1、一緒論臨床檢驗(yàn)技術(shù)技術(shù)分類：臨床化學(xué)檢驗(yàn)分析技術(shù)（包括自動生化分析、干化學(xué)分析、血?dú)夥治觥㈦娊赓|(zhì)分析、電泳分析）臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)分析技術(shù)臨床血液學(xué)檢驗(yàn)和尿液檢驗(yàn)分析技術(shù)（血細(xì)胞分析、血液凝固分析、血液流變分析、流式細(xì)胞分析、血紅細(xì)胞沉降分析和尿液分析）臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)分析技術(shù)臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)分析技術(shù)二血細(xì)胞分析技術(shù)血液由血漿（55%）和血細(xì)胞（45%）組成。（填空題）所謂血細(xì)胞計(jì)數(shù)主要是指計(jì)數(shù)單位容積中紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的個(gè)數(shù)。（填空題）白細(xì)胞被稱為人體衛(wèi)士，它可以防止外來微生物的侵害及其他感染。血細(xì)胞計(jì)數(shù)有變阻脈沖法（簡稱變阻法）、光電計(jì)數(shù)法和激光計(jì)數(shù)法。（大題）變阻法血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：血

2、細(xì)胞是電的不良導(dǎo)體，將血細(xì)胞置于電解液中，由于細(xì)胞很小，一般不會影響電解液的導(dǎo)通程度。但是如果構(gòu)成電路的某一小段電解液截面很小，其尺度可與細(xì)胞直徑相比擬，那么當(dāng)有細(xì)胞浮游到此時(shí)，將明顯增大整段電解液的等效電阻。如果該電解液外接恒流源(不論負(fù)載阻值如何改變，均提供恒定不變的電流)，則此時(shí)電解液中兩極間的電壓是增大的，產(chǎn)生的電壓脈沖信號與血細(xì)胞的電阻率成正比。如果控制定量溶有血細(xì)胞的電解溶液，使其從小截面通過，也即使血細(xì)胞順序通過小截面，則可得到一連串脈沖，對這些脈沖計(jì)數(shù)，就可求得血細(xì)胞數(shù)量。由于各種血細(xì)胞直徑不同，所以其電阻率也不同，所測得的脈沖幅度也不同，根據(jù)這一特點(diǎn)就可以對各種血細(xì)胞進(jìn)行分類

3、計(jì)數(shù)。這就是變阻脈沖法原理。（填空題）變阻脈沖法計(jì)數(shù)在大多數(shù)細(xì)胞計(jì)數(shù)器中是利用小孔管換能器裝置實(shí)現(xiàn)的。（填空題）脈沖的個(gè)數(shù)與通過小孔的細(xì)胞個(gè)數(shù)相當(dāng)，脈沖的幅度與細(xì)胞體積成正比。脈沖信號經(jīng)過下列步驟得出細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果：放大，閾值調(diào)節(jié)，甄別，整形。（填空題）體積不同的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板，其產(chǎn)生的脈沖幅度也不同，排列序列以白細(xì)胞最大，紅細(xì)胞次之，血小板最小。（簡答）什么叫細(xì)胞直方圖：以體積為橫坐標(biāo)，以細(xì)胞的相對數(shù)量為縱坐標(biāo)。把細(xì)胞在一個(gè)個(gè)很小的體積范圍（小于2fld，又稱通道，頻道）內(nèi)的數(shù)量分布情況表達(dá)出來，我們稱之為直方圖。紅細(xì)胞直方圖（顯示范圍從24360fl）血小板直方圖（顯示范圍036fl

