Chap20生物制品分析概論整理課件Chap20生物制品分析概論整理課件1第一節概述中國藥典2010版第一部收載藥材及飲片、植物油脂和提取物、成方制劑和單味制劑等。第二部收載化學藥品、抗生素、生化藥品、放射性藥品以及藥用輔料等。第三部收載生物制品，首次將《中國生物制品規程》并入藥典。整理課件第一節概述中國藥典2010版整理課件2生物藥物(bio-pharmaceutics)生化藥物(biochemicaldrugs)生物合成藥物(biosyntheticdrugs)生物制品(biologicalproducts)基本概念整理課件生物藥物(bio-pharmaceutics)基本概念整理3利用生物體、生物組織或組成生物體的各種成分，綜合運用生物學、生物化學、微生物學、免疫學、物理化學和藥學的原理與方法制得的一大類藥物。包括從動物、植物和微生物等生物體中直接制取的各種天然生物活性物質以及人工合成或半合成的天然物質類似物。生物藥物(bio-pharmaceutics)整理課件利用生物體、生物組織或組成生物體的各種成生物藥物(bio-p4指從動物、植物及微生物提取的，亦可用生物-化學半合成或用現代生物技術制得的生命基本物質，及其衍生物、降解物及大分子的結構修飾物等。如氨基酸、多肽、蛋白質、酶、多糖、脂質和核苷酸等。如：氨基酸、多肽、蛋白質、酶等。生化藥物(BiochemicalDrugs)整理課件指從動物、植物及微生物提取的，亦可用生物-生化藥物(Bioc5由微生物代謝所產生的藥物和必須利用微生物及其酶轉化反應共同完成的半合成藥物。如：維生素、抗生素、氨基酸、某些酶等。生物合成藥物（biosyntheticdrugs）整理課件由微生物代謝所產生的藥物和必須利用微生物生物合成藥物（bio6是應用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質工程、發酵工程等生物技術獲得的微生物、細胞及各種動物和人源的組織和液體等生物材料制備，用于人類疾病預防、治療和診斷的藥品。參見《中國生物制品規程》生物制品的一個顯著特點：全程質量控制。生物制品(BiologicalProducts)整理課件是應用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質生物制品(Biol7（1）疫苗類(Vaccines)（2）抗毒素及抗血清類(AntitoxinandAntiserum)（3）血液制品(BloodProducts)（4）細胞因子(Cytokines)及重組DNA產品(RecombinantDNAProducts)（5）診斷制品(DiagnosticReagents)（6）其他制品(ElseProducts)整理課件（1）疫苗類(Vaccines)整理課件8生物制品的特點1．分子量大，分子量不是定值2.結構確證難3.全過程的質量控制4.生物活性檢查5.安全性檢查6.效價(含量)測定整理課件生物制品的特點1．分子量大，分子量不是定值整理課件9生物制品的全程質量控制2005版中國藥典各論內容一般包括：①品名②定義、組成及用途③基本要求④制造⑤檢定⑥保存運輸及有效期⑦使用說明整理課件生物制品的全程質量控制2005版中國藥典各論內容一般包括：整10第二節質量控制的基本程序與方法

一、鑒別試驗二、雜質檢查

三、安全性檢查四、含量(效價)測定整理課件第二節質量控制的基本程序與方法一、鑒別試驗整理課件11一、鑒別試驗理化鑒別化學、UV、HPLC生化鑒別酶法、電泳法生物鑒別法血清學法生物學法（小鼠驚厥試驗）整理課件一、鑒別試驗理化鑒別化學、UV、HPLC整理課件12二、雜質檢查一般雜質特殊雜質安全性檢查整理課件二、雜質檢查一般雜質整理課件13安全性檢查

熱原檢查法（家兔法）細菌內毒素檢查法異常毒性試驗過敏試驗降壓物質檢查法無菌試驗基因工程藥物中可能雜質與污染物檢查致突變試驗生殖毒性試驗整理課件安全性檢查熱原檢查法（家兔法）無菌試驗整理課件14

家兔法

本法是將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內，以其體溫升高的程度，判定該供試品中所含熱原是否符合規定。

