梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查與技術(shù)規(guī)范

朱穗蘭2013年3月2日主要內(nèi)容梅毒概述梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范梅毒概述（一）性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長(zhǎng)，傳染性越來(lái)越小到感染后2年，通過(guò)性接觸一般無(wú)傳染性母嬰傳播在妊娠7周時(shí)，梅毒螺旋體即可通過(guò)胎盤(pán)傳染未經(jīng)治療者，雖已無(wú)性傳播（病期>2年），但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒,病期越長(zhǎng)，傳染性越小;梅毒概述（二）一期梅毒硬下疳和(或)腹股溝淋巴結(jié)腫大二期梅毒

可有一期梅毒史，病期在2年以?xún)?nèi)有多形性皮疹、扁平濕疣等三期（晚期）梅毒可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上皮膚黏膜損害等，包括神經(jīng)梅毒、心血管梅毒隱性（潛伏）梅毒早期：病期在2年以?xún)?nèi)；晚期：病期在2年以上。無(wú)任何梅毒性的癥狀和體征胎傳（先天）梅毒早期：在2歲前發(fā)生；晚期：在2歲以后發(fā)病。胎傳隱性梅毒：無(wú)臨床表現(xiàn)梅毒概述（三）疑似病例、確證病例診斷依據(jù)：病史癥狀實(shí)驗(yàn)室檢查梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)診斷有決定性意義梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類(lèi)(1)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性梅毒抗體）(2)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）兩類(lèi)方法。為什么梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷需要兩類(lèi)血清學(xué)檢測(cè)方法？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來(lái)的一種類(lèi)脂成分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完全抗原，刺激機(jī)體在3周-4周產(chǎn)生類(lèi)脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。主要是IgM和IgG混合抗體。抗體的作用無(wú)保護(hù)作用，治療監(jiān)測(cè)。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)為什么有定性和定量?jī)煞N檢測(cè)法？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原基本成分都是一樣方法包括：（1）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）（3）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)等。基本成分是心磷脂卵磷脂和膽固醇抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見(jiàn)上述方法的敏感性和特異性都基本相似試驗(yàn)特點(diǎn)原理和成分分與試驗(yàn)相相同血清不需要要滅活不需要顯微微鏡觀測(cè)結(jié)結(jié)果可作作定定量量試試驗(yàn)驗(yàn)有現(xiàn)現(xiàn)成成的的試試劑劑盒盒攜攜帶帶方方便便操作作簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單價(jià)格格便便宜宜操作作要要點(diǎn)點(diǎn)儀器器：：水平平旋旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)儀儀。。