4、）白細(xì)胞直方圖（顯示范圍是30450fl，在直方圖上表現(xiàn)為3個(gè)白細(xì)胞亞群，3590fl范圍的淋巴細(xì)胞群，可以包括淋巴細(xì)胞，91160fl范圍的單個(gè)核細(xì)胞群，可以包括單核細(xì)胞、幼稚細(xì)胞，161450fl范圍的粒細(xì)胞群，可以包括嗜酸性細(xì)胞、嗜堿性細(xì)胞、中性粒細(xì)胞。）白細(xì)胞直方圖除顯示分類外，還顯示4個(gè)報(bào)警區(qū)域，如果某個(gè)報(bào)警區(qū)域里的計(jì)數(shù)值異常增多，就在此區(qū)域出現(xiàn)R報(bào)警，R1為直方圖上淋巴峰左側(cè)區(qū)域有異常，可能有血小板凝塊、巨大血小板、有核紅細(xì)胞、不溶性紅細(xì)胞和冷凝集素等因素的影響，R2為直方圖上淋巴峰和單和峰之間的區(qū)域有異常，可能有異型淋巴細(xì)胞、幼稚淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞或嗜堿性細(xì)胞等因素的影

5、響，R3為直方圖上核峰和中性粒峰之間的區(qū)域有異常有不成熟粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等因素的影響，R4為直方圖上中性粒峰右側(cè)區(qū)域有異常，粒細(xì)胞數(shù)量過多，Rm為以上區(qū)域2個(gè)或2個(gè)以上同時(shí)有異常。存在著2個(gè)以上的細(xì)胞同時(shí)通過細(xì)孔的現(xiàn)象稱為重合現(xiàn)象。為了在物理上最大限度地減少重合現(xiàn)象，開發(fā)出了鞘流法，具體方法為：具體做法是用一毛細(xì)管對準(zhǔn)小孔管,細(xì)胞混懸液從毛細(xì)管噴出,同時(shí)與四周流出的鞘液一起流過敏感區(qū),保證細(xì)胞混懸液在中間形成單個(gè)排列的細(xì)胞液,四周被鞘液圍繞.鞘流技術(shù)可應(yīng)用于兩種細(xì)胞計(jì)數(shù)原理:一為電阻抗原理,鞘流通過小孔的敏感區(qū)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),另一種為激光計(jì)數(shù)原理,細(xì)胞液流室較長,與激光垂直相交,激光光束對流

6、經(jīng)的每一個(gè)細(xì)胞照射后產(chǎn)生光散射,利用此原理進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。（大題）為控制細(xì)胞通過小孔時(shí)的精密度，除采用鞘流技術(shù)外，各廠家還采用了一系列相關(guān)技術(shù)：脈沖編輯，高精度體積分析，掃流技術(shù)，防反流裝置VonBehrens感應(yīng)器，延時(shí)計(jì)數(shù)。定量裝置中的特殊部件主要有負(fù)壓泵、壓力調(diào)節(jié)器、廢液瓶等。（大題）白細(xì)胞分類技術(shù)：1.容量、電導(dǎo)、光散射法(VCS)體積（V）：測量使用的是電阻抗原理。電導(dǎo)法（C）：根據(jù)細(xì)胞壁能產(chǎn)生高頻電流的性能采用高頻電磁探針，測量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)、細(xì)胞核和細(xì)胞漿的比例以及細(xì)胞內(nèi)質(zhì)粒的大小和密度。光散射（S）：是根據(jù)細(xì)胞表面光散射的特點(diǎn)提供了注重細(xì)胞類型的鑒別方式，來自激光光源的單色光束直接

7、進(jìn)入計(jì)數(shù)池的敏感區(qū)，在1070時(shí)對每一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行掃描分析，提供了細(xì)胞結(jié)構(gòu)，形態(tài)的光散射信息。2.阻抗與射頻聯(lián)合法：此類儀器白細(xì)胞分類通過三個(gè)不同檢測系統(tǒng)完成.a嗜酸性細(xì)胞檢測系統(tǒng)b嗜堿性細(xì)胞檢測系統(tǒng)c淋巴、單核、粒細(xì)胞（中性、嗜堿性、嗜酸性）檢測系統(tǒng)3.光散射與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合法4.多角度偏振光散射技術(shù)。測量正常標(biāo)本時(shí)，可以從這4個(gè)角度（0、10、90垂直光散射對白細(xì)胞進(jìn)行測量。同一種特定的程序自動存儲和分析數(shù)據(jù)，將白細(xì)胞分為嗜酸性粒、中性粒、嗜堿性粒、淋巴和單核五種。（大題）血紅蛋白測量原理：血紅蛋白的單位是g100m1(新制是gL)，臨床檢驗(yàn)時(shí)因難以從血液中將其分離出來而采用相對比色法進(jìn)行