熱原檢查法(Testforpyrogen)整理課件家兔法熱原檢查法(Testforpyrogen)整15細菌內毒素檢查法(TestforBacterialEndotoxin)本法系利用鱟試劑與細菌內毒素產生凝集反應的機理，以判斷供試品中細菌苗內毒素的限量是否符合規定的一種方法。整理課件細菌內毒素檢查法本法系利用鱟試劑與細菌內毒素產生凝集反應的機16鱟整理課件鱟整理課件17用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途徑給予規定體重的某種試驗動物，觀察其急性毒性反應。反應的判斷以試驗動物死亡與否為終點。異常毒性試驗(TestforUndueToxicity)整理課件用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途異常毒性試驗(Tes18過敏試驗是檢查異性蛋白的試驗。藥物中若夾雜有異性蛋白，在臨床使用時易引起病人多種過敏反應，輕者皮膚出現紅斑或丘疹，嚴重者可出現窒息、發結、血管神經性水腫、血壓下降，甚至休克和死亡。過敏試驗整理課件過敏試驗是檢查異性蛋白的試驗。藥物中若夾過敏試驗整理課件19降壓物質是指某些藥物中含有的能導致血壓降低的雜質，包括組胺、類組胺或其他導致血壓降低的物質。降壓物質檢查法(TestforDepressorSubstances)整理課件降壓物質是指某些藥物中含有的能導致血壓降低降壓物質檢查法整理20無菌試驗基因工程藥物中可能雜質與污染物檢查外源性DNA測定、宿主細胞蛋白質致突變試驗生殖毒性試驗整理課件無菌試驗整理課件21第三節常用定量分析法

整理課件第三節常用定量分析法整理課件22整理課件整理課件23整理課件整理課件24整理課件整理課件251．反相高效液相色譜法(RP-HPLC)以(C4、C8、C18)烷基硅烷鍵合相為柱填料，以甲醇-水、乙腈-水或甲醇、乙腈與緩沖液構成的溶液為流動相，以紫外、熒光或電化學檢測器為檢測手段，這種色譜體系在生化藥物(例如肽類、氨基酸、蛋白質、多糖等)定量分析中應用廣泛。

色譜法整理課件1．反相高效液相色譜法(RP-HPLC)色譜法整理課件262.高效離子交換色譜法(HPIEC)HPIEC是蛋白質、多肽分離分析中常見的方法之一。具有較高質量的活性回收。3.高效凝膠過濾色譜法(HPGFC)HPGFC可用于多肽和蛋白質等生化藥物的分離及其分子量的測定。整理課件2.高效離子交換色譜法(HPIEC)整理課件27整理課件整理課件28整理課件整理課件29電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法瓊脂糖凝膠電泳法SDS毛細管電泳用于蛋白質類生物制品的分析整理課件電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法用于蛋白質類生物制品的分析整理課件301.原理毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅動力，依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現分離的電泳分離分析方法。

高效毛細管電泳法（HPCE）（Highperformancecapillaryelectrophoresis）整理課件1.原理高效毛細管電泳法（HPCE）整理課件31電泳：電解質中帶電粒子在電場力作用下，以不同的速度向電荷相反方向遷移的現象。電泳淌度：帶電粒子在毛細管中定向移動的速度與所在電場強度之比。電滲流：毛細管內壁表面的電荷所引起的管內液體的整體流動，來源于外加電場對管壁溶液雙電層的作用。幾個概念整理課件電泳：電解質中帶電粒子在電場力作用下，以不同的速度向電荷相反32電滲流作用整理課件電滲流作用整理課件33毛細管電泳裝置示意圖整理課件毛細管電泳裝置示意圖整理課件34－－－－－－－－－－－－－－－－－－(－)(+)++++++++++++++++----------------毛細電泳中不同組分的遷移示意圖整理課件－－－－－－－－－－－－－－－－－－(－)(+)++++++35流出順序正離子、中性粒子、負離子電滲流的速度是泳流速度的5-7倍整理課件流出順序整理課件36目前，毛細管電泳的分離模式主要有以下3種：(1)毛細管區帶電泳：用以分析帶電溶質。為了降低電滲流和吸附現象，可將毛細管內壁涂層。(2)毛細管凝膠電泳：在毛細管中裝入單體，引發聚合形成凝膠，主要用于測定蛋白質、DNA等大分子化合物。整理課件目前，毛細管電泳的分離模式主要有以下3種：整理課件37(3)膠束電動毛細管色譜在緩沖液中加入離子型表面活性劑如十二烷基硫酸鈉，形成膠束，被分離物質在水相和膠束相(準固定相)之間發生分配并隨電滲流在毛細內遷移，達到分離。本模式能用于中性物質的分離。整理課件(3)膠束電動毛細管色譜整理課件38柱效高理論板數數萬至數千萬速度快250秒分離10種蛋白質試劑消耗少數ml緩沖液進樣量小nL級進樣高效毛細管電泳法優點整理課件柱效高理論板數數萬至數千萬高效毛細管電泳法優點整理課39HPCE的應用毛細管電泳技術可檢測多種樣品，如血清、血漿、尿樣、腦脊液、紅細胞、體液或組織及其實驗動物活體實驗；且可分離分析多種組分，如核酸/核苷酸、蛋白質/多肽/氨基酸、糖類/糖蛋白、酶、堿氨基酸、微量元素、小的生物活性分子等的快速分析，以及DNA序列分析和DNA合成中產物純度測定等。