定性性實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)加樣樣：：吸吸取取50ul血血清清(漿)放在在卡卡片片圈圈中中，，并并均均勻勻地地涂涂布布在在整整個(gè)個(gè)圈圈內(nèi)內(nèi)加抗抗原原：：將將抗抗原原輕輕輕輕搖搖勻勻，，用用9號(hào)針針頭頭加加1滴抗抗原原反應(yīng)應(yīng)：：將將卡卡片片置置水水平平旋旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)儀儀旋旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)8分鐘鐘，，立立即即在在亮亮光光下下觀觀察察結(jié)結(jié)果果3.定量量試試驗(yàn)驗(yàn)稀釋釋夜夜準(zhǔn)準(zhǔn)備備：：在在圈圈內(nèi)內(nèi)加加入入50uL生理理鹽鹽水水（根根據(jù)據(jù)需需要要確確定定稀稀釋釋度度）），，勿勿將將鹽鹽水水涂涂開(kāi)開(kāi)。。加樣樣：：吸吸取取50uL血清清（（漿漿））與與各各圈圈中中鹽鹽水作作系系列列稀稀釋釋?zhuān)⒉⑼客坎疾颊麄€(gè)個(gè)圈圈內(nèi)內(nèi)。。下同同定定性性試試驗(yàn)驗(yàn)。。非梅梅毒毒螺螺旋旋體體抗抗原原血血清清學(xué)學(xué)試試驗(yàn)驗(yàn)結(jié)結(jié)果果判判斷斷RPRTRUST非梅梅毒毒螺螺旋旋體體抗抗原原血血清清學(xué)學(xué)試試驗(yàn)驗(yàn)臨臨床床意意義義早期期梅梅毒毒硬硬下下疳疳出出現(xiàn)現(xiàn)1周周-2周周后后，，血血清清可可呈呈陽(yáng)陽(yáng)性性。。經(jīng)治治療療后后血血清清滴滴度度可可下下降降并并轉(zhuǎn)陰性性，，故故可可作作為為療療效效觀觀察察、、判判愈愈、、復(fù)復(fù)發(fā)發(fā)或或再再感感染染的的指指征征。。為什么要做定定量檢測(cè)？非梅毒螺旋體體抗原血清學(xué)學(xué)試驗(yàn)臨床意意義一期梅毒1年年后轉(zhuǎn)為陰性性二期梅毒2年年后轉(zhuǎn)為陰性性。晚期梅毒治治療后血清清滴度下降緩緩慢，2年后后約50%病病人血清反應(yīng)應(yīng)仍為陽(yáng)性。。TRUST結(jié)結(jié)果解釋示意意圖假陽(yáng)性問(wèn)題假陽(yáng)性：非梅毒患者者的血清反應(yīng)應(yīng)呈陽(yáng)性①技術(shù)性假陽(yáng)性性由于標(biāo)本的保保存不當(dāng)（如如細(xì)胞污染或或溶血）、試試劑質(zhì)量差或或過(guò)期、或?qū)崒?shí)驗(yàn)室操作錯(cuò)錯(cuò)誤所造成。。②生物學(xué)假陽(yáng)性性是由于患者有有其他疾病或或生理狀態(tài)發(fā)發(fā)生變化，使使梅毒血清試試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性性某些疾病：結(jié)結(jié)核、瘧疾、、肝病、紅斑斑狼瘡、流感感、肺炎、類(lèi)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)節(jié)炎、風(fēng)濕性性心臟病、風(fēng)風(fēng)疹、系統(tǒng)性性硬化癥等，，疾病發(fā)展過(guò)過(guò)程中釋放心心磷脂到血液液中呈假陽(yáng)性。老年人。生理機(jī)能發(fā)生生變化：少數(shù)數(shù)孕婦也可發(fā)發(fā)生生物學(xué)假假陽(yáng)性。梅毒假陽(yáng)性反反應(yīng)的處理技術(shù)性假陽(yáng)性性反應(yīng)一般是是由于操作錯(cuò)錯(cuò)誤引起的假假陽(yáng)性反應(yīng)，，經(jīng)過(guò)重復(fù)試試驗(yàn)即可除外外。對(duì)生物學(xué)假陽(yáng)陽(yáng)性反應(yīng)，應(yīng)應(yīng)做TPHA（TPPA）等等試驗(yàn)進(jìn)行排排除。前帶現(xiàn)象指非梅毒螺旋旋體抗原血清清試驗(yàn)中，有有時(shí)血清中存存在高濃度的的抗體時(shí)出現(xiàn)現(xiàn)的弱陽(yáng)性、、不典型或陰陰性反應(yīng)的結(jié)結(jié)果，而臨床床上又象二期期梅毒，此時(shí)時(shí)將血清稀釋釋后再進(jìn)行試試驗(yàn)，出現(xiàn)了了陽(yáng)性的結(jié)果果，該現(xiàn)象稱(chēng)稱(chēng)為前帶現(xiàn)象象。處理：將血清稀釋后后再進(jìn)行試驗(yàn)驗(yàn)。