單位代碼10369學號200701102010屆碩士研究生學位論文洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究STUDYONLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPCONTROLLEDRELAESETABLETS學科專業藥劑學研究方向藥物新技術與新劑型導師王成永教授碩士生楊甜2010年4月合肥目錄中文摘要1英文摘要3英文縮略詞5前言6第一章處方前研究及體外分析方法的建立1儀器與試藥132方法與結果1321處方前研究13211洛索洛芬鈉的溶解度13212洛索洛芬鈉在不同釋放介質中的穩定性14213表觀油水分配系數的測定1422含量測定方法的建立15221檢測波長的確定15222色譜條件與系統適應性16223洛索洛芬鈉對照品溶液的制備17224標準曲線的制備17225精密度試驗18226穩定性試驗19227重復性試驗19228回收率試驗20229洛索洛芬鈉滲透泵片的含量測定2023釋放度測定方法的建立21231檢測波長的確定21232標準曲線的制備22233精密度試驗22234釋放介質中的穩定性23235回收率試驗23236釋放度測定方法243討論244小結25第二章洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片制備工藝的研究1儀器與試藥262方法與結果2621洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的制備工藝及工藝流程圖26211制備工藝26212工藝流程圖2722洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的單因素考察27221片芯處方的單因素考察27222包衣液處方的單因素考察32223體外釋放條件對藥物釋放的影響3623正交試驗優化處方3824處方的確定4025處方與工藝重復性考察4126釋藥曲線的擬合4127釋藥機理的初步研究423討論424小結44第三章洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的質量控制及穩定性研究1儀器與試藥452方法與結果4521外觀性狀4522釋放度檢查46221方法學考察46222釋放曲線的繪制46223釋放度限度的確定4623樣品的含量測定及其限度4624有關物質分析方法的建立47241色譜條件47242最低檢測限和定量限的確定47243降解產物對主藥測定的影響47244洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片有關物質檢查4825洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片初步穩定性研究48251考察項目與檢測方法48252影響因素試驗49253加速試驗503討論514小結52第四章洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片在大鼠體內初步藥動學研究1儀器與試藥532方法與結果5321受試制劑與參比制劑5322實驗動物5323給藥方案及血樣采集5324血漿樣品的處理和測定5425體內分析方法的建立54251色譜條件54252方法的專屬性54253標準曲線的制備55254精密度試驗56255樣品回收率試驗56256血漿樣品穩定性考察5726血藥濃度測定結果5827相對生物利用度613討論614小結62全篇小結63參考文獻64綜述68個人簡歷80致謝81中文摘要洛索洛芬鈉（LOXOPROFENSODIUM）為苯丙酸類非甾體抗炎藥，具有起效迅速，抗炎強效且均衡，胃腸道刺激小的特點，臨床上廣泛用于治療慢性風濕性關節炎、類風濕性關節炎、骨性關節炎、變形性關節炎、腰疼等。目前，洛索洛芬鈉已上市的品種有普通片、分散片、口腔速崩片、顆粒劑、膠囊劑、貼劑。國內尚未見自主研制的緩控釋制劑上市。將洛索洛芬鈉制成滲透泵型控釋片能夠在一定時間范圍內以恒定的釋藥速度釋放出一定量的治療藥物，可以減少給藥次數和保持平穩的血藥濃度，為病人提供一種相比較而言較為安全、方便的服藥方式。本文建立了紫外分光光度法用于滲透泵片釋放度的測定，建立了高效液相色譜法用于滲透泵片含量測定和體內血藥濃度的檢測。以上分析方法準確可靠、方便快捷，滿足分析要求。本文在充分考察藥物及各種輔料性質的基礎上，以氯化鈉、羥丙甲基纖維素K4M（HPMCK4M）、乳糖為片芯組成，以醋酸纖維素（CA）丙酮溶液、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）和聚乙二醇400（PEG400）為包衣材料，制備了洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片（LOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPCONTROLLEDRELEASETABLETS）。從片芯處方、包衣液處方、體外釋放條件等因素對洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的釋藥行為進行了單因素考察。在單因素考察及因素篩選的基礎上，采用綜合評分法，通過正交試驗，優化處方。結果顯示，優化的處方在12小時內呈零級釋藥特征，釋藥較完全，批間重現性良好。為控制滲透泵型控釋片的質量，根據洛索洛芬鈉的理化性質和滲透型控釋片的制劑特點，建立了本品的釋放度、有關物質、含量的測定方法。結果顯示方法準確、可行，能有效控制產品的質量，為制定該制劑的質量標準提供了一定的依據。