8、間接測量。用溶血劑將經(jīng)過稀釋的血液中的紅細(xì)胞破壞，血紅蛋白便溶解出來，再加入轉(zhuǎn)化試劑進(jìn)而轉(zhuǎn)化為顏色穩(wěn)定的氰化血紅蛋白。血紅蛋白含量越高，它的顏色就越深，透光性就越差(或吸光性越強(qiáng))。用光電器件檢測透射光強(qiáng)度，并與已定標(biāo)的血紅蛋白值相比較，即可得出血紅蛋白含量。常用的光路系統(tǒng)為了防止光散射和外來光干擾，均采用雙波長法測量。在血液樣品中加入氰化鉀，將生成氰化血紅蛋白，這是一種顏色很穩(wěn)定的物質(zhì)。它的光密度曲線在540nm處有一個(gè)吸收峰。（填空）血樣分析一般包括吸樣、稀釋、送樣等過程。三流式細(xì)胞分析技術(shù)（簡答題）流式細(xì)胞儀（FCM）：主要功能：可進(jìn)行細(xì)胞多參量分析，包括細(xì)胞大小、形狀、蛋白熒光、氧化還

9、原狀態(tài)、膜的結(jié)構(gòu)、流動性、微黏性、膜電位、酶活性、鈣離子含量、pH、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA合成、堿基比例等；進(jìn)行細(xì)胞表型分析；細(xì)胞分選、DNA含量分析以及細(xì)胞分化周期分析等。FCM工作原理：將待測細(xì)胞染色后制成單細(xì)胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動室，不含細(xì)胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣，鞘液就能夠包圍著樣品高速流動，組成一個(gè)圓形的流束，待測細(xì)胞在鞘液的包被下單行排列，依次通過監(jiān)測區(qū)域。流式細(xì)胞儀通常以激光作為激發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激光熒光。光散射信號在前向小角度進(jìn)行檢測，這

10、種信號基本上反映了細(xì)胞體積的大小。這些熒光信號的強(qiáng)度代表了所測細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號。細(xì)胞的分選是通過分離含有單細(xì)胞的液滴而實(shí)現(xiàn)的。流式細(xì)胞儀中所用的濾片有中性濾片、帶通濾片、帶阻濾片、長波通濾片、短波通濾片、長波通雙色性反射片（填空題）影響流式細(xì)胞術(shù)分析的因素：細(xì)胞的熒光染色、激光光源的穩(wěn)定性、細(xì)胞流速的穩(wěn)定性、細(xì)胞懸液樣品的影響（細(xì)胞黏連，團(tuán)塊常造成管道阻塞，重疊細(xì)胞可造成分析誤差。）流式細(xì)胞儀的組成：光學(xué)系統(tǒng)，液流系統(tǒng)，電子系統(tǒng)，計(jì)算機(jī)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換處理系統(tǒng)。（大題）流式細(xì)胞儀的臨床應(yīng)用：在免疫學(xué)中的應(yīng)用（外周血T淋巴細(xì)胞亞群的測定，T淋

