DepartmentofMicrobiology,HarbinMedicalUniversityMedicalMicrobiology醫學微生物學DepartmentofMicrobiology,GMC第9章呼吸道傳輸病原微生物第8節呼吸道路徑傳輸其它細菌第9章呼吸道傳輸病原微生物1、棒狀桿菌屬Corynebacterium白喉棒狀桿菌（C．dephtheriae）類白喉桿菌（diphtheroidbacilli）白喉棒狀桿菌Corynebacterium.dephtheriae形態與染色革蘭陽性，細長彎曲，一端或兩端膨大呈棒狀美藍或奈瑟染色，菌體兩端或一端可見著色較深異染顆粒培養特征需氧或兼性厭氧呂氏培養基亞碲酸鉀（K2TeO2·3H2O）血瓊脂平板變異、抵抗力變異形態、菌落和毒力S型變為R型抵抗力較其它無芽孢細菌強對青霉素及廣譜抗生素敏感，對磺胺不敏感致病物質白喉毒素（diphtheriatoxin）索狀因子（cordfactor）K抗原白喉棒狀桿菌（鼻咽腔）飛沫、污染物品鼻咽喉氣管局部細菌和毒素作用灰白色假膜粘膜水腫及假膜脫落，引發呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。外毒素入血毒血癥心肌肝腎上腺外周神經內臟出血心肌炎軟腭麻痹聲嘶

腎上腺功效障礙2-7天潛伏期所致疾病：白喉免疫性抗毒素免疫錫克試驗（Schicktest）

原理：毒素和抗毒素中和試驗

微生物學檢驗法標本直接涂片鏡檢分離培養毒力試驗防治標準人工自動免疫人工被動免疫抗菌治療2、鮑特菌屬（Bordelella）革蘭陰性小球桿菌常借居于人和動物上呼吸道引發人類百日咳和急性呼吸道感染百日咳鮑特菌（B.pertussis）人類百日咳病原體

分類百日咳鮑特菌(B.pertussis)副百日咳鮑特菌（B.parapertussis）支氣管鮑特菌(B.branchiseptica)鳥鮑特菌(B.avium)欣氏鮑特菌(B.hinzii)霍氏鮑特菌(B.holmesii)臨床意義是百日咳致病菌一年四季均可發病，冬春季多發，小兒多于成人傳輸路徑：飛沫傳染源：病人潛伏期：1~2周致病原因：百日咳毒素(PT)、絲狀血細胞凝集素(FHA)腺嘌呤環酶毒素(ACT)、氣管細胞毒素、皮膚壞死毒素臨床表現：1.卡他期：1~2周，顯著卡他癥狀，傳染性強，感染標本培養陽性率高2.痙攣期：1~4周，陣發性猛烈咳嗽，直至咳出粘稠痰液或嘔吐為止3.恢復期：1~2周，陣咳減輕，漸趨停頓生物學特征革蘭陰性短小桿菌無芽孢，有莢膜支氣管鮑特菌、鳥鮑特菌有鞭毛專性需氧，最適溫度35℃，最適pH6.8~7.0百日咳鮑特菌革蘭染色

O抗原為共同抗原，K抗原因子7為百日咳、副百日咳和支氣管炎鮑特菌所共有。經屢次傳代后，菌落變為粗糙而呈多形性；失去莢膜變為無毒株。變異：相位變異等抵抗力弱，但在低溫能生存，對紫外線敏感，日光照射60分鐘可死亡。

培養：B-G培養基，菌落特點有珠光色澤菌落。引發百日咳檢驗：鼻咽拭子或咳碟法防治：DPT三聯疫苗我國當前采取百日咳桿菌死菌苗與白喉、破傷風類毒素進行人工主動免疫，取得良好預防效果3、軍團菌屬（Legionella）軍團菌是引發軍團菌病病原體首發于1976年美國一次軍人聚會，故稱作軍團病1982年,在我國南京首次證實了軍團菌病。

