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第九章親和純化技術利用生物分子間的特異性結合作用的原理進行生物物質分離純化的技術稱為親和純化技術(Affinitypurification)QuitPreviousmenuChromatographGelfiltrationionexchangeAffinityPages759to761:Figures18.24to18.26Columnchromatographyincludesavarietyofpowerfultechniquestoseparatingmixturesofproteins.Typicallyaglasscolurmnisfilledwithbeadsofaninertmatrix.Themixtureofproteinstobepurifiedisdissolvedinsolutionandpassedslowlythroughthecolumn.Proteinsthatinteractwiththematrixaresloweddown.Thosethatdonot,pasthroughmorequicklySelectoneofthetypesolchromatography技術要點(1)找與底物專可逆結合的配基(2)將配基通過共配基固定競價鍵偶聯到基質(3)配基與底物吸嗽(4)洗脫目標物。親和純化技術親和層析(Affinitychromatography)親和過濾(膜分離)親和分配(雙水相萃取)親和反膠團萃取(反膠團萃取)親和沉淀(沉淀)親和電泳(電泳)第一節親和層析(affinityChromatography利用生物大分子物質具有與某些相應的分子專一性可逆結合的特性而建立的層析技術適用于從成份復雜且雜質含量遠大于目標物的混合物中提純目標物。特點經過一次處理可得到高純度活性物質設備要求不高、操作簡便、特異性強、分離速度快、分離效果好、分離條件溫和親和吸附劑通用性較差,專親和吸附劑:載體配基在親和層析中起可逆結合的特異gand(A)性物質稱為配基ouplingreactiongandSolidmatrix與配基結合的層析介質稱為(Matrix)。、親和層析的原理(1)配基固定化:配基x與載體偶聯,結合成具有ooo0BWashingElution特異親和性的分離介質。000Sample(2)吸附樣品:親和層析介質選擇性吸附生物活性物質(3)選擇適宜〖的條件使被吸附物活性物9●0●質解吸。0000B◆◆◆親和層析載體(一)、親和層析對載體的要求(1)充分功能化,與配
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