耐血清性（血血清固定）指經(jīng)抗梅毒治治療后，非梅梅毒螺旋體抗抗原血清試驗(yàn)驗(yàn)在一定時(shí)期期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)。。早期的耐血血清性常與治治療量不足或或不規(guī)則治療療、復(fù)發(fā)、再再感染或有神神經(jīng)系統(tǒng)梅毒毒等因素有關(guān)關(guān)。梅毒螺旋體抗抗原血清學(xué)試試驗(yàn)梅毒螺旋體抗抗原血清學(xué)試試驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆顆粒凝集試驗(yàn)驗(yàn)(TPPA)梅毒螺旋體血血球凝集試驗(yàn)驗(yàn)(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫疫吸附試驗(yàn)（（ELISA）梅毒免疫層析析法-梅毒快快速檢測(cè)(RT)熒光螺旋體抗抗體吸收試驗(yàn)驗(yàn)（FTA-ABS）化學(xué)發(fā)光免疫疫分析法（CLIA）梅毒螺旋體蛋蛋白印跡試驗(yàn)驗(yàn)（WB）TPPATPPA試驗(yàn)驗(yàn)用梅毒螺旋旋體致敏明膠膠顆粒，此致致敏顆粒與人人血清中的抗抗梅毒螺旋體體抗體結(jié)合，，產(chǎn)生可見(jiàn)的的凝集反應(yīng)，，具有較高的的敏感性和特特異性。TPPA是目目前WHO認(rèn)認(rèn)可的梅毒抗抗原血清學(xué)試試驗(yàn)的“金標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)”，常用用于新方法、、新試劑評(píng)價(jià)價(jià)的參照標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)。TPPA(TPHA)試驗(yàn)原理示意意圖梅毒螺旋體抗抗原血清試驗(yàn)驗(yàn)的臨床意義義一般情況下，，一旦梅毒患患者梅毒螺旋旋體抗原血清清試驗(yàn)呈陽(yáng)性性，即使經(jīng)過(guò)過(guò)正規(guī)有效治治療治，仍將將終身陽(yáng)性。。所以TPPA等試試驗(yàn)不能作為為療效觀察的的指標(biāo)。作為非梅毒螺螺旋體抗原血血清試驗(yàn)初篩篩陽(yáng)性標(biāo)本的的確證試驗(yàn)。。TPPA等陽(yáng)陽(yáng)性不能區(qū)分分既往感染和和現(xiàn)癥感染，，應(yīng)結(jié)合非梅梅毒螺旋體抗抗原血清試驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行診診斷。TPPA結(jié)果果解釋示意圖圖梅毒血清學(xué)試試驗(yàn)結(jié)果解釋釋梅毒血清學(xué)試試驗(yàn)結(jié)果解釋釋梅毒檢測(cè)技術(shù)術(shù)規(guī)范簡(jiǎn)介全國(guó)梅毒檢測(cè)測(cè)技術(shù)規(guī)范第一章梅毒檢測(cè)樣品品的采集和處處理第二章梅毒血清學(xué)檢檢測(cè)第三章梅毒病原體顯顯微鏡檢測(cè)第四章梅毒病原體核核酸檢測(cè)第五章實(shí)驗(yàn)室生物安安全第六章梅毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室質(zhì)量管理理第一章樣品品的采集和處處理血清、血漿、、全血及腦脊脊液:梅毒血清學(xué)檢檢測(cè)或核酸檢檢測(cè)皮損部位組織織液、淋巴穿穿刺液:梅毒病原體檢檢測(cè)或核酸檢檢測(cè)。梅毒血清學(xué)試試驗(yàn)適用范圍圍第二章梅毒毒血清學(xué)檢測(cè)測(cè)檢測(cè)目的:臨床診斷、血血液篩查、流流行病學(xué)監(jiān)測(cè)測(cè)以臨床診斷為為目的的檢測(cè)測(cè)是為了確定定梅毒感染的的狀況。以血液篩查為為目的的檢測(cè)測(cè)是為了防止止梅毒的經(jīng)血血傳播。以流行病學(xué)監(jiān)監(jiān)測(cè)為目的的的檢測(cè)是為了了調(diào)查梅毒血血清學(xué)感染率率和發(fā)病率。。梅毒實(shí)驗(yàn)室檢檢測(cè)策略選擇擇根據(jù)目的選擇擇檢測(cè)方法及及檢測(cè)策略。。可采用任何一一類(lèi)梅毒血清清學(xué)檢測(cè)方法法作為篩查試試驗(yàn)。