工業微生物學實驗試題(附解析)-生物工程-生物技術-制藥工程-天津科技大學-03題號一二三四五六七八總成績得分得分一、名詞解釋（共20分，每小題4分）1.顯微鏡分辯力

2.鑒別培養基3.無菌操作4.大腸菌群:5.細菌菌落總數:得分二、填空題（共20分，每空0.5分）1.根據顯微鏡物鏡與標本之間的介質的性質不同,物鏡可分為物鏡和油浸系物鏡.前者是指物鏡與標本之間的介質是。后者是指物鏡與標本之間的介質是一種和玻璃折光率相近的，實驗中使用油浸系物鏡最常用的放大倍數是。利用油鏡進行細菌的形態觀察,實驗結束后,要用擦鏡紙蘸取擦拭油鏡鏡頭。2.配制好的培養基要立即進行,經滅菌的培養基要放入培養箱中做,以確定培養基是否可用。3.培養基按其來源主要分為培養基,培養基和培養基。4.實驗室中常用的干熱滅菌方法有兩種,如接種工具一般采用滅菌法,玻璃器皿常采用滅菌法,具體做法是將玻璃器皿放入內。5.微生物的接種方法有很多,對于細菌來講,要在平板上獲得單個的菌落,通常使用接種方式為。接種后的平板一般要倒置于培養箱中進行培養,其倒置培養的原因是。6.革蘭氏染色的一般過程主要包括,固定,,,,，水洗和鏡檢等步驟。在操作過程中,最關鍵的步驟是。經革蘭氏染色后,大腸桿菌被染成色,八疊球菌被染成色。7.請寫出以下菌種的拉丁學名:大腸桿菌,枯草芽孢桿菌,釀酒酵母。8.顯微測微尺主要由測微尺和測微尺組成.在進行細胞大小測定之前,測微尺要先進行標定。9.測定酵母細胞死亡率時,所用的染料是,染色2-3分鐘后,于顯微鏡下觀察,其中變藍的細胞為細胞。10.麥氏計數板的規格為，在麥氏計數板一個滴加稀釋10倍的樣品,

按對角線方位,左上,右上,左下,右下四個大格的細胞數分別為64個,100個,80個,96個.則每毫升菌液中所含的酵母細胞數為。11.霉菌菌絲觀察主要利用作介質。12.在顯微鏡下易于觀察到霉菌的無性孢子,其中毛霉和根霉的無性孢子是,青霉和曲霉的無性孢子是。13.在細菌生理生化實驗中,三糖鐵高層瓊脂中含有的糖主要有葡萄糖,蔗糖,

乳糖三種糖.其中,是另外兩種糖含量的1/10倍.其斜面含有指示劑酚紅,它在pH小于6.8時為黃色,大于8.4時為紅色,傷寒沙門氏菌在該培養基中生長一定時間后,其斜面的顏色為色,大腸桿菌為色。14.在進行酵母菌細胞出芽率測定的時候,芽體數10個,酵母細胞數為40個,則該樣品中酵母細胞的出芽率為。得分三、選擇題（共8分每題1分）1.配制固體培養基時所用凝固劑含量一般為（），半固體培養基常用凝固劑含量一般為（）。A．1.5%-2%

B.5%-7%

C.0.6%-0.8%

D.15%-20%2.干熱滅菌常用的滅菌溫度是（），滅菌時間為4-6小時。A.120℃

B.121℃

C.140℃

D.115℃3.下列培養基中，哪種培養基不是培養酵母常用的培養基（）？A.麥芽汁培養基B.馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基C.YEPD培養基D.

