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文檔簡介

1、植物組織培養之培養基設計主要是參考分析植物體養分而來，但須注意的是，試管培養之培殖體 吸收養分的途徑和栽植在土讓利用根系吸收養分之機制有所不同。在早期組織培養試驗顯示氮、 磷、鉀、鈣、鎂及硫為細胞正常生長之重要元素，上述之養分稱為巨量元素，癒合組織培養通常 需要較高濃度巨量元素，而根之培養度濃度則需降低。在木本植物組織培養中最常使用之培養基為MS培養基，或將MS培養基修飾呈不同濃度層級,但在針葉樹培養， MS培養基則較少使用。培養基是否適於培養特定植物或誘導植物之型態發 展，其關鍵在於培養基之離子強度、總氮含量、硝酸態氮與銨態氮之比、鈣離子及培殖體是否對 氯離子敏感。當培養之樹種尚無研究資料時

2、，一般建議先使用養分濃度較低之培養基，如此可使培殖體之死亡 率降低，後序之培養如有需要可逐漸提高養分濃度。培養基之養分濃度隨培養時間改變，有些元素養分消耗很快，養分元素消耗之情形主要和物種及 培殖體種類有關。當培殖體生長迅速時，頻繁之繼代培養可保持培養基之養分維持在最低底線 上，尤其是使用低養分濃度之培養基更需時常繼代培養。組織培養之培養基組成份可分成三大類，即巨量元素(Macroelements)、微量元素(Microelements)及維生素(Vitamins)。以本實驗室最常使用之培養基MS及 WPM 為例,其組成份如下。MSWPMMacronutrients in mg/LNH4NO3

3、1650400CaCl 2? 2H2O44096MgSO4? 7H2O370370KNO 31900-KH 2PO4170170Ca(NO 3)2? 4H2O-556K2SO4990Micronutrients in mg/LH3BO36.26.2CoCl 2? 6H2O0.025-CuSO4? 5H2O0.0250.25Na2EDTA37.2537.25FeS04 ? 7H2O27.8527.85MnSO 4? 4H2O22.322.3KI0.83-Na2MoO4? 2H2O0.250.25ZnSO 4? 7H2O8.68.6Vitamins in mg/LMy-i no sitol100100Glyc ine2.020Nicoti nic acid0.50.5Pyridoxi ne-HCl0.50.5Thiami n-HCl0.11.0培養液通常先配成數瓶貯存液(Stock solution )存放4 °C冰箱，待要配製培養基時才進行稀釋,配貯存液時許要注意幾點：i高濃度鈣離子與硫酸鹽離子及磷酸鹽離子會形成不

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