11、巴細(xì)胞亞群用于器官移植后排斥反應(yīng)的監(jiān)測，肺泡灌洗液中T淋巴細(xì)胞亞群的測定，在艾滋病監(jiān)測中的應(yīng)用，細(xì)胞內(nèi)染色和細(xì)胞因子的測定）；在血液病學(xué)中的應(yīng)用。四血凝分析技術(shù)生物學(xué)方法：凝固法，即將凝血因子激活劑加入到待檢血漿中，使血漿發(fā)生體外凝固，凝血儀連續(xù)記錄血漿凝固過程中的一系列變化，并將這些變化信號轉(zhuǎn)變成數(shù)據(jù)，用計(jì)算機(jī)收集、處理數(shù)據(jù)后得出檢測結(jié)果。（填空題）可分為三類：電流法、黏度法、光學(xué)法。（判斷題）凝血儀根據(jù)這種由于血液凝固而導(dǎo)致光強(qiáng)度的變化來判斷凝固終點(diǎn)的方法稱之為光學(xué)法。（填空或判斷題）散射比濁法：根據(jù)待檢樣品在凝固過程中散射光的變化來確定凝固終點(diǎn)的檢測方法。透射比濁法：根據(jù)待檢樣品在凝固過

12、程中吸光度的變化來確定凝固終點(diǎn)的檢測方法。黏度法：在待檢樣品中加入小鐵珠，利用變化的磁場使小鐵珠產(chǎn)生運(yùn)動，隨著血漿的凝固，血漿粘稠度增加，小鐵珠的運(yùn)動強(qiáng)度逐漸減弱，儀器根據(jù)小鐵珠運(yùn)動強(qiáng)度的變化來確定凝固終點(diǎn)。生物化學(xué)方法是以酶學(xué)方法為基礎(chǔ)的直接定量法，其優(yōu)點(diǎn)是用酶學(xué)方法直接定量；測定結(jié)果準(zhǔn)確；重復(fù)性好；便于自動化；標(biāo)準(zhǔn)化；所需樣品量小。五血液流變學(xué)分析技術(shù)影響血液流變特性因素：紅細(xì)胞的特性、白細(xì)胞的變形性、血小板的聚集性、纖維蛋白原濃度等血液流變特性：紅細(xì)胞聚集性，紅細(xì)胞變形性，血液黏度（全血黏度、運(yùn)動黏度、相對黏度、比黏度、還原黏度）。血液黏度的測量是其中最重要的指標(biāo)。測量血液黏度的儀器目前

13、普遍應(yīng)用的是毛細(xì)管黏度計(jì)及回轉(zhuǎn)錐板式黏度計(jì)。毛細(xì)管法測血黏度的理論依據(jù)是泊肅葉定律。血液黏度的影響因素：血液中細(xì)胞因素的影響；血漿血清黏度對血液黏度的影響；溫度對血液黏度的影響；酸堿度及滲透壓對血液黏度的影響；血液流速對血液黏度的影響；血管對血液黏度的影響；其他如性別，新生兒，運(yùn)動，時(shí)間，季節(jié)等。六尿液分析技術(shù)尿液分析儀是某些化學(xué)成分含量的專用自動化儀器，可分為濕式和干式化學(xué)系統(tǒng)兩大類。自動尿液分析的原理和方法：（填空或選擇題）按測試項(xiàng)目分類：8項(xiàng)尿液分析儀包括尿蛋白（PRO）、尿糖(GLU)、尿PH（PH）、尿酮體（KET）、尿膽紅素(BIL)、尿膽原(URO,UBG)、尿潛血(ERY)、尿

14、亞硝酸鹽(NTT)。9項(xiàng)尿液分析儀包括尿8項(xiàng)+尿白細(xì)胞（WBC或LUE）。10項(xiàng)尿液分析儀包括尿8項(xiàng)+尿白細(xì)胞、尿比重。11項(xiàng)尿液分析儀包括尿8項(xiàng)+尿白細(xì)胞、尿比重和顏色或維生素C。12項(xiàng)尿液分析儀包括尿8項(xiàng)+尿白細(xì)胞、尿比重、尿液顏色和濁度。（大題）尿液干化學(xué)分析儀的測試原理：多聯(lián)試劑帶的多層膜結(jié)構(gòu)：1尼龍膜2絨制層3吸水層4塑料片空白塊是為了消除尿液本身的顏色及試劑塊分布的狀態(tài)不均等所產(chǎn)生測試誤差，提高測量準(zhǔn)確度而設(shè)置的。原理：當(dāng)把浸了尿液的試劑帶放入分析儀的試劑帶傳送帶槽內(nèi)，傳送系統(tǒng)將試劑帶傳送到檢測器下面進(jìn)行掃描時(shí)，實(shí)際帶上已經(jīng)產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)的各種試劑塊被光源照射，其反射光被檢測器吸收。

