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文檔簡介

微生物學實驗海南大學海洋學院實驗細菌的形態和結構觀察實驗目的觀察細菌的菌落特征掌握簡單染色法和細菌涂片方法在油鏡下觀察細菌個體的形態特征實驗的基本原理形態觀察主要包括群體的形態和個體的形態觀察細菌的基本形態主要分為球菌、桿菌、螺旋菌三大類,近年還發現星狀和四方形細菌等。細菌形態受培養時間、培養基成分、濃度、培養溫度、培養時間等發生變化。細菌菌落大多表面光滑濕潤,有光澤,一般菌落較小,質地顏色均勻,同培養基結合不緊密。菌落特征與組成菌落的細胞結構、生長狀況、排列方式、好氣性和運動性直接相關細菌個體微小,較透明,必須染色方可呈現。根據細菌個體形態觀察的不同要求,可將染色分為3種類型:簡單染色、鑒別染色、特殊染色。實驗的基本原理簡單染色法原理:細菌在中性的環境中帶負電荷,用堿性染料(解離時帶正電荷)如美蘭結晶紫等進行染色采用加熱或化學固定兩種方法,使菌體粘附于玻片上,并且增加菌體對染料的親和力實驗材料顯微鏡(顯微鏡燈)、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、吸水紙等0.05%和0.1%呂氏堿性美藍染色液,0.5%番紅染液,中性紅染液,二甲苯,生理鹽水細菌三種形態的染色標本。大腸桿菌,金黃色葡萄球菌,哈氏弧菌和無乳鏈球菌24h液體培養基培養物蓋玻片、凹玻片、接種環、酒精燈四、實驗步驟·簡單染色法(一般染色法)1.菌種:牙垢細菌2涂片3.千燥:自然氣干或酒精燈高處微微加熱4固定5染色:在整個涂面上滴加齊氏石炭酸復紅,染色1分鐘6水洗:傾去染液,用自來水細流沖洗至流下的水中無染料顏色為止7干燥:空氣中自然干燥8鏡檢:在油鏡下觀察牙垢中的各種細菌形態并繪圖圖2-1涂片無菌過程操作四、實驗步驟油鏡的使用用前檢查:零件是否齊全,鏡頭是否清潔。2調節光亮度3低倍鏡觀察:粗調、細調4依次再進行中倍、高倍觀察5油鏡觀察:高倍鏡下找到清晰的物象后,提升聚光鏡在標本中央滴一滴香柏油,使油鏡鏡頭浸入香柏油中,細調至看清物象為止。6.換片:另換新片,必須從第三條開始操作7用后復原:觀察完畢,上懸鏡筒,先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油,然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油,最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯,后將鏡體全部復原。四、實驗步驟顯微鏡保養和使用中的注意事項1不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞2.鏡面只能用擦鏡紙擦,不能用手指或粗布,以保證光潔度3觀察標本時,必須依次用低、中、高倍鏡,最后用油鏡當目視接目鏡時,特別在使用油鏡時,切不可使用粗調節器,以免壓碎玻片或損傷鏡面4觀察時,兩眼睜開,養成兩眼能夠輪換觀察的習慣,以免眼睛疲勞,并且能夠在左眼觀察時,右眼注視繪圖5拿顯微鏡時,一定要右手拿鏡臂,左手托鏡座,不可單手拿,更不可傾斜拿6顯微鏡應存放在陰涼干燥處,以免鏡片滋生霉菌而腐蝕鏡片四、實驗步驟細菌三種基本形態的觀察菌落形態觀察和個體形態觀察,這里主要指個體形態的觀察1

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