參照藥物穩定性試驗指導原則的要求，以外觀、釋放度、含量、有關物質等項目作為考察指標，對洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片進行影響因素試驗（4500LX光照、60高溫及RH925高濕）和加速試驗。試驗結果顯示，各項考察指標在上述試驗過程中均未發生明顯變化，證明該制劑穩定性良好，本品的制備工藝研究和質量標準研究合理、方法可行。本文以市售普通片作為對照，對洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片進行了藥動學研究。利用高效液相色譜法對體內血藥濃度進行測定，兩種制劑的峰濃度（CMAX）分別為837、2345G/ML，達峰時間（TPEAK）分別為6031、0753H，藥時曲線下面積（AUC）分別為62197、54936G/MLH，其相對生物利用度為11322。結果表明，自制滲透泵片具有出峰時間晚、峰值低、血藥濃度平穩的特征。關鍵詞洛索洛芬鈉；滲透泵型控釋片；質量標準；藥代動力學ABSTRACTLOXOPROFENSODIUMISASTYRENEACRYLICACIDNONSTEROIDALANTIINFLAMMATORYDRUGSWITHRAPIDONSET,POTENTANTIINFLAMMATORYANDBALANCED,GENTLESTIMULATIONOFTHEGASTROINTESTINALTRACT,WHICHISWIDELYUSEDINCLINICALTREATMENTOFCHRONICRHEUMATISMARTHRITIS,RHEUMATOIDARTHRITIS,OSTEOARTHRITIS,DEFORMATIONARTHRITIS,BACKPAINANDSOONCURRENTLY,LOXOPROFENSODIUMVARIETIESHAVEBEENLISTEDORDINARYTABLETS,DISPERSIBLETABLETS,ORALFASTDISINTEGRATINGTABLETS,GRANULES,CAPSULES,PASTETABLECHINAHASNOTYETINDEPENDENTLYDEVELOPEDCONTROLLEDRELEASEFORMULATIONSONTHEMARKETMADEOFTHEOSMOTICPUMPLOXOPROFENSODIUMCONTROLLEDRELEASETABLET,ITCANRELEASEACONSTANTDRUGRELEASERATEOFACERTAINAMOUNTOFTHERAPEUTICDRUGSWITHINACERTAINTIME,WHICHCANREDUCEINJECTINGTIMESANDMAINTAINASTABLEBLOODCONCENTRATION,TOPROVIDEACOMPARISONOFPATIENTSISMORESAFEANDCONVENIENTWAYOFTAKINGMEDICINEITWASESTABLISHEDBYUVSPECTROPHOTOMETRYFORTHEOSMOTICPUMPTABLETSRELEASETEST,HIGHPERFORMANCELIQUIDCHROMATOGRAPHYHPLCFORTHEDETERMINATIONOFOSMOTICPUMPTABLETANDTHEBLOODCONCENTRATIONOFTHETESTTHEABOVEANALYSISMETHODISACCURATE,CONVENIENT,MEETTHEANALYSISREQUIREMENTSONTHEBASISOFINVESTIGATINGTHECHARACTERSOFLOXOPROFENSODIUMANDVARIOUSINGREDIENTS,USEINGSODIUMCHLORIDE,HPMCK4M,LACTOSECHIPCORE,WITHCELLULOSEACETATECAACETONE,DIBUTYLPHTHALATEDBPANDPOLYETHYLENEGLYCOL400PEG400FORTHECOATINGMATERIAL,PREPAREDLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPCONTROLLEDRELEASETABLETSFORCOREWITHASLICEPRESCRIPTION,CLOTHINGMEMBRANEPRESCRIPTION,INVITRORELEASECONDITIONSASFACTORS,LOXOPROFENSODIUMONOSMOTICPUMPTABLETSWITHDRUGRELEASEBYTHESINGLEFACTORSSTUDIEDTOSINGLEFACTORANDFACTORBASEDSCREENING,WITHINTEGRATEDRATEMETHOD,THEORTHOGONALEXPERIMENTALDESIGN,OPTIMIZATIONPRESCRIPTIONTHERESULTSSHOWTHATOPTIMIZATIONOFPRESCRIPTIONDRUGRELEASECHARACTERISTICSWEREZEROORDERIN12H,AMORECOMPLETEDRUGRELEASE,AGOODBATCHREPEATABILITYACCORDINGTOTHEPHYSICOCHEMICALPROPERTYOFLOXOPROFENSODIUMANDCHARACTERISTICOFOSMOTICPUMPTABLETSPREPARATION,THEDRUGRELEASERATE,RELATEDSUBSTANCESANDCONTENT,WHICHWERETHEQUALITYCONTROLSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSTHERESULTSHOWEDTHATTHEMETHODWASACCURATEANDFEASIBLE,WHICHPROVIDESOMEREFERENCEFORQUALITYCONTROLOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSREFERENCINGGUIDANCEPRINCIPLESOFINVESTIGATIONONDRUGSTABILITY,THESTABILITYTESTOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSWERECARRIED4500LXSTRONGLIGHTTEST,60HIGHTEMPERATURETEST,RH925HIGHHUMIDITYTESTBYINSPECTIONOFTHECHARACTER,DRUGRELEASE,RELATEDSUBSTANCE,CONTENTEXAMINATIONANDSOONANDTHENTHEACCELERATIONTESTWASCARRIEDONTHERESULTSINDICATEDTHATLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSWERESTABLE,NEARLYWITHOUTANYQUALITYCHANGESDURINGTHESTABILITYSTUDYTHEPREPARATIONPROCEDUREANDTHEQUALITYCONTROLSTANDARDWEREREASONABLEANDFEASIBLEWITHTHECOMMERCIALLOXOPROFENSODIUMTABLETSASTHEREFERENCE,THEPHARMACOKINETICSWASSTUDIEDBYSELFPREPARELOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSHPLCWASEMPLOYEDTODETECTTHELOXOPROFENSODIUMCONCENTRATIONINBLOODPLASMATWOPREPARATIONSOFPEAKCONCENTRATIONCMAXWERE837G/MLAND2345G/ML,PEAKTIMETPEAKWERE6031HAND0753H,AREAUNDERTHECONCENTRATIONTIMECURVEAUCWERE62197G/MLHAND54936G/MLHTHERELATIVEBIOAVAILABILITYOFTHETWOPREPARATIONSWAS11322THERESULTSSHOWTHATOSMOTICPUMPTABLETSHAVEPROPERTYEVENINGPEAKTIME,PEAKLOW,STABLEPLASMACONCENTRATIONKEYWORDSLOXOPEOFENSODIUMOSMOTICPUMPCONTROLLEDTABLETSQUALITYSTANDARDPHARMACOKINETICS英文縮略詞（ABBREVIATION）縮略詞英文全名中文釋義AUCAREAUNDERCONCENTRATIONTIMECURVE藥時曲線下面積CACELLULOSEACETATE醋酸纖維素DDAY天HHOUR小時HPLCHIGHPERFORMANCELIQUIDCHROMATOGRAPHY高效液相色譜法HPMCHYPROMELLOSE羥丙甲基纖維素LXLUX勒克斯（光照度單位）MINMINUTE分鐘MRTMEANRESIDENCETIME平均滯留時間NSAIDSNONSTEROIDALANTIINFLAMMATORYDRUGS非甾體類抗炎藥PAPPAPPARENTNOCTYLALCOHOL/WATERPARTITION表觀正辛醇/水分配系數PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖液PEGPOLYETHYLENEGLYCOL聚乙二醇PHPOWEROFHYDROGEN酸堿度RHRELATIVEHUMIDITY相對濕度RSDRELATIVESTANDARDDEVIATION相對標準偏差前言1立題依據與研究背景11研究背景解熱鎮痛藥是一類具有解熱、鎮痛作用，且大多數還具有顯著的抗炎、抗風濕作用的藥物，故稱為解熱鎮痛抗炎藥（ANTIPYRETICANALGESICANDANTIINFLAMMATORYDRUGS）。鑒于此本類藥物的抗炎作用與具有甾體結構的糖皮質激素不同，1974年在意大利米蘭召開的國際會議中，將本類藥物歸入非甾體抗炎藥（NONSTEROIDALANTIINFLAMMATORYDRUGS,NSAIDS）1。自1899年德國拜爾公司研制出乙酰水楊酸（阿司匹林）ACETYLSALICYLICACID,ASPIRIN,ASA2問世以來的百年間，發現了許多不同類別的非甾體抗炎藥，極大的豐富了臨床治療學，并廣泛應用于臨床。目前，非甾體抗炎藥是全球處方藥和非處方藥用量最大的藥物之一，在內、外、婦、兒科均廣泛使用，在風濕病臨床中也占有很重要的地位。阿司匹林是非甾體抗炎藥的原形藥物，至今仍在使用，并且開發其新的用途。20世紀50年代出現的吡唑酮類藥物，如保泰松，以及20世紀60年代上市的吲哚乙酸類藥物，如吲哚美辛（消炎痛），以其強大的抗炎、鎮痛作用而廣泛應用于臨床。20世紀70年代至今，可謂非甾體抗炎藥發展最快的年代，相繼上市的丙酸類藥物，如布洛芬和酮基布洛芬等；苯乙酸類藥物，如雙氯芬酸；萘乙酸類藥物，如萘普生等。這些新型藥物由于在化學結構上的變更，與阿司匹林或保泰松或吲哚美辛相比，療效相當或更好，而不良反應的發生率和嚴重程度均明顯下降。此外，為了提高療效，同時減少其不良反應，出現了不同劑型的非甾體抗炎藥，如戴芬（德國生產）是雙氯滅酚的雙釋膠囊，布洛芬緩釋劑型芬必得等3。