以臨床診斷為為目的檢測(cè)策策略一以臨床診斷為為目的檢測(cè)策策略二策略一和策略略二比較第三章梅毒毒體病原學(xué)檢檢測(cè)檢測(cè)方法暗視野顯微鏡鏡檢查鍍銀染色檢查查第四章梅毒毒核酸檢測(cè)可對(duì)血漿、血血清、皮損部部位組織液、、淋巴穿刺液液及腦脊液等等標(biāo)本的梅毒毒螺旋體核酸酸檢測(cè)在早期梅毒、、神經(jīng)梅毒和和先天梅毒等等診斷，以及及螺旋體現(xiàn)癥癥感染和既往往感染鑒別診診斷中具有一一定的價(jià)值可應(yīng)用于梅毒毒螺旋體的耐耐藥性監(jiān)測(cè)、、菌株流行病病學(xué)分型。第五章實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室生物安全全梅毒的生物危危害梅毒螺旋體屬屬第三類(lèi)病原原微生物，一一般情況下對(duì)對(duì)人、動(dòng)物或或者環(huán)境不構(gòu)構(gòu)成嚴(yán)重危害害，傳播風(fēng)險(xiǎn)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室感染后很很少引起嚴(yán)重重疾病，是有有有效治療和和預(yù)防方法的的致病微生物物梅毒相關(guān)檢測(cè)測(cè)的生物安全全級(jí)別為了保證安全全，對(duì)臨床和和現(xiàn)場(chǎng)未知樣樣本的梅毒血血清學(xué)檢測(cè)應(yīng)應(yīng)在符合Ⅱ級(jí)級(jí)生物安全實(shí)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要要求的實(shí)驗(yàn)室室中進(jìn)行。如如有艾滋病檢檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，，可以在艾滋滋病抗體檢測(cè)測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)進(jìn)行。第六章實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室質(zhì)量管理理質(zhì)量保證質(zhì)量評(píng)估試劑評(píng)價(jià)質(zhì)量保證檢測(cè)方法和試試劑的選擇用于臨床診斷斷的檢測(cè)方法法應(yīng)使用經(jīng)國(guó)國(guó)家食品藥品品監(jiān)督管理局局注冊(cè)批準(zhǔn)的的試劑，應(yīng)選選擇敏感性高高、特異性好好的試劑。性性病參比實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室和省級(jí)性性病中心實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室應(yīng)定期組組織開(kāi)展梅毒毒診斷試劑的的臨床質(zhì)量評(píng)評(píng)價(jià)和新方法法與技術(shù)的評(píng)評(píng)估。質(zhì)量評(píng)價(jià)所有梅毒檢測(cè)測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參參加外部質(zhì)量量評(píng)價(jià)省級(jí)中心實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室應(yīng)參加國(guó)國(guó)家級(jí)職能工工作考核和PT其他實(shí)驗(yàn)室應(yīng)應(yīng)參加省級(jí)職職能工作考核核和PT。質(zhì)量評(píng)價(jià)考評(píng)組織單位位根據(jù)PT考考核結(jié)果、職職能工作評(píng)價(jià)價(jià)結(jié)果及對(duì)部部分實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)評(píng)價(jià)情況況，匯總各實(shí)實(shí)驗(yàn)室的最終終考評(píng)結(jié)果，，上報(bào)相關(guān)機(jī)機(jī)構(gòu)。考評(píng)單位應(yīng)將將考評(píng)得分及及扣分原因反反饋各參評(píng)實(shí)實(shí)驗(yàn)室，以適適當(dāng)?shù)姆绞皆谠谶m當(dāng)范圍內(nèi)內(nèi)公開(kāi)發(fā)布考考評(píng)結(jié)果。為為合格者頒發(fā)發(fā)合格證書(shū)。。小結(jié)1、非梅毒螺螺旋體抗原血血清學(xué)試驗(yàn)陽(yáng)陽(yáng)性往往是梅梅毒現(xiàn)癥感染染者，臨床上上即可開(kāi)展治治療。