15、試劑帶中各試劑塊與尿液中相應(yīng)成分發(fā)生反應(yīng)，顯示不同顏色，顏色的深度與尿液中某些成分成比例關(guān)系，試劑帶中還有另一個(gè)試劑塊稱為顏色補(bǔ)償區(qū)，作為尿液本身顏色，以此對顏色尿液及儀器變化等產(chǎn)生的誤差進(jìn)行補(bǔ)償。測定每種試劑帶反射光的光量值，將其與空白塊的反射光量值進(jìn)行比較，通過計(jì)算機(jī)求出由反射率換算成的濃度值，便可由分析儀打印出半定量的數(shù)值。尿沉渣分析儀原理：應(yīng)用了流式細(xì)胞和電阻抗的原理。當(dāng)一個(gè)尿液標(biāo)本被稀釋并經(jīng)染色液染色后，靠液壓作用通過鞘液活動池。當(dāng)反應(yīng)樣品從樣品噴嘴出口進(jìn)進(jìn)鞘液活動室時(shí)，被一種無粒子顆粒的鞘液包圍，使每個(gè)細(xì)胞以單個(gè)縱列的形式通過活動池的中心（豎直）軸線，在這里每個(gè)尿液細(xì)胞被氬激光光束

16、照射。每個(gè)細(xì)胞有不同程度的熒光強(qiáng)度，從染色尿液細(xì)胞發(fā)出的熒光，主要反映細(xì)胞的定量特性，如細(xì)胞膜、核膜、線粒體和核酸）、前向散射光強(qiáng)度和電阻抗的大?。娮杩闺娦盘栔饕c細(xì)胞的體積成正比）。儀器正是將這種熒光、散射光等光信號轉(zhuǎn)變成電信號，并對各種信號進(jìn)行分析，最后得到每個(gè)尿液標(biāo)本產(chǎn)生出的直方圖和散射圖。全自動尿沉渣分析儀主要由光學(xué)檢測系統(tǒng)、液壓系統(tǒng)、電阻抗檢測系統(tǒng)和電路系統(tǒng)組成。七血?dú)夥治黾夹g(shù)血?dú)夥治鰞x是通過對人體血液及呼出氣的酸堿度（pH）、二氧化碳分壓（PCO2）、氧分壓（PO2）進(jìn)行定量測定，來分析和評價(jià)人體血液酸堿平衡（紊亂）狀態(tài)和輸氧狀態(tài)的儀器。利用各種活性膜直接測量溶液中特定離子濃度的

17、電極叫離子選擇電極，簡稱ISE，遵循能斯特方程式。（簡答題）離子選擇性電極的分類：按電極膜材料的不同來劃分，分為固體離子交換膜電極、液體離子交換膜電極（用浸有液體離子交換劑的惰性孔薄膜代替固體膜作為電極膜）、氣敏電極和酶電極等類型。（簡答題）固體離子交換膜電極分類：玻璃電極、壓片膜電極、單晶膜膜電極、非均相膜電極。離子選擇性電極的特點(diǎn)：直接測定、選擇性強(qiáng)、響應(yīng)快，測量迅速、適應(yīng)性強(qiáng)，應(yīng)用廣泛、所需樣品少、總體價(jià)格低廉、攜帶方便、易實(shí)現(xiàn)儀器微型化。（判斷題）檢測下限又稱檢測限度，它表明離子選擇性電極能夠檢測被測離子的最低濃度。（填空題）參比電極：常用的有兩種，甘汞電極，銀-氯化銀電極。甘汞電極由