近年來，國內外已證實非甾體抗炎藥主要的作用機制是抑制花生四烯酸ARACHIDONICACID,AA代謝中的環氧化酶CYCLOOXYGENASE,COX和脂氧化酶LIPOXYGENASE,LOX，阻礙前列腺素PROSTAGLANDIN,PG、前列環素PROSTACYCLIN,PGI和白三烯LEUKOTRIENE,LT的致炎增敏作用4。前列腺素和前列環素能使血管舒張并增強血管通透性，間接成為引起炎癥的媒介，并且延長炎癥時間，此外，前列腺素還可以使痛覺神經末梢增敏，產生疼痛。白三烯是過敏性慢反應物質SRSA的主要成分，能增強血管通透性并促進血漿滲出。通過AA代謝所產生的大部分炎癥介質均可為NSAIDS所阻斷5。除此之外，非甾體抗炎藥的作用機制還包括解除氧化磷酸化偶聯；抑制溶酶體酶釋放；從血漿蛋白里置換出內源性抗炎多肽；抑制補體活化；拮抗激酶活性及其產生；抑制氧自由基產生；抑制白細胞聚集和黏附6。非甾體抗炎藥的種類繁多，其“家族成員”還在不斷增多，分類方法有很多種。根據對COX抑制特性將NSAIDS分為四類第一類COX1傾向性抑制劑，如小劑量腸溶性阿司匹林；第二類為非選擇性COX抑制劑，如吲哚美辛、雙氯芬酸等；第三類為選擇性COX2抑制劑，如美洛昔康等；第四類為COX2特異性抑制劑，如羅非昔布、塞來昔布等7。還可以根據其對花生四烯酸的不同代謝途徑來分類以及根據其化學結構來分類。洛索洛芬鈉（LOXOPROFENSODIUM）又稱環氧洛芬鈉、羅索普洛芬鈉、氯索洛芬鈉，由日本三共株式會社（SANKYO）研發，1986年7月在日本以商品名為“樂松”（LOXONIN）上市。本品是第一個苯丙酸類前體型非甾體抗炎藥，具有良好的鎮痛、抗炎及解熱作用，尤其是鎮痛作用最強。其鎮痛作用強度比吲哚美辛（消炎痛）強10倍，其抗炎和解熱作用則與之相當。由于本品為前體藥物，經胃腸道吸收后轉變為活性代謝產物而發揮作用，故對胃腸道副作用少，使用更加安全。臨床上廣泛用于治療慢性風濕性關節炎、類風濕性關節炎、骨性關節炎、變形性關節炎、腰疼等1。12立題依據近年來，為增加藥物的市場價值和競爭力，開發藥物的新劑型成為重要的途徑。在各種投放于市場的新型給藥系統中，口服控釋給藥系統能夠減小血藥濃度的波動和給藥次數，具有明顯的給藥方便性和較好的患者順應性的優點。在各種口服控釋給藥系統中，滲透泵片獨特的優點已成為研究開發的熱點811。一般的口服給藥系統其釋藥速率會受到釋藥環境的PH值、胃腸道蠕動的快慢等其它生理因素的影響，而滲透泵型控釋片利用了滲透壓原理釋放藥物，其釋藥行為對上述因素的變化不敏感，釋藥速度達到均勻恒定，體內外試驗相關性良好12，可同時控釋多種藥物13。因此，被公認是目前最理想的口服控釋給藥方法之一。國內外研究報道表明，洛索洛芬鈉顯著的治療效果和較小的副作用受到臨床醫生和患者的普遍認可，是我國“九五”及2010年醫藥科技發展規劃推薦品種之一。在日本專利1997年到期后，福建匯天生物藥業有限公司1998年開始對該品種進行研制開發，并于2002年7月獲得國家新藥證書和生產批件。目前，洛索洛芬鈉已上市的劑型有普通片、分散片、口腔速崩片、顆粒劑、膠囊劑、貼劑。因此，積極開發推廣本品的新劑型具有非常重要的現實意義。國內尚未見自主研制的緩控釋制劑上市。將洛索洛芬鈉制成滲透泵型控釋片，能夠在一定的時間范圍內以恒定的釋藥速度釋放出一定量的治療藥物，可以改善血藥濃度的峰谷現象，保持平穩的血藥濃度，同時減少給藥次數，為病人提供一種相比較而言較為安全、方便的服藥方式。所以本文選擇洛索洛芬鈉作為模型藥物，制備滲透泵型控釋片這一課題進行研究與開發，力求通過對控釋制劑技術的研究，研制出設計合理，性質穩定，適合于生產，同時具有廣大社會效益和經濟效益的制劑新產品。2國內研究現狀21洛索洛芬鈉的基本理化性質CHEMICALSTRUCTURESOFLOXOPROFENSODIUM化學名MONOSODIUM242OXOCYCLOPENTYLMETHYLPHENYLPROPANOATE分子式C15H17O3NA分子量26828本品為白色或淺黃色結晶或結晶性粉末，無氣味，味微甜咸。在水、甲醇中易溶，在乙醇中溶解，在丙酮、氯仿、乙醚中不溶。22洛索洛芬鈉的作用機制及藥動學研究洛索洛芬鈉為苯丙酸類非甾體抗炎藥，為非活性的前體藥。吸收后在體內轉化成活性代謝產物抑制環氧化酶，減少前列腺素生成，抑制中性粒細胞向炎癥部位的趨向性及抑制趨向因子形成而發揮作用14。本品口服后經胃腸道迅速吸收，轉變為順式和反式羥基代謝物，其藥理活性是由反式羥基代謝物產生15,16。健康成人單次口服洛索洛芬鈉60MG，迅速吸收，在肝臟、腎臟、皮膚、其他細胞外間隙及四肢的炎性組織中濃度較高，在關節中濃度持續時間較長，而在腦組織和骨骼肌中濃度較低。服藥后，原形藥物的血藥濃度達峰時間大約為30分鐘，反式羥基代謝物的血藥濃度達峰時間大約為50分鐘，給藥1小時后的洛索洛芬鈉原形及反式羥基代謝物的血漿蛋白結合率分別為970和928。本品大部分以原形藥物的葡萄糖醛酸的結合物或羥基化的葡萄糖醛酸結合物從尿液中排出。健康成人口服本品每次60MG，每日3次，連續5天，其吸收和排泄均與單次給藥無明顯差異，未見蓄積17,18?？姾＞?9選取18例健康志愿者單劑量口服60MG洛索洛芬鈉片，采用高效液相層析法測定血漿中洛索洛鈉藥物濃度，結果證明本品口服吸收快，消除半衰期短。23洛索洛芬鈉的臨床適應癥洛索洛芬鈉具有起效迅速，抗炎強效且均衡，胃腸道刺激小的特點。臨床上可廣泛應用于各種急性或慢性關節炎，如風濕性關節炎、類風濕性關節炎、強直性脊柱炎、骨性關節炎和痛風性關節炎等；軟組織風濕病，如腰疼、頸臂肩綜合征、肩周炎、網球肘等；手術后、外傷后及拔牙后疼痛以及急性上呼吸道炎癥的解熱和鎮痛14。黃烽等20選擇52例活動性強直性脊柱炎患者，口服洛索洛芬鈉，經過4周的治療，總有效率為9242，其中對各主要療效指標均有明顯改善P因素A因素B。