藍布正抗炎作用的實驗研究

蘭屬植物是日本楊樹和日本楊樹小麥的干燥全草。廣泛分布于云南、貴州、四川等地。你的資源豐富。以全草或根入藥,味辛、甘,性平。具有鎮痛、降壓、調經、祛風除濕、補虛益腎、活血解毒的功能。國內外研究表明,藍布正主治高血壓、小腹痛、感冒咳嗽、腎虛頭暈、崩漏、跌打損傷,風濕腰腿痛等。經大量查閱有關文獻資料,基本掌握國內外研究動態和現狀,尚未見藍布正抗炎作用的報道。昆明種小鼠70只,雌雄各半,體重18～24g,由云南省生物制藥廠提供,許可證號:SCXK滇20050010。1.2統計學和統計方法藍布正總提取物由實驗室自制,每克相當生藥3.19g,臨用時配成含生藥6.38g/100ml、12.76g/100ml和25.52g/100ml。氫化可的松(天津藥業集團新鄭股份有限公司,批號:0406031);阿司匹林腸溶片(昆明云健制藥有限公司生產,批號:20051196);二甲苯(丹東市勝利化工廠,批號:910815)和伊文斯蘭(Fluka進口分裝,批號:821102)。分析天平(上海醫用激光儀器廠,型號:TG328A);722分光光度計(上海第三分析儀器廠)和MP-120-1型電子天平。用SPSS13.0統計軟件處理,采用單因素方差分析(one-wayANOVA)方法。數據均以均數±標準差()表示,以P<0.05作為差異顯著的統計學意義界限。2方法2.1藍布正的抗炎作用2.1.1動物分組與劑量將70只小鼠按照均衡隨機原則分成5組。小鼠所用藥物的劑量與配制方法如下:①N.S.組:按0.2ml/10g的劑量給藥。②氫化可的松組:將氫化可的松注射劑(每支25mg),配成實含氫化可的松0.15g/100ml的溶液,按0.2ml/10g的劑量給藥。③藍布正低劑量組:取藍布正提取物配制成生藥量6.38g/100ml的溶液,按0.2ml/10g的劑量給藥,以生藥計為1.28g/kg。④藍布正中劑量組:取藍布正提取物配制成生藥量12.76g/100ml的溶液,按0.2ml/10g的劑量給藥,以生藥計為2.55g/kg。⑤藍布正高劑量組:取藍布正提取物配制成生藥量25.52g/100ml的溶液,按0.2ml/10g的劑量給藥,以生藥計為5.10g/kg.2.1.2實驗方法取體重18～24g的健康小鼠70只,雌雄各半,隨機分成5組。第1組為空白對照組,給生理鹽水0.2ml/10g;第2組為陽性藥氫化可的松組,劑量為0.03g/kg;第3組為藍布正低劑量組,劑量為1.28g/kg;第4組為藍布正中劑量組,劑量為2.55g/kg;第5組為藍布正高劑量組,劑量為5.10g/kg。每天灌胃給藥1次,連續給藥7d。實驗前禁食(不禁水)6h。末次給藥40min后,用微量進樣器在每只小鼠左耳背面涂50μ1二甲苯,右耳涂等量生理鹽水。30min后,頸椎脫位處死小鼠,剪下兩耳片,用直徑0.7cm打孔器在左右耳片對稱部位打下圓耳片,在分析天平上稱重,以左右圓耳片重量差值作為炎癥腫脹度,同時計算腫脹抑制率,并進行統計學處理。腫脹度=左耳片重-右耳片重腫脹抑制率=[(對照組平均腫脹率-給藥組平均腫脹率)/對照組平均腫脹率]×100%2.2.1實驗方法取體重為18～24g的健康小白鼠60只,雌雄各半,隨機分成5組。第1組為空白對照組,給生理鹽水0.2ml/10g;第2組為陽性藥氫化可的松組,劑量為0.03g/kg;第3組為陽性藥阿司匹林(ASP)組,劑量為0.10g/kg;第4組為藍布正中劑量組,劑量為2.55g/kg;第5組為藍布正高劑量組,劑量為5.10g/kg。每天灌胃給藥1次,連續給藥7d。于末次給藥40min后,各小鼠尾靜脈注射0.5%伊文斯蘭0.1ml/10g并同時腹腔注射0.8%醋酸0.1ml/10g。30min后,頸椎脫位處死小鼠,腹腔注射蒸餾水5ml、空氣1ml,輕輕按摩小鼠腹部1min。剪開腹腔收集5～6ml腹腔液,將腹腔液離心(1500r/min,5min),于722光柵分光光度計(波長為599nm)測定上清液的吸光度OD值。進行組間t檢驗。并計算毛細血管通透性抑制率。毛細血管通透性抑制率=[(對照組平均吸光度-給藥組平均吸光度)/對照組平均吸光度]×100%在對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的炎癥模型中,藍布正顯示出良好的抗炎作用。與N.S.組比較,有極顯著的差異(P<0.01),能明顯抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹度。其抗炎效果與氫化可的松相當(高、中、低劑量組與陽性藥相比,均沒有統計學差異,P>0.05)。本實驗結果中還可以看出,藍布正的抗炎效果與其劑量呈現一個良好的線性關系,其抗炎效果隨劑量的增加而增強(見表1)。與N.S.組比較,藍布正高中劑量組有明顯的抑制醋酸所致毛細血管通透性增加的作用(P<0.05)。與氫化可的松組及ASP組相比均無顯著差異(P>0.05)(見表2)。炎癥是機體對損傷因子所產生的防御反應。在炎癥的早期,這些介質刺激血管,使血管擴張,血管內的液體、蛋白質和白細胞等滲出到組織間隙,隨著滲出的增加,造成組織腫脹。因此,炎性滲出與組織腫脹是炎癥早期的重要病理變化。我們采用二甲苯、醋酸作為致炎因子,觀察藍布正對實驗性腫脹炎性滲出影響,以了解藍布正的抗炎效果。通過上述實驗結果表明,藍布正對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用,對醋酸所致小鼠血管通透性增加也有抑制作用。另有研究表明,藍布正具有明顯的鎮痛作用及抑菌作用,為其開發