整理課件HPCE的應用毛細管電泳技術可檢測多種樣品，如血清、血漿、尿40Chap20生物制品分析概論整理課件Chap20生物制品分析概論整理課件41第一節概述中國藥典2010版第一部收載藥材及飲片、植物油脂和提取物、成方制劑和單味制劑等。第二部收載化學藥品、抗生素、生化藥品、放射性藥品以及藥用輔料等。第三部收載生物制品，首次將《中國生物制品規程》并入藥典。整理課件第一節概述中國藥典2010版整理課件42生物藥物(bio-pharmaceutics)生化藥物(biochemicaldrugs)生物合成藥物(biosyntheticdrugs)生物制品(biologicalproducts)基本概念整理課件生物藥物(bio-pharmaceutics)基本概念整理43利用生物體、生物組織或組成生物體的各種成分，綜合運用生物學、生物化學、微生物學、免疫學、物理化學和藥學的原理與方法制得的一大類藥物。包括從動物、植物和微生物等生物體中直接制取的各種天然生物活性物質以及人工合成或半合成的天然物質類似物。生物藥物(bio-pharmaceutics)整理課件利用生物體、生物組織或組成生物體的各種成生物藥物(bio-p44指從動物、植物及微生物提取的，亦可用生物-化學半合成或用現代生物技術制得的生命基本物質，及其衍生物、降解物及大分子的結構修飾物等。如氨基酸、多肽、蛋白質、酶、多糖、脂質和核苷酸等。如：氨基酸、多肽、蛋白質、酶等。生化藥物(BiochemicalDrugs)整理課件指從動物、植物及微生物提取的，亦可用生物-生化藥物(Bioc45由微生物代謝所產生的藥物和必須利用微生物及其酶轉化反應共同完成的半合成藥物。如：維生素、抗生素、氨基酸、某些酶等。生物合成藥物（biosyntheticdrugs）整理課件由微生物代謝所產生的藥物和必須利用微生物生物合成藥物（bio46是應用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質工程、發酵工程等生物技術獲得的微生物、細胞及各種動物和人源的組織和液體等生物材料制備，用于人類疾病預防、治療和診斷的藥品。參見《中國生物制品規程》生物制品的一個顯著特點：全程質量控制。生物制品(BiologicalProducts)整理課件是應用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質生物制品(Biol47（1）疫苗類(Vaccines)（2）抗毒素及抗血清類(AntitoxinandAntiserum)（3）血液制品(BloodProducts)（4）細胞因子(Cytokines)及重組DNA產品(RecombinantDNAProducts)（5）診斷制品(DiagnosticReagents)（6）其他制品(ElseProducts)整理課件（1）疫苗類(Vaccines)整理課件48生物制品的特點1．分子量大，分子量不是定值2.結構確證難3.全過程的質量控制4.生物活性檢查5.安全性檢查6.效價(含量)測定整理課件生物制品的特點1．分子量大，分子量不是定值整理課件49生物制品的全程質量控制2005版中國藥典各論內容一般包括：①品名②定義、組成及用途③基本要求④制造⑤檢定⑥保存運輸及有效期⑦使用說明整理課件生物制品的全程質量控制2005版中國藥典各論內容一般包括：整50第二節質量控制的基本程序與方法