對于因素A，最佳水平為2；對于因素B，最佳水平為2；對于因素C，最佳水平為2，因此最佳處方為A2B2C2，即氯化鈉用量為30MG，PEG400用量為5MG/ML，包衣增重為3。24處方的確定片芯處方組成用量洛索洛芬鈉90G氯化鈉30G羥丙甲基纖維素K4M10G乳糖130G硬脂酸鎂2G以3PVP無水乙醇溶液制粒1000片包衣液處方組成用量醋酸纖維素30G聚乙二醇4005ML鄰苯二甲酸二丁酯2ML丙酮1000ML25處方與工藝重復性考察按照24項下確定的最優處方制連續制備三批洛索洛芬鈉滲透泵片，按照釋放度測定方法測定三批的體外釋放度，考察處方與工藝的重復性，結果見TAB215和FIG212。試驗結果表明，洛索洛芬鈉滲透泵片的處方與工藝重復性良好。表215批間工藝重復性考察TAB215RELEASEPROFILESOFLOXOPROFENSODIUMATDIFFERENTBATCHSACCUMULATIVERELEASED（）TIMEH24681012BATCH1204365553719841957BATCH2193367565724846962BATCH3206359551713825948MEAN201364556719837956RSD348114136077131074圖212批間工藝重復性考察FIG212RELEASEPROFILESOFLOXOPROFENSODIUMATDIFFERENTBATCHS26釋藥曲線的擬合分別用零級、一級和HIGUCHI方程對按照24項下確定的最優處方制備的洛索洛芬鈉滲透泵片體外釋藥曲線進行擬合，用相關系數R判斷其擬合度，結果見TAB216。由擬合結果可以看出，以零級方程擬合的相關系數最大，可見本制劑體外釋放呈零級釋放特征。表216釋藥曲線擬合結果TAB216THERESULTOFDIFFERENTEQUATIONSFITTEDFOROPTIMALFORMULATIONMODELEQUATIONRZEROORDERMT/M00804T00037509959FIRSTORDERIN1MT/M02432T0346409440HIGUCHIMT/M02546T1/2001990983627釋藥機理的初步研究33對藥物體外釋藥機理的研究，有利于探索制劑處方與釋藥行為的關系，對了解其在體內的釋藥行為具有重要的參考意義。對于以包衣膜內外的滲透壓差作為主要釋藥動力的單室滲透泵型控釋片，其零級釋放部分的釋藥速率滿足以下公式DM/DTA/HLPPCEQN21其中，DM/DT代表藥物釋放的速率；A為膜的表面積；H為膜的厚度；LP為機械穿透系數；和P分別代表膜內外的滲透壓和靜壓差；為發射系數；C為片內溶解的藥物濃度。當流體靜壓差與滲透壓差相比，P時，包衣膜內滲透壓又遠大于膜外滲透壓時，上式可簡化為DM/DTA/HLPCEQN22當處方確定后，EQN22中KLP為常數，且在片芯內的全部藥物完全溶解之前，式中C和可以分別用藥物的飽和溶解度CS和片芯組成物質飽和溶液的滲透壓S取代，即DM/DTA/HKSCSEQN23由上述公式EQN23可知，A、H、K、S、CS均為常數，為此，只要片芯中全部藥物溶解之前，藥物可維持零級釋藥速率。3討論31關于劑型的選擇根據有關文獻報道42，洛索洛芬鈉在大鼠的整個腸道都有吸收，無特定的吸收部位，適宜制備成緩釋、控釋制劑。以滲透壓作為釋藥動力，以零級釋藥動力學為特征的滲透泵型控釋制劑，是被公認的最理想的口服控釋給藥系統之一，已經成為國內外研究的熱點。本文將洛索洛芬鈉制成滲透泵型控釋片，既能保留洛索洛芬鈉原有的起效迅速，抗炎強效且均衡，胃腸道刺激小的特點，又充分利用了滲透泵型控釋片的能夠使血藥濃度較長時間地維持在有效范圍內，釋藥速率不受胃腸道可變因素影響的優點，可以減少用藥次數與全身副作用，提高了藥物的安全性和有效性。32關于處方的設計藥物的溶解度是設計滲透泵片處方的一個重要考慮因素，最適宜制成滲透泵片的藥物其溶解度在530G/100ML范圍以內。片芯吸水后，迅速形成具有一定濃度的藥物飽和溶液，從而保證一定的釋藥速率37。對于難溶性藥物，其飽和溶液的濃度極低，難以達到有效的治療濃度，需要提高其溶解性，促進藥物的釋放；對于極易溶解的藥物，容易造成釋藥速率特別大，出現突釋現象，難以達到控釋要求，則需要加入一些阻滯劑，降低其釋藥速度。洛索洛芬鈉屬于極易溶解的藥物，其在滲透泵片芯的微環境中容易形成適宜濃度的均勻溶液，從而在半透膜內形成一定的滲透壓來維持恒速釋放，所以不需要在片芯中加入大量的滲透壓促進劑。本課題在制備滲透泵片時考慮加入羥丙甲基纖維素作為阻滯劑，用以調節釋藥速率。33關于制備工藝在預試驗的過程中，分別采用濕法制粒壓片和全粉末直接壓片，結果發現采用全粉末直接壓片時，制得的片劑光滑，成型性好，但需要較大的壓力，對沖模的磨損較大，另外，由于粉末的流動性不佳，使得片重差異較大，且在壓片的過程中產生粉塵較多。而濕法制粒壓片的壓片顆粒流動性和壓縮成型性好，壓力無需很大，且片芯中各組分混合均勻，并且減少了粉塵的污染，有利于進行工業化大生產。因此，本文選用濕法制粒壓片工藝制備滲透泵型控釋片。在制備的過程中，采用雙面機械打孔制備滲透泵型控釋片，雙面打孔既可以使藥物的釋放更加穩定，又可以避免藥物從一個釋藥孔釋放時，由于局部藥物濃度過高而產生胃腸道刺激等副作用。4小結本文通過對片芯處方、包衣液處方以及體外釋放條件進行了單因素考察，結果表明NACL用量、包衣膜中PEG400用量、包衣增重的因素對藥物的釋放有顯著的影響。在單因素考察的基礎上，采用正交試驗，通過綜合評分法優化處方，得到洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的最佳處方。按照最佳處方制備三批樣品進行釋放度考察，結果表明工藝重復性良好。