牛肉膏蛋白胨培養基4.下列最適于霉菌生長的培養溫度為（）A．28℃

B.35℃C.25℃

D.37℃5.實驗過程中，霉菌的接種工具一般為（），接種方式為（）。A.接種針

B.接種鉤

C.劃直線

D.點接6.明膠液化實驗，明膠的水解是由于細菌所產生的（）的作用。A.脂肪酶

B.纖維素酶

C.蛋白酶

D.淀粉酶7.斜面試管的標簽應貼在斜面的正上方，距管口（）處。A.1cm-1.5cm

B.1.5cm-2cm

C.2cm-2.5cm

D.2.5cm-3cm8.下列霉菌中有足細胞的霉菌為（）。A.毛霉

B.青霉

C.根霉

D.曲霉得分三、問答題（共52分）1.簡要說明濕熱滅菌為什么比干熱滅菌更加有效?(6分)2.以大腸桿菌和產氣腸桿菌為例，說明其在VP實驗與MR實驗中的結果為什么剛好相反（7分）3.在啤酒生產過程中,常需要檢測發酵液中的酵母細胞濃度,簡述不同的計數方法并說明其優缺點（10分）.4.簡述目鏡測微尺的標定過程。（10分）5.以假絲酵母為例,說明小室培養的操作過程.(7分)6.現有綠茶一瓶,簡要說明該產品中的細菌菌落總數的檢驗程序及測定過程.(12)試題解析一、名詞解釋（共20分，每小題4分）1.顯微鏡分辨力指顯微鏡分辨被檢物體細微結構的能力,也就是判斷兩個物體點之間最短距離的本領,以R表示.計算公式為:R=λ/(2N.A)=λ/[2n·sin(α/2)]2.鑒別培養基一類含有某種代謝產物指示劑的培養基,微生物在這類培養基上生長后,分泌的代謝產物與指示劑起反應產生某種明顯的特征性變化,根據這種變化將該種微生物與其它微生物區分開來.3.無菌操作指用滅過菌的接種工具,在無菌條件下,接種含菌材料于滅過菌的培養基上,這一過程叫無菌操作.4.大腸菌群大腸菌群系指一群在37℃,24小時能發酵乳糖,產酸,產氣,需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌5.細菌菌落總數被檢樣品經過處理后,在一定條件下培養后,所得1克或1mL檢樣中所含細菌的菌落總數.得分二、填空題（共20分，每空0.5分）1.根據顯微鏡物鏡與標本之間的介質的性質不同,物鏡可分為干燥系物鏡和油浸系物鏡.前者是指物鏡與標本之間的介質是空氣。后者是指物鏡與標本之間的介質是一種和玻璃折光率相近的香柏油，實驗中使用油浸系物鏡最常用的放大倍數是100倍。利用油鏡進行細菌的形態觀察,實驗結束后,要用擦鏡紙蘸取二甲苯擦拭油鏡鏡頭。2.配制好的培養基要立即進行濕熱滅菌,經滅菌的培養基要放入培養箱中做無菌檢查，以確定培養基是否可用。3.培養基按其來源主要分為天然培養基,合成培養基和半合成培養基。4.實驗室中常用的干熱滅菌方法有兩種,如接種工具一般采用灼燒滅菌法,玻璃器皿常采用干熱滅菌法,具體做法是將玻璃器皿放入干熱滅菌箱內。5.微生物的接種方法有很多,對于細菌來講,要在平板上獲得單個的菌落,通常使用接種方式為三區劃線。接種后的平板一般要倒置于培養箱中進行培養,其倒置培養的原因是防止冷凝水沖走菌落。6.革蘭氏染色的一般過程主要包括制片,固定,結晶紫初染,碘液媒染,乙醇脫色,番紅復染，水洗和鏡檢等步驟。在操作過程中,最關鍵的步驟是脫色。經革蘭氏染色后,大腸桿菌被染成紅色,八疊球菌被染成紫色。7.請寫出以下菌種的拉丁學名:大腸桿菌E.coli,枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis,釀酒酵母Saccharomycescerevisiae。8.顯微測微尺主要由目鏡測微尺和鏡臺測微尺組成.在進行細胞大小測定之前,目鏡測微尺要先進行標定。9.測定酵母細胞死亡率時,所用的染料是美藍染液,染色2-3分鐘,于顯微鏡下觀察,其中變藍的細胞為死細胞。10.麥氏計數板的規格為16×25

，在麥氏計數板一個滴加稀釋10倍的樣品,

按對角線方位,左上,右上,左下,右下四個大格的細胞數分別為64個,100個,80個,96個.則本次檢測的酵母細胞濃度為

1.4×107個/mL

。11.霉菌菌絲觀察主要利用乳酸苯酚油作介質。12.在顯微鏡下易于觀察到霉菌的無性孢子,其中毛霉和根霉的無性孢子是孢子囊孢子,青霉和曲霉的無性孢子是分生孢子。13.在細菌生理生化實驗中,三糖鐵高層瓊脂中含有的糖主要有葡萄糖,蔗糖,

乳糖三種糖.其中,葡萄糖是另外兩種糖含量的1/10倍.其斜面含有指示劑酚紅,它在pH小于6.8時為黃色,大于8.4時為紅色,傷寒沙門氏菌在該培養基中生長一定時間后,其斜面的顏色為紅色,大腸桿菌為黃色。14.在進行酵母菌細胞出芽率測定的時候,芽體數10個,酵母細胞數為40個,則該樣品中酵母細胞的出芽率為

25%

。得分三、選擇題（共8分每題1分）1.配制固體培養基時所用凝固劑含量一般為（A），半固體培養基常用凝固劑含量一般為（C）。A．1.5%-2%

B.5%-7%

C.0.6%-0.8%

D.15%-20%2.干熱滅菌常用的滅菌溫度是（C），滅菌時間為4-6小時。A.120℃

B.121℃

C.140℃

D.115℃3.下列培養基中，哪種培養基不是培養酵母常用的培養基（D

）？A.麥芽汁培養基

B.馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基C.YEPD培養基

D.