18、水銀、甘汞（Hg2CL2）和飽和氯化鉀溶液組成。甘汞電極的電位只取決于氯離子的活度。銀-氯化銀電極的最大特點(diǎn)是在較高溫度時(shí)，電極電位仍穩(wěn)定，其最高工作溫度達(dá)250C。血?dú)夥治鰞x的工作原理：（與電解質(zhì)分析儀相同），pH系統(tǒng)使用pH值為7.383和6.840左右的兩種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液進(jìn)行定標(biāo)。八電解質(zhì)分析技術(shù)電解質(zhì)是指在溶液中能解離成帶電離子而具有導(dǎo)電性能的一類物質(zhì)。在臨床化學(xué)領(lǐng)域中，其主要指體液中最常測定的Na+、K+、Cl-和HCO3-四種電解質(zhì)，以及Ca2+、Mg2+無機(jī)P等電解質(zhì)分析儀的工作原理及基本結(jié)構(gòu)：電解質(zhì)分析儀的工作原理和血?dú)夥治鰞x相同，采用一個(gè)毛細(xì)管測試管路，讓待測液體同時(shí)和所有的測量

19、電極相接觸。不同的電極和樣品中相應(yīng)的離子起作用而建立起各自相應(yīng)的電位；電計(jì)部分將電極產(chǎn)生的電位放大后顯示或打印出來。鈉電極是一種含鉛硅酸鈉的玻璃電極。鉀電極為采用纈氨霉素與聚氯乙烯的膜電極。氯電極的敏感膜由金屬氯化物材料制成。九生化分析技術(shù)生化分析儀其結(jié)構(gòu)不同主要分為以下三類：連續(xù)流動式生化分析儀、離心式生化分析儀、分離式生化分析儀。生化分析即利用光電比色法來分析樣本中的生化指標(biāo)。（填空題）光具有波動和微粒兩種性質(zhì)，通稱光的波粒二象性。某兩種顏色的光按照一定的比例混合，能夠得到白色光的話，這兩種顏色的光就叫做互補(bǔ)色。朗伯-比爾定律：A=KCL，A吸光度K吸光系數(shù)C溶液濃度L液層厚度，在入射光一

20、定時(shí)，溶液吸光度與溶液濃度及液層厚度成正比。利用光電池或光電管等光電轉(zhuǎn)換元件作檢測器來測量通過有色溶液的透射比或吸光度，從而求出被測物質(zhì)含量的方法叫做光電比色法。光電比色計(jì)由光源、濾光片、比色皿、光電檢測器、放大和顯示等六部分組成。（填空題）分光光度計(jì)和光電比色計(jì)的最主要區(qū)別是用單色（光）器代替了濾光片。分光光度計(jì)中常用的色散元件是棱鏡和光柵。（簡答題）后分光技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：不需移動儀器比色系統(tǒng)中的任何部件，可同時(shí)選用雙波長或多波長進(jìn)行測定，這樣可降低比色的噪聲，提高分析的精確度和減少故障率；通過雙波長或多波長可有效的抑制渾濁、溶血、黃疸對實(shí)驗(yàn)測定的影響；雙波長或多波長可有效的補(bǔ)償由于電源變動造成

21、的影響。自動生化分析儀的常用分析方法：一點(diǎn)法（加入試劑后，在測定時(shí)間中指定一點(diǎn)，測定出相應(yīng)吸光度值來求得待測物質(zhì)濃度的方法。）；二點(diǎn)法；二點(diǎn)速率分析法；速率A法。（填空題）生化檢測項(xiàng)目在疾病臨床診斷中的應(yīng)用：肝膽疾病、腎臟疾病、糖尿病及其他內(nèi)分泌疾病、骨代謝標(biāo)志物。十電泳技術(shù)分散介質(zhì)中帶電粒子在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動的現(xiàn)象稱為電泳。按電泳的原理有三種形式的電泳分離系統(tǒng)：移動界面電泳、區(qū)帶電泳、穩(wěn)態(tài)電泳（或置換電泳）。等電點(diǎn)IEP：在某一pH的溶液中，蛋白質(zhì)分子所帶的正電荷數(shù)可恰好等于負(fù)電荷數(shù)，所帶凈電荷為零，呈電中性，此時(shí)蛋白質(zhì)質(zhì)點(diǎn)在電場中不移動，溶液的pH稱為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)