進行釋藥曲線的擬合，洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片體外釋藥曲線符合零級釋放特征。第三章洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的質量控制及穩定性研究藥品質量的優劣直接影響到藥品的安全性和有效性，關系到用藥者的健康與生命安危。藥品的質量標準是藥品的純度、成分含量、組分、生物有效性、療效、毒副作用、熱原度、無菌度、物理化學性質以及雜質的綜合表現。本章根據藥物質量研究指導原則的要求，對洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的質量標準進行研究。制劑穩定性對保證制劑安全有效是非常重要的，為了提高制劑質量，保證藥品療效與安全，必須重視和研究制劑的穩定性。經過制劑基本項目考察合格的樣品，還必須進行穩定性試驗，以考察制劑在溫度、濕度、光線的影響下隨時間變化的規律，為樣品的生產、包裝、貯存、運輸條件提供科學依據。主要考察項目包括外觀、含量、有關物質、釋放度，本文參照中國藥典2005版二部附錄XIXC藥物制劑穩定性試驗指導原則有關內容，對自制洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片進行相關考察。1儀器與試藥日本島津高效液相色譜儀（VPODS日本島津色譜柱、LC10AT輸液泵、SPD10A紫外檢測器、CSLIGHT色譜工作站）；AS10200A超聲波清洗機（天津奧特賽恩斯儀器公司）；TU1901雙束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限公司）；AG285型電子天平（上海梅特勒托利多公司）；RCZSB藥物溶出儀（天津大學無線電廠）。洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片（自制）；洛索洛芬鈉對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號100638200401）；甲醇（色譜純，天津市四有精細化學品有限公司）；鹽酸（分析純，湖南化學試劑廠）；氫氧化鈉（分析純，湖南師范大學試劑廠）；其它試劑均為分析純。2方法與結果21外觀性狀取洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片三批樣品，對片劑外觀進行檢查，結果表明本品為白色圓形包衣片，片劑光滑圓整，無斑點、陰影或麻點。22釋放度檢查221方法學考察同第一章“23”項下。222釋放曲線的繪制按第一章“23”釋放度測定方法項下，取本品三批樣品批號090705、090710、090713，進行釋放度測定，結果見FIG31。圖31三批洛索洛芬鈉滲透泵累計釋放曲線FIG31THEACCUMULATIVERELEASECURVEOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETS223釋放度限度的確定根據洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片三批樣品的累積釋放度曲線實驗結果，并參照中國藥典2005版二部附錄XD項下對口服固體制劑釋放度限度的規定，制定本品的釋放度限度為本品每片在2小時累積釋放量為20，6小時累積釋放量為55，12小時累積釋放量為90以上。23樣品的含量測定及其限度按第一章“22”含量測定方法項下，對三批樣品（批號090811、090817、090822）的洛索洛芬鈉含量進行測定，計算標示含量及RSD，結果見TAB31。根據三批樣品的含量測定結果，制定本品的含量限度為含洛索洛芬鈉應為標示量的95105。表31含量測定結果TAB31THECONTENTDETERMINATIONOFTHEOSMOTICPUMPTABLETSBATCHTHERELATIVECONTENTOFLOXOPROFENSODIUMMEANRSD09081199749908995699460340908179975100231006710022046090822991399759941994303124有關物質分析方法的建立241色譜條件色譜柱日本島津VPODS（150MM46MM,5M）；流動相甲醇水冰醋酸三乙胺（60040011）；檢測波長222NM；流速100ML/MIN；進樣量20L；柱溫25。242最低檢測限和定量限的確定精密量取對照品溶液適量，用流動相逐級稀釋成一系列濃度的稀溶液，分別精密量取各稀溶液20L進樣測定。采用信噪比法43，取峰高為噪音23倍的進樣量作為最低檢測限，峰高為噪音10倍的進樣量作為最低定量限。實驗結果進樣濃度為007G/ML時，主峰的S/N3，即最低檢測限為007G/ML20L14NG；進樣濃度為026G/ML時，主峰的S/N10，即最低定量限為026G/ML20L52NG。243降解產物對主藥測定的影響4446（專屬性考察）酸破壞樣品的制備取洛索洛芬鈉滲透泵片粉末適量（約相當于洛索洛芬鈉125MG），置100ML燒瓶中。加入01MOL/L的鹽酸溶液10ML，振搖使溶解，在80水浴中加熱1H，放冷，取出，用01MOL/L氫氧化鈉溶液調PH至中性，加流動相定容至刻度，濾過，作為酸破壞樣品。堿破壞樣品的制備取洛索洛芬鈉滲透泵片粉末適量（約相當于洛索洛芬鈉125MG），置100ML燒瓶中。加入01MOL/L氫氧化鈉溶液10ML，振搖使溶解，在80水浴中加熱1H，放冷，取出，用01MOL/L的鹽酸溶液調PH至中性，加流動相定容至刻度，振搖使溶解，濾過，作為堿破壞樣品。中性溶液加熱破壞樣品的制備取洛索洛芬鈉滲透泵片粉末適量（約相當于洛索洛芬鈉125MG），置100ML燒瓶中。