牛肉膏蛋白胨培養基4.下列最適于霉菌生長的培養溫度為（A

）。A．28℃

B.35℃C.25℃

D.37℃5.實驗過程中，霉菌的接種工具一般為（B

），接種方式為（D）。A.接種針

B.接種鉤

C.劃直線

D.點接6.明膠液化實驗，明膠的水解是由于細菌所產生的（C

）的作用。A.脂肪酶

B.纖維素酶

C.蛋白酶

D.淀粉酶7.斜面試管的標簽應貼在斜面的正上方，距管口（D

）處。A.1cm-1.5cm

B.1.5cm-2cm

C.2cm-2.5cm

D.2.5cm-3cm8.下列霉菌中有足細胞的霉菌為（D）。A.毛霉

B.青霉

C.根霉

D.曲霉得分四、問答題（共52分）1.簡要說明濕熱滅菌為什么比干熱滅菌更加有效?(6分)在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，其原因有三：一是濕熱中細菌菌體吸收水分，蛋白質較易凝固，因蛋白質含水量增加，所需凝固溫度降低（2分），二是濕熱的穿透力比干熱大（2分）；三是濕熱的蒸汽有潛熱存在，每1克水在100℃時，由氣態變為液態時可放出2．26kJ（千焦）的熱量。這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而增加滅菌效力（2分）。3.以大腸桿菌和產氣腸桿菌為例，說明其在VP實驗與MR實驗中的結果為什么剛好相反（7分）多數細菌能夠分解葡萄糖,但分解葡萄糖的途徑和產物卻不完全相同。（2分）例如大腸桿菌能夠利用分解葡萄糖產生丙酮酸,丙酮酸繼續代謝可進一步生成其它的有機酸,大腸桿菌所產生的酸能使培養基的pH降到4.2或更低,從而使甲基紅指示劑變成紅色,顯示MR試驗陽性（2分）.而產氣腸桿菌在在利用葡萄糖生成丙酮酸后,一部分丙酮酸脫羧生成中性的乙酰甲基甲醇,在強堿性環境中,被空氣中氧氣氧化,生成雙乙酰,雙乙酰與蛋白胨中的精氨酸胍基作用生成紅色化合物,V-P試驗結果為陽性（2分）.而大腸桿菌不能生成中性化合物,因此V-P試驗陰性（1分）,而產氣腸桿菌中的丙酮酸不能進一步分解生成大量的有機酸,因此MR試驗陰性（1分）.4.在啤酒生產過程中,常需要檢測發酵液中的酵母細胞濃度,簡述不同的計數方法,過程,并說明其優缺點（10分）①直接計數法（1分）,主要利用血球計數板進行計數,計數結果即包括活細胞數,也包括死細胞數（2分）.優點:快速,簡便;缺點:難以確切知道活細胞數（2分）.②間接計數法（1分）,也稱活細胞計數法,主要是將樣品稀釋,利用傾注法倒平板,先將稀釋過的樣品倒在平皿內,然后將冷卻至45℃的培養基注入平皿,輕輕搖勻,使之混和（2分）.優點是反映真實,缺點是耗時太長,且易有人為誤差（2分）.5.簡述目鏡測微尺的標定過程（10分）(1)把接目鏡的上透鏡旋開，將目鏡測微尺輕輕放入接目鏡中隔板上，使有刻度的一面朝下。(2)將鏡臺測微尺放在顯微鏡的載物臺上，使有刻度的一面朝上。(3)先用低倍鏡觀察，對準焦距，待看清鏡臺測微尺的刻度后，轉動目鏡，使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度相平行，并使二尺左邊的一條線重合，向右尋找另外二尺相重合的直線。(4)記錄兩條重合刻度間的目鏡測微尺的格數和鏡臺測微尺的格數。(5)目鏡測微尺每格長度的計算：按下面的公式計算。（每步2分）6.以假絲酵母為例,說明小室培養的操作過程.(7分)①取一培養皿,內放一層吸20%的甘油或水的濾紙,其上放一玻璃U形管;（1分）②從酒精浸泡的干凈載玻片中有鑷子夾取一塊,燃燒滅菌,放在U形管上;（1分）③首先將PDA半固體培養基溶化,冷卻至45℃并保溫,取假絲酵母一環按液體接種方式接種于其內,用酒精消毒的玻璃棒蘸取一滴已接種假絲酵母的PDA,迅速滴到已滅過菌的載玻片上,侍凝固后,用火焰燒過的蓋玻片輕蓋于其上,輕壓,要求中央培養基直徑不大于0.5cm,蓋玻片和載玻片之間的距離不超過0.5mm.制好片后,蓋好皿蓋.（4分）④于28℃培養,培養過