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1、VWD和DAD兩種檢測器的區(qū)別 1.VWD和DAD兩種檢測器都屬于高效液相色譜儀器的組成部分,只是兩者設(shè)計有區(qū)別,使用有差異而已; 2.VWD只能進行某一特定波長的檢測,即事先設(shè)定好某一波長,然后在此波長下對流經(jīng)色譜柱的樣品進行檢測;DAD檢測器可以進行全波長檢測,一般是從190nm到400nm的范圍掃描,掃描結(jié)束后得到一張三維圖譜,坐標(biāo)分別是運行時間、吸收值和波長值,當(dāng)然你也可以從中調(diào)出任何一張波長范圍在190nm到400nm的色譜圖,此三維圖對有關(guān)物質(zhì)檢查時的波長選擇比較有幫助; 3.關(guān)于峰純度的問題,在DAD檢測器上,檢查某一色譜峰(A)的峰純度,首先要對A進行恰當(dāng)
2、的積分,然后選擇合適的參比(分自動和手動,一般選自動,特殊情況下選手動),再選擇波長范圍(210nm-400nm較合適吧,再低會有基質(zhì)的末端吸收干擾,會影響峰純度檢查的可信度,當(dāng)然這要看具體的流動相及等梯度情況啦),之后選擇固定閾值(國家局要求在990及以上),最后點一下要測的主峰就可以了。我簡單的說一下峰純度檢查的原理吧,是這樣的,當(dāng)要檢查某一色譜峰的峰純度(A)時,軟件會在A的起始點、前半中點、頂點、后半中點和結(jié)束點(共5點)分別取紫外全掃描圖來進行擬合度檢查,當(dāng)擬合度大于閾值(即上述的990)時,軟件默認為A的五個點都是一種物質(zhì),即A是一種物質(zhì)的紫外吸收峰,純的,相反,當(dāng)擬合度低于閾值時,軟件默認A的五個點不是一種物質(zhì),即A是兩種或兩種以上的物質(zhì)的紫外吸收峰,不純,就要再進行條件的優(yōu)化分開它們了。所以峰純度檢查是選擇有關(guān)物質(zhì)檢查色譜條件的重要環(huán)節(jié)之一,也就是方法的專屬性啦。安捷倫一般是選擇光譜歸一化法計算峰純度,簡單的說就是從色譜峰上選擇5個點(峰起始點、峰上升一半處的點,峰頂點、峰下降一半處的點及峰的結(jié)束點,當(dāng)然作為DAD也可以選擇更多),提取這5個點的光譜圖進行疊放,看其重合程度來判斷色譜峰純度。取這5個點的純度因子平均值和閾值比較(一般采用固定閾值
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