22、（IEP）。溶液的pH小于IEP，則蛋白質(zhì)結(jié)合一部分H+而帶正電荷，在電場中向負(fù)極移動，反之亦然。遷移率：粒子移動速度v/電場強(qiáng)度E表示單位電場強(qiáng)度下帶電粒子的運(yùn)動速度稱為遷移率。影響電泳的因素：電場強(qiáng)度，溶液的pH值，溶液的離子強(qiáng)度，電滲，溫度，其他如緩沖溶液黏度、緩沖溶液與帶離子相互作用。(簡答題）溶液離子強(qiáng)度：溶液的離子強(qiáng)度一般在0.02-0.2mol/kg之間時(shí)，電泳較合適.離子強(qiáng)度過高，則會降低顆粒的泳動速度離子強(qiáng)度過低,則緩沖能力差，往往會因溶液PH值變化而影響泳動的速率。醋酸纖維薄膜電泳比紙電泳的優(yōu)勢：較之紙電泳有電滲小、分離速度快、分離清晰以及血清用量少、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。毛細(xì)管

23、電泳（CE）是20世紀(jì)80年代初發(fā)展起來的一類高效快速的分離分析方法。十一.散射免疫分析技術(shù)散射免疫分析，是一種微量、快速、自動化檢測體液中特定蛋白質(zhì)成分的免疫化學(xué)分析技術(shù)。該技術(shù)是將免疫測定與散射比濁法的原理相結(jié)合而設(shè)計(jì)的一種快速免疫測定方法，主要用于對體液中單個(gè)蛋白成分的測定。濁度分析的基本方法分兩大類：透射免疫比濁法、散射免疫比濁法（簡答題）散射免疫比濁法基本原理：激光散射光系水平軸照射，通過溶液時(shí)，遇到抗原抗體復(fù)合物粒子，光線鋇離子顆粒折射，發(fā)生偏轉(zhuǎn)。偏轉(zhuǎn)角度可以從0到90度，這種偏轉(zhuǎn)的角度可因光線波長和粒子大小不同而有所不同。散射光的強(qiáng)度與抗原抗體復(fù)合物的含量成正比，同時(shí)也和散射夾角

24、成正比，和波長成反比。任何發(fā)熒光的物質(zhì)都存在兩個(gè)特征光譜，即激發(fā)光譜與熒光光譜。物質(zhì)必須具備三個(gè)條件才能發(fā)出熒光：具有特征的吸收結(jié)構(gòu)具有一定的熒光效率適宜的環(huán)境。（填空題）為了避免或減少熒光物質(zhì)的光分解作用，應(yīng)在測定時(shí)才打開激發(fā)光閘。（填空題）被測藥物濃度與熒光偏振程度成反比。時(shí)間分辨熒光分析法與通常的FIA法不同，是用三價(jià)稀土離子（Eu3+）代替熒光物質(zhì)、放射性核素或酶作為標(biāo)記物，標(biāo)記抗原或抗體，用時(shí)間分辨技術(shù)測量熒光強(qiáng)度，根據(jù)熒光強(qiáng)度或相對熒光強(qiáng)度比值，來判斷反應(yīng)體系被分析物的濃度。十三.酶免疫分析技術(shù)基本原理：是將酶催化的放大作用與抗原、抗體的免疫反應(yīng)相結(jié)合的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗體