分類軍團菌屬(Legionella)屬于軍團菌科（Legionellaceae）常見與人類疾病相關軍團菌：嗜肺軍團菌（Legionellapneumophila）米克戴德軍團菌（L.micdadei）長灘軍團菌（L.longbeachae）杜莫夫軍團菌（L.dumoffii）波茲曼軍團菌（L.bozemanii）形態染色革蘭陰性，但不易被著色球桿菌，形態有多形性Gimenen染色，菌體呈紅色，背景為綠色用Dieterle鍍銀法染成黑褐色不形成芽孢，無莢膜，有端生或側生鞭毛培養特征營養要求高專性需氧需2.5～5％CO2生長遲緩慣用培養基及菌落特征BCYE培養基：灰白色、圓形光滑濕潤菌落F-G培養基：針尖大小、黃色熒光軍團菌菌落形態(CYE瓊脂培養基)抗原結構Ｏ抗原：含有型特異性軍團菌病約90%是由嗜肺軍團菌所致,已發覺15個血清型，其中以Lp1血清型最常見,Lp6次之。抵抗力分布廣泛、抵抗力強水中存活時間長軍團菌病主要污染源是供水系統及冷卻塔和空調系統臨床意義致病物質：內毒素、外毒素、侵襲性酶傳染路徑：呼吸道（吸入含有軍團菌氣溶膠）所致疾?。很妶F菌病引發肺炎型和非肺炎型(龐蒂亞克熱Pontiacfever)感染肺炎型:多器官損害，肺部、消化道及神經系統癥狀及體征，致死率高。醫院感染可高達23%。非肺炎型（類似感冒）慢性心、肺、腎病變、艾滋病或接收免疫抑制劑者易發本病，且死亡率高達45%免疫性：感染者血清中出現特異性IgG、IgM抗體臨床意義引發肺炎型和非肺炎型(龐蒂亞克熱Pontiacfever)感染肺炎型：多器官損害，肺部、消化道及神經系統癥狀及體征，致死率高醫院感染可高達23%慢性心、肺、腎病變、艾滋病或接收免疫抑制劑者易發本病，且死亡率高達45%臨床意義空氣－乳膠微粒傳輸發病機制：①內毒素和細胞產生各種酶②裂解紅細胞③消化卵黃囊定時清洗空調預防軍團菌病標本采集：臨床標本：痰、氣管分泌物、胸水和血液為主。病理組織標本：必須制成懸液，再進行涂片和分離培養。環境污染標本：應先濃縮再接種。微生物學檢驗檢驗程序標本（痰、支氣管分泌物、血液、）涂片染色鏡檢（Giemsa染色）

分離培養（BEYE瓊脂）判定試驗結果匯報形態染色菌落特征氧化酶、觸酶熒光抗體染色等分離培養：營養要求苛刻，生長遲緩生長溫度為35℃最適pH6.7~7.0首次分離必須采取(BCYE)3~5天可形成1~2mm直徑光澤菌落微生物檢驗核酸檢測：是快速特異方法，采取DNA探針及PCR擴增rRNA方法均可用于軍團菌快速診療抗體檢測：是檢測軍團菌感染臨床慣用伎倆，常采取方法：IFA、MAA、TAT、ELISA法等血清學試驗檢測指標：檢測患者血清中特異性抗體方法：ELISA意義：檢測特異性IgM：診療軍團菌病檢測特異性IgG：軍團菌病流行病學調查軍團菌感染診斷試驗試驗敏感性(%)特異性(%)評注培養70100參考方法直接免疫熒光25～70>95不推薦常規應用間接免疫熒光70～90>99只用于嗜肺軍團菌血清群1酶標識免疫70～90>99乳膠凝集55～9085～99血清學（間接免疫熒光）70～80>95輔助培養

適應癥：

軍團菌病、肺炎支原體肺炎、肺炎衣原體肺炎、沙眼衣原體結膜炎、厭氧菌所致口腔感染、空腸彎曲菌腸炎、百日咳等。4、嗜血桿菌屬

（Haemophilus）嗜血桿菌屬—是一類革蘭陰性短小桿菌、常呈多形態性、無鞭毛、無芽胞，可形成莢膜，營養要求高，需要特殊物質才能生長一類細菌。

分類嗜血桿菌屬（Haemophilus）隸屬于巴斯德菌科，嗜血桿菌屬流感嗜血桿菌（H.influenzae）副流感嗜血桿菌（H.parainfluenzae）溶血嗜血桿菌(H.haemolyticus)副溶血嗜血桿菌（H.parahaemolyticus）克雷嗜血桿菌（H.ducreyi）埃及嗜血桿菌（H.aegyptius）嗜沫嗜血桿菌（H.aphrophilus）副嗜沫嗜血桿菌(H.paraphrophilus)遲緩嗜血桿菌（H.segnis）臨床意義菌種常棲部位及所致疾病流感嗜血桿菌