加入蒸餾水10ML，振搖使溶解，在120加熱1H，放冷，取出，加流動相定容至刻度，濾過，作為中性溶液加熱破壞樣品。以上樣品經適當處理后，進樣20L，進行HPLC分析，記錄色譜圖。結果表明洛索洛芬鈉滲透泵片在中性溶液120加熱破壞中未見明顯的降解產物，在01MOL/L的鹽酸和01MOL/L氫氧化鈉溶液中有不同程度的降解，降解產物不干擾主藥的測定。244洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片有關物質檢查供試藥品洛索洛芬鈉滲透泵片，批號090703、090715、090721；實驗方法有關物質檢查法即主成分自身稀釋對照法；實驗結果有關物質檢查結果見TAB33、TAB34、TAB35、TAB36。2441有關物質的測定高效液相色譜法（主成分自身稀釋對照法）精密稱取洛索洛芬鈉滲透泵片適量（約相當于洛索洛芬鈉25MG），置25ML容量瓶中加蒸餾水溶解并定容至刻度，精密量取5ML于50ML容量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻，濾過，續濾液作為供試品溶液；精密量取續濾液1ML于100ML容量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻作為對照溶液。精密量取對照溶液20L注入色譜柱，調節檢測靈敏度，使主成分譜峰高約為滿量程的20，精密量取供試品溶液和對照溶液各20L分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分保留時間的2倍。供試品色譜圖中如有雜質峰（輔料、溶劑峰除外），量取各雜質峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積（1）。2442有關物質檢查限度的確定試驗結果表明，三批樣品的總雜質量均小于1。參照化學藥物雜質研究指導原則，并結合樣品的自身理化性質和實測情況，將本品的有關物質限度定為總雜質量不得超過1。25洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片初步穩定性研究251考察項目與檢測方法參照藥物穩定性實驗指導原則對藥物制劑穩定性實驗的要求，以性狀、釋放度、有關物質、標示含量為重點考察項目，對洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片進行穩定性實驗，考察實驗前后各考察指標是否有明顯變化。各考察項目的檢測方法均參照上述質量標準研究項下的相關方法。1性狀觀察實驗前后洛索洛芬鈉滲透泵片的外觀性狀是否有明顯變化；2釋放度檢查按質量標準中釋放度檢測方法進行，測定2H、6H、12H的累積釋放度；3含量測定按質量標準中含量測定方法進行；4有關物質按質量標準“244”項下進行測定；252影響因素試驗將已經過全檢合格的090703批洛索洛芬鈉滲透泵片置表面皿中，作為供試樣品，分別進行下列光照、高溫、高濕實驗。2521光照試驗取樣品置于表面皿中，室溫條件下，將放有樣品的表面皿置于光照強度為4500500LX的光照箱中進行光照試驗。分別于0、5、10D取樣，按考察項目下的方法檢測。結果見TAB32。表32洛索洛芬鈉滲透泵片光照穩定性試驗N3TAB32THEDETERMINATIONRESULTSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICTABLETSINSTRONGLIGHTTESTN3ACCUMULATIVERELEASED（）TIMEDAYAPPEARANCE2H6H12HCONTENT（）RELSUB（）0HARDANDSMOOTH213565954100320555HARDANDSMOOTH205553946997507210HARDANDSMOOTH2015529329958081結果表明，本品在強光照射下放置10D后，各項考察指標與0D數據比較，均未見明顯變化。2522高溫試驗取樣品，置表面皿中，于60烘箱中放置，分別于0、5、10D取樣，按考察項目下的方法檢測。結果見TAB33。結果表明，本品在60高溫條件下放置10D，各項考察指標與0D數據比較，均未見明顯變化。表33洛索洛芬鈉滲透泵片高溫穩定性試驗N3TAB33THEDETERMINATIONRESULTSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICTABLETSINHIGHTEMPERATURETESTN3ACCUMULATIVERELEASED（）TIMEDAYAPPEARANCE2H6H12HCONTENTRELSUB0HARDANDSMOOTH192557953100560645HARDANDSMOOTH184553941997207310HARDANDSMOOTH17954694899850762523高濕試驗取樣品，置表面皿中，分別放置于相對濕度為75，925（25）密閉容器中，分別于0、5、10D取樣，按考察項目下的方法檢測。結果見TAB34。表34洛索洛芬鈉滲透泵片高濕穩定性試驗N3TAB34THEDETERMINATIONRESULTSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICTABLETSINHIGHHUMIDITYTESTN3ACCUMULATIVERELEASEDRHTIMEDAYAPPEARANCE2H6H12HCONTENTRELSUB0HARDANDSMOOTH20454895710013043755HARDANDSMOOTH192542946996705510HARDANDSMOOTH18753693596590539255HARDANDSMOOTH191543943982106410HARDANDSMOOTH1795349389728072結果表明，本品在高濕度下放置10D，除片面吸潮，片重有增加外，其他各項考察指標與0D數據比較，均無明顯變化。