25、或抗原后，既不影響抗體或抗原的免疫反應(yīng)特異性，也不改變酶本身的催化活性，即在相應(yīng)的反應(yīng)底物參與下，標(biāo)記的酶可以使底物基質(zhì)水解而呈色，或使供氫體由無色還原型轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩难趸停@種有色產(chǎn)物可以通過肉眼、光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡進(jìn)行觀察，也可以用分光光度計(jì)加以測定。酶免疫分析方法中的主要組成部分：固相載體（塑料-聚苯乙烯或聚氯乙烯制成的微孔反應(yīng)板48孔/96孔）包被蛋白 待測樣品 酶標(biāo)記物 各種緩沖液。（簡答題）酶標(biāo)儀與普通光電比色計(jì)的不同之處在于：1.盛裝待測比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,對抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,故用它作為固相載體. 2. 酶標(biāo)

26、儀的光束是垂直通過待測溶液和微孔板的 3. 酶標(biāo)儀通常不使用A,而是使用光密度OD來表示吸光度.十四.發(fā)光免疫分析技術(shù)（簡答題）優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高、檢測速度快、操作簡便、所用試劑對人體無危害，成為非放射性免疫分析技術(shù)中最具有發(fā)展前景的方法之一。所用的標(biāo)記物可分為三類，即發(fā)光反反應(yīng)中所消耗掉的標(biāo)記物、發(fā)光反應(yīng)中起催化作用的標(biāo)記物、酶標(biāo)記物。十五.無創(chuàng)性實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)無創(chuàng)性實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)可分為兩大類，第一類以光譜分析及相關(guān)技術(shù)分析各種血液與生化成分，第二類為核磁共振光譜學(xué)（MRS）。（填空題）血液中的各種無形成分如血紅蛋白、葡萄糖、尿素氮、藥物及血?dú)夥治龅龋贜IR區(qū)均有各自的特異性吸收光譜，這就是利用N

27、IR開展無創(chuàng)性檢驗(yàn)的理論基礎(chǔ)。無創(chuàng)血?dú)夥治鲋饕獧z測指標(biāo)分兩個(gè)方面。一方面是氧合作用的評估，包括氧飽和度，動脈氧分壓等指標(biāo)，其測定技術(shù)包括脈氧測定法，通過皮膚測定氧，間接熱量測定法；另一方面是肺的換氣功能評估，包括二氧化碳分壓，二氧化碳含量等指標(biāo)，其測定技術(shù)包括通過皮膚測定二氧化碳，末端潮汐二氧化碳測定。十六. 臨床微生物學(xué)分析技術(shù)臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)分析主要包括自動微生物培養(yǎng)，微生物鑒定和抗菌藥物敏感試驗(yàn)等。自動化血培養(yǎng)檢測系統(tǒng)的基礎(chǔ)是檢測細(xì)菌和真菌生長時(shí)所釋放的二氧化碳，此作為血液中有無微生物存在的指標(biāo)。血培養(yǎng)檢測系統(tǒng)包括一個(gè)培養(yǎng)系統(tǒng)和一個(gè)檢測系統(tǒng)，其中培養(yǎng)系統(tǒng)由培養(yǎng)瓶和真空采血器等組成，檢測系統(tǒng)則由恒溫孵育系統(tǒng)，檢測系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)及其外圍設(shè)備等組成。血培養(yǎng)檢測系統(tǒng)應(yīng)用的檢測技術(shù)主要有;：放射性14C標(biāo)記。二氧化碳感受器和均質(zhì)熒光。微生物鑒定系統(tǒng)采用數(shù)碼分類鑒定法的原理，即計(jì)算并比較數(shù)據(jù)庫內(nèi)每個(gè)細(xì)菌條目對系統(tǒng)中每個(gè)生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻率總和。目前用于臨床的藥敏分析方法主要分為三類：抗生素紙片擴(kuò)散系統(tǒng)、瓊脂稀釋試驗(yàn)系統(tǒng)和微量肉湯稀釋試驗(yàn)系統(tǒng)，其中，以第三類應(yīng)用最多。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線，對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。（簡答題）與普通P