性58對60.42，女性38對39.58，性別比為1.531。食管癌病例組和比擬組在性別、年事、經濟狀態及文化程度等方面的漫衍差異無統計學意義，但職業漫衍差異有統計學意義，與比擬組比擬，食管癌患者以農夫為主，文盲所占比重較高見表1。2.2NQ1基因型頻率及遺傳平衡查驗食管癌病例組和比擬組NQ1基因型漫衍及等位基因頻率見表2、3、4。NQ1609、T和TT各基因型在病例組中的漫衍別離為27.1、43.7和29.2%，在比擬組中的漫衍別離為32.8、50.0和17.2，表白NQ1各基因型在病例組和比擬組的漫衍差異有統計學意義23.966，P0.046。與609和609T基因

9、型比擬，609TT基因型與食管癌的產生有明顯性關聯，在年事、性別和住址等因素調解后R2.019，95I=1.1123.663。病例組與比擬組609T等位基因頻率別離為51.0和42.0，兩組間的差異有統計學意義2=4.052，P=0.044。2.3NQ1基因多態性與各傷害因素的交互作用的闡發別離闡發NQ1609、T、TT基因型及傷害基因型TT與食管癌產生相干傷害因素的交互作用。經年事、性別、居住地、經濟狀態及文化程度等因素調解后，僅創造TT基因型與不吃蔥蒜之間存在交互作用見表5。未創造NQ1基因多態性與飲酒、高鹽飲食、食用紅薯干、食管癌家屬史及食用奇怪蔬菜之間存在交互作用。與食用蔥蒜史之間交互

10、作用闡發效果表現，在TT基因型存在時，不吃蔥蒜者患食管癌的風險增大，R值為9.849，而吃蔥蒜者R值落至2.739，TT基因型與不吃蔥蒜存在次相乘模子的交互作用表5。2.4飲烏龍茶與食管癌的干系本次研究創造飲燙茶的人群R5.749較飲溫茶或涼茶的人群R0.252更易患食管癌，而且茶葉質量越好患食管癌的風險越低R0.210,95%I:0.0840.529。交互作用闡發中創造喝燙茶與NQ1基因多態性及食管癌家屬史之間存在明顯的交互作用，效果見表6、7。表6表現，單獨表露于飲燙茶的預計相對傷害性Re為3.478，當同時攜帶NQ1TT傷害基因型時，其Reg值升至4.847，增長了表露于飲燙茶的傷害效應

11、，兩者的交互作用切合次相乘模子。而食管癌家屬史與飲燙茶之間的交互作用為超相乘效應，同時表露于食管癌家屬史和飲燙茶者產生食管癌的風險R8.396顯著高于單獨表露于食管癌家屬史者R1.874或飲燙茶者R2.584見表7。3討論NQ1，即NAD(P)H：醌氧化復原酶，是體內一種緊張的相反響酶。NQ1以NAD(P)H為受體，可將NADH或NADPH的電子通報給醌類及其衍生物，產生雙電子復原反響，天生低毒的氫醌類化合物，其催化特性在于無單電子復原產物半醌及自由基等氧化產物形成，制止了對細胞的損傷，低落具有致癌性和致畸性的醌類化合物的危害4。NQ1與其他、相代謝酶一起構成了體內對外源致癌物質的代謝網絡，在

12、機體的解毒代謝中發揮著緊張作用。在正凡人群中,該酶的活性存在差異。20世紀90年代初期，有研究創造NQ1基因DNA609位點上存在/T間單核苷酸多態性，大概改變了酶的二級布局，使酶的活性低落，增長了氧自由基的天生5，6。純合野生基因型具有完全的NQ1酶活性,雜合基因型T的酶活性較純合野生型低落3倍，純合突變基因型TT的酶活性那么完全喪失7，8。因此，NQ1缺陷可低落細胞解毒致癌物的本領，從而影響細胞代謝途徑，增長致癌物負荷并能導致某些易感個別惡性變。由于NQ1在醌類化合物的解毒歷程中起著很緊張的作用，以是它的基因多態性日益受到人們的器重。經研究創造NQ1多態性與大腸癌9、肺癌10、白血病11，

13、12等有明顯相干性。交互作用闡發效果表白：不吃蔥蒜與NQ1TT基因型之間的交互作用切合次相乘模子，這與蔥蒜此中所含化合物對機體氧化復原代謝酶系的誘導作用有關。本次研究未創造食管癌家屬史與NQ1基因之間存在交互作用，但是在同時表露于食管癌家屬史和TT傷害基因型產生食管癌的風險會高于單獨表露于這兩個傷害因素者。而ZhangJ等研究創造，在中國人群中，表露于上消化道腫瘤家屬史者會增長產生食管癌的風險R2.18，95%I=1.144.1713，提示攜帶NQ1純合突變基因型造成的NQ1酶活性的缺乏大概為家屬中上消化道腫瘤聚攏的遺傳機制之一。這些效果均進一步說明白食管癌的產生是環境因素和遺傳因素彼此作用的

14、效果。如今已有大量的研究資料表白飲茶對食管癌具有庇護作用，這重要與茶葉中含有的茶多酚、茶色素、L,茶氨酸有關，這些物質具有抗氧化作用，可以掃除體內的氧自由基，按捺生物大分子DNA、卵白質等的氧化損傷14。實行效果創造無論是綠茶照舊紅茶都可在甲基芐基亞硝胺(NBzA)和甲基烷基亞硝胺(ANA)的動物模子中淘汰鼠的腫瘤產生15。本次研究創造飲用質量好的烏龍茶是食管癌的庇護因素，而飲燙茶是食管癌的傷害因素，這大概與安溪縣是烏龍茶的重要產地，本地住民飲茶征象比力普及，但是差異經濟程度的人群飲用茶葉的質量差異，而茶葉質量越好，其含有的有用身分較一樣平常茶葉多，而含有較少的有害物質，從而低落食管癌的發病風

15、險。飲燙茶在本地是住民飲茶的一個普及風俗，已有實行證明70以上燙食對食管黏膜上皮細胞的增殖周期會產生嚴峻影響，而且為細胞在有害代謝產物作用下產生癌變制造了有利條件16。這也是國表里大量盛行病學研究效果同等證明了熱刺激是食管癌發病因素之一的根據。因此不良的飲茶風俗可以低落飲茶的庇護作用，這是致癌或抗癌因素的稠濁與交互作用的效果。飲茶風俗與基因、遺傳因素的交互作用闡發表現：飲燙茶與NQ1TT傷害基因型之間存在次相乘效應的交互作用，而食管癌家屬史與飲燙茶之間的交互作用為超相乘效應，同時表露于食管癌家屬史和飲燙茶者產生食管癌的風險R8.396顯著高于單獨表露于食管癌家屬史R1.874或飲燙茶者R2.5

16、84。綜上所述，NQ1基因609T多態性大概是安溪縣食管癌高發的傷害因素之一，TT基因型是食管癌的傷害基因型，其與多種環境因素之間存在交互作用，從而加強或削弱了它對食管癌的傷害效應。在人群防治食管癌歷程中，應思量到易感基因與環境因素的交互作用，綜合闡發多種代謝酶之間的協同作用，從而有針對性地舉行舉動干預和化學防范，以低落食管癌的發病風險。【參考文獻】1SalazarLA,HirataH,avalliSA,etal.ptiizedpredurefrDNAislatinfrfreshandrypreservedlttedhuanbldusefulinlinialleulartestingJ.lin

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