253加速試驗供試品三批，按市售包裝，在穩定402、相對濕度755的條件下放置3個月，所用設備應能控制穩定2、相對濕度5，并能對真實溫度與濕度進行監測，在試驗期間第1、2、3個月末分別取樣一次，按穩定性重點考察項目檢測。結果見TAB35。表35洛索洛芬鈉滲透泵片加速試驗TAB35THEDETERMINATIONRESULTSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICTABLETSINACCELERATEDTESTACCUMULATIVERELEASEDBATCHTIMEMONTHAPPEARANCE2H6H12HCONTENTRELSUB0907030HARDANDSMOOTH19557894599760541HARDANDSMOOTH207563932100340642HARDANDSMOOTH19156493999530663HARDANDSMOOTH19657193499410730907150HARDANDSMOOTH212545951100640431HARDANDSMOOTH205536954100970572HARDANDSMOOTH20754894399350623HARDANDSMOOTH19954294699620680907210HARDANDSMOOTH20856394699750521HARDANDSMOOTH201568951100780562HARDANDSMOOTH21255793999820633HARDANDSMOOTH2065729549969071結果本品三批在模擬市售包裝后經加速試驗3個月，各項考察指標與0月檢測結果比較均未見明顯變化。3討論31關于質量標準的研究根據含量測定方法的選擇原則，制劑的含量測定應首選色譜法43。高效液相色譜法測含量，具有專屬性強、靈敏度高等特點。本品3批樣品釋放度試驗結果12H平均累積釋放量為標示量的90以上，符合釋放度限量的常規要求，說明本方法用于測定洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的釋放度切實可行。試驗結果表明，洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片，符合零級釋放特征，且制備工藝簡單穩定，適合工業化大生產，具有良好的開發應用前景。本課題依照中國藥典2005版二部附錄中關于控釋片檢測項下要求，通過對洛索洛芬鈉滲透泵片的性狀、釋放度、含量測定及有關物質的考察，結果均符合控釋片的質量要求。研究結果表明該制劑制備工藝科學、合理、可行，質量標準可控。32關于穩定性研究藥品的穩定性是指原料藥及制劑保持其物理、化學、生物學和微生物學性質的能力。穩定性研究是藥品質量控制研究的主要內容之一，與藥品質量研究和質量標準的建立緊密相關。穩定性試驗包括影響因素試驗光照、高溫、高濕、加速試驗與長期試驗。影響因素試驗結果可知，本品在4500LX光照、60高溫及RH925高濕條件下放置10D，除在高濕條件下片面有吸潮，其他試驗條件下各項考察指標與0D數據比較，均無明顯變化，表明本品在光照、高溫及高濕環境中放置，內在質量均較穩定。由于時間原因，加速試驗僅考察了3個月。通過加速試驗結果可見，本品模擬市售包裝后，在溫度402，RH75條件下放置3個月，各項考察指標與0月檢測結果基本一致，表明本品經加速試驗3個月，質量穩定。對于長期試驗由于留樣時間較短，不能系統的將結果闡述，有待于后續工作的補充。4小結建立高效液相色譜法對洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的含量和有關物質進行測定，同時建立了洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的質量標準。對穩定性初步考察，進行影響因素試驗和加速試驗，考察釋放度、有關物質、含量等均未超出規定范圍，為藥品的生產、包裝、儲存提供了科學依據。第四章洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片在大鼠體內初步藥動學研究隨著科學技術的發展及研究的深入，人們逐漸認識到藥物制劑所產生的藥理效應是受到各種復雜因素的影響，藥效不僅與藥物的化學結構有關，而且還受到各種制劑因素和生物因素的影響。因此，研究藥物在體內的吸收、分布、代謝和排泄過程的各種機理和理論，研究各種劑型因素和生物因素對藥效的影響，對控制藥物制劑的內在質量，確保藥物的最終安全和有效，具有十分重要的理論和現實意義。本章對市售片及自制洛索洛芬鈉滲透泵片的藥代動力學和生物利用度進行考察比較，用藥動學參數CMAX、AUC等來證實洛索洛芬鈉滲透泵片的控釋效果。1儀器與試藥日本島津高效液相色譜儀（VPODS日本島津色譜柱、LC10AT輸液泵、SPD10A紫外檢測器、CSLIGHT色譜工作站）；YKH型渦旋混合器（江西醫療器械廠）；DL802B型離心沉淀機（上海安亭科學儀器廠）。受試制劑洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片（自制）；參比制劑洛索洛芬鈉片（上海三共制藥有限公司）；對照品洛索洛芬鈉對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號100638200401）；肝素鈉（1012500U，天津生物化學制藥廠）；甲醇（色譜純，天津市四有精細化學品有限公司）；其它試劑均為分析純。2方法與結