原發化膿性感染及繼發性感染，包含腦膜炎、鼻咽炎、關節炎、心包炎、鼻竇炎及中耳炎等。副流感嗜血桿菌口腔及陰道正常菌群，偶然可引發心內膜炎、尿道炎。溶血嗜血桿菌鼻咽部正常菌群，常引發兒童上呼吸道感染。副溶血嗜血桿菌口腔、咽部正常菌群，偶可引發咽炎、化膿性口腔炎和心內膜炎杜克雷嗜血桿菌軟下疳，為性傳輸病菌。常引發外陰膿皰、潰瘍、淋巴結腫大。埃及嗜血桿菌急性亞急性結膜炎、兒童巴西紫癜熱嗜沫嗜血桿菌咽部正常菌群、牙菌斑中常見菌、偶致心內膜炎和腦膿腫副嗜沫嗜血桿菌咽部及陰道正常菌群，偶可引發亞急性細菌性心內膜炎、敗血癥、甲溝炎、、腦膿腫、腦膜炎。幾個主要嗜血桿菌常棲部位及所致疾病

生物學特征G-短小球桿菌呈雙球形或短絲狀或多形性無芽孢、無鞭毛有毒菌株形成莢膜以流感嗜血桿菌（H.influenzae）為例

1.形態與染色流感嗜血桿菌培養基中需加入血液，以提供X因子和V因子（巧克力色培養基）X因子－－血紅素V因子－－輔酶Ⅰ或輔酶Ⅱ菌落光滑、無色透明、露滴狀首次培養需要CO2培養“衛星現象”衛星現象流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同孵育時，因為后者能合成較多V因子，在金黃色葡萄球菌菌落周圍生長流感嗜血桿菌菌落較大，離金黃色葡萄球菌菌落越遠越小。致病性呼吸道常見菌對人有致病作用代表菌種是流感嗜血桿菌杜克嗜血桿菌、埃及嗜血桿菌也是致病其余菌種多為條件致病菌依據莢膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最強可產生自溶酶致病物質：莢膜、菌毛、內毒素、IgA蛋白酶所致疾病原發感染：腦膜炎、鼻咽炎等，多見于兒童繼發感染：鼻竇炎等，多見于成人微生物學檢驗標本采集檢驗程序抗原檢測及核酸檢測分離培養與判定藥品敏感試驗標本采集標準在疾病早期采取標本，馬上送檢。在取標本時以肉湯濕潤，預防干燥。對心內膜炎、患者取血液標本。痰液標本，應洗滌、消化，再接種。DNA探針雜交（快速檢測）血液腦脊液膿汁痰分離培養(巧克力瓊脂)涂片、鏡檢莢膜腫脹試驗（初步匯報）標識抗體檢測抗原涂片、莢膜腫脹試驗（初步匯報）菌落形態、衛星現象、血清學現象匯報結果

嗜血桿菌檢驗程序增菌培養35℃5-10%CO2X、V因子需求試驗吲哚、尿素酶、鳥氨酸脫羧酶（生物分型）分離培養培養條件：需要X、V因子營養要求高生長溫度為35℃血瓊脂平板培養基巧克力瓊脂培養基菌落特征：巧克力瓊脂培養基小、無色透明菌落流感嗜血桿菌巧克力瓊脂養基菌落判定

培養需要X、V因子菌落形態衛星現象衛星現象(satellitephenomenon)衛星現象流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同孵育時，因為后者能合成較多V因子，在金黃色葡萄球菌菌落周圍生長流感嗜血桿菌菌落較大，離金黃色葡萄球菌菌落越遠越小。嗜血桿菌因子β溶血發酵XV葡萄糖蔗糖乳糖甘露醇木糖觸酶CO2生長ONPG流感嗜血桿菌++-+---D+--副流感嗜血桿菌-+-++-+-DDD溶血嗜血桿菌++++---D+--副溶血嗜血桿菌-++++---+--注：D為不一樣結果嗜血桿菌屬中種特征判定依據革蘭陰性小桿菌、多形性培養采取巧克力色培養基，CO2培養血平板上有“衛星現象”X、V因子需求試驗5、克雷伯菌屬Klebsiella肺炎克雷伯菌肺炎亞種引發各種感染，有肺炎、肺膿腫、敗血癥、腦膜炎鼻炎亞種（臭鼻桿菌）慢性萎縮性鼻炎鼻硬結亞種（鼻硬節桿菌）慢性肉芽腫樣病變肺炎衣原體（只有一個血清型：TWAR株）（一）生物學特征：1、原體平均直徑0.38um，梨形，有周漿間隙，原體無質粒DNA；