2、非梅毒螺螺旋體抗原血血清學(xué)試驗(yàn)定定量試驗(yàn)可作作為療效觀察察的指標(biāo)。3、完善操作的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)化，杜絕有有個(gè)人特點(diǎn)的的操作。4、根據(jù)目的的選擇檢測(cè)方方法及檢測(cè)策策略。可采用用任何一類(lèi)梅梅毒血清學(xué)檢檢測(cè)方法作為為篩查試驗(yàn)。。5、臨床上采用兩兩種方法同時(shí)時(shí)檢測(cè)，可以以快速診斷梅梅毒，使病人人能夠得到及及時(shí)治療。9、靜夜四四無(wú)鄰，，荒居舊舊業(yè)貧。。。12月-2212月-22Wednesday,December28,202210、雨中中黃葉葉樹(shù)，，燈下下白頭頭人。。。21:26:3221:26:3221:2612/28/20229:26:32PM11、以以我我獨(dú)獨(dú)沈沈久久，，愧愧君君相相見(jiàn)見(jiàn)頻頻。。。。12月月-2221:26:3221:26Dec-2228-Dec-2212、故人江海別別，幾度隔山山川。。21:26:3221:26:3221:26Wednesday,December28,202213、乍見(jiàn)翻疑夢(mèng)夢(mèng)，相悲各問(wèn)問(wèn)年。。12月-2212月-2221:26:3221:26:32December28,202214、他他鄉(xiāng)鄉(xiāng)生生白白發(fā)發(fā)，，舊舊國(guó)國(guó)見(jiàn)見(jiàn)青青山山。。。。28十十二二月月20229:26:32下下午午21:26:3212月月-2215、比不了了得就不不比，得得不到的的就不要要。。。十二月229:26下午午12月-2221:26December28,202216、行動(dòng)出成果果，工作出財(cái)財(cái)富。。2022/12/2821:26:3221:26:3228December202217、做前，能能夠環(huán)視四四周；做時(shí)時(shí)，你只能能或者最好好沿著以腳腳為起點(diǎn)的的射線(xiàn)向前前。。9:26:32下下午9:26下下午21:26:3212月-229、沒(méi)有有失敗敗，只只有暫暫時(shí)停停止成成功！！。12月月-2212月月-22Wednesday,December28,202210、很多多事情情努力力了未未必有有結(jié)果果，但但是不不努力力卻什什么改改變也也沒(méi)有有。。。21:26:3221:26:3221:2612/28/20229:26:32PM11、成功功就是是日復(fù)復(fù)一日日那一一點(diǎn)點(diǎn)點(diǎn)小小小努力力的積積累。。。12月月-2221:26:3221:26Dec-2228-Dec-2212、世世間間成成事事，，不不求求其其絕絕對(duì)對(duì)圓圓滿(mǎn)滿(mǎn)，，留留一一份份不不足足，，可可得得無(wú)無(wú)限限完完美美。。。。21:26:3221:26:3221:26Wednesday,December28,202213、不知香積積寺，數(shù)里里入云峰。。。12月-2212月-2221:26:3221:26:32December28,202214、意志堅(jiān)強(qiáng)的的人能把世界界放在手中像像泥塊一樣任任意揉捏。28十二月月20229:26:32下午21:26:3212月-2215、楚塞三三湘接，，荊門(mén)九九派通。。。。十二月229:26下午午12月-2221:26December28,202216、少年年十五五二十十時(shí)，，步行行奪得得胡馬馬騎。。。2022/12/2821:26:3221:26:3228December202217、空山新雨雨后，天氣氣晚來(lái)秋。。。9:26:32下下午9:26下下午21:26:3212月-229、楊柳柳散和和風(fēng)，，青山山澹吾吾慮。。。12月月-2212月月-22Wednesday,December28,202210、閱閱讀讀一一切切好好書(shū)書(shū)如如同同和和過(guò)過(guò)去去最最杰杰出出的的人人談?wù)勗?huà)話(huà)。。21:26:3321:26:3321:2612/28/20229:26:33PM11、越是沒(méi)有有本領(lǐng)的就就越加自命命不凡。12月-2221:26:3321:26Dec-2228-Dec-2212、越越是是