一、鑒別試驗二、雜質檢查

三、安全性檢查四、含量(效價)測定整理課件第二節質量控制的基本程序與方法一、鑒別試驗整理課件51一、鑒別試驗理化鑒別化學、UV、HPLC生化鑒別酶法、電泳法生物鑒別法血清學法生物學法（小鼠驚厥試驗）整理課件一、鑒別試驗理化鑒別化學、UV、HPLC整理課件52二、雜質檢查一般雜質特殊雜質安全性檢查整理課件二、雜質檢查一般雜質整理課件53安全性檢查

熱原檢查法（家兔法）細菌內毒素檢查法異常毒性試驗過敏試驗降壓物質檢查法無菌試驗基因工程藥物中可能雜質與污染物檢查致突變試驗生殖毒性試驗整理課件安全性檢查熱原檢查法（家兔法）無菌試驗整理課件54

家兔法

本法是將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內，以其體溫升高的程度，判定該供試品中所含熱原是否符合規定。

熱原檢查法(Testforpyrogen)整理課件家兔法熱原檢查法(Testforpyrogen)整55細菌內毒素檢查法(TestforBacterialEndotoxin)本法系利用鱟試劑與細菌內毒素產生凝集反應的機理，以判斷供試品中細菌苗內毒素的限量是否符合規定的一種方法。整理課件細菌內毒素檢查法本法系利用鱟試劑與細菌內毒素產生凝集反應的機56鱟整理課件鱟整理課件57用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途徑給予規定體重的某種試驗動物，觀察其急性毒性反應。反應的判斷以試驗動物死亡與否為終點。異常毒性試驗(TestforUndueToxicity)整理課件用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途異常毒性試驗(Tes58過敏試驗是檢查異性蛋白的試驗。藥物中若夾雜有異性蛋白，在臨床使用時易引起病人多種過敏反應，輕者皮膚出現紅斑或丘疹，嚴重者可出現窒息、發結、血管神經性水腫、血壓下降，甚至休克和死亡。過敏試驗整理課件過敏試驗是檢查異性蛋白的試驗。藥物中若夾過敏試驗整理課件59降壓物質是指某些藥物中含有的能導致血壓降低的雜質，包括組胺、類組胺或其他導致血壓降低的物質。降壓物質檢查法(TestforDepressorSubstances)整理課件降壓物質是指某些藥物中含有的能導致血壓降低降壓物質檢查法整理60無菌試驗基因工程藥物中可能雜質與污染物檢查外源性DNA測定、宿主細胞蛋白質致突變試驗生殖毒性試驗整理課件無菌試驗整理課件61第三節常用定量分析法

整理課件第三節常用定量分析法整理課件62整理課件整理課件63整理課件整理課件64整理課件整理課件651．反相高效液相色譜法(RP-HPLC)以(C4、C8、C18)烷基硅烷鍵合相為柱填料，以甲醇-水、乙腈-水或甲醇、乙腈與緩沖液構成的溶液為流動相，以紫外、熒光或電化學檢測器為檢測手段，這種色譜體系在生化藥物(例如肽類、氨基酸、蛋白質、多糖等)定量分析中應用廣泛。

色譜法整理課件1．反相高效液相色譜法(RP-HPLC)色譜法整理課件662.高效離子交換色譜法(HPIEC)HPIEC是蛋白質、多肽分離分析中常見的方法之一。具有較高質量的活性回收。3.高效凝膠過濾色譜法(HPGFC)HPGFC可用于多肽和蛋白質等生化藥物的分離及其分子量的測定。整理課件2.高效離子交換色譜法(HPIEC)整理課件67整理課件整理課件68整理課件整理課件69電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法瓊脂糖凝膠電泳法SDS毛細管電泳用于蛋白質類生物制品的分析整理課件電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法用于蛋白質類生物制品的分析整理課件701.原理毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅動力，依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現分離的電泳分離分析方法。

高效毛細管電泳法（HPCE）（Highperformancecapillaryelectrophoresis）整理課件1.原理高效毛細管電泳法（HPCE）整理課件71電泳：電解質中帶電粒子在電場力作用下，以不同的速度向電荷相反方向遷移的現象。電泳淌度：帶電粒子在毛細管中定向移動的速度與所在電場強度之比。電滲流：毛細管內壁表面的電荷所引起的管內液體的整體流動，來源于外加電場對管壁溶液雙電層的作用。幾個概念整理課件電泳：電解質中帶電粒子在電場力作用下，以不同的速度向電荷相反72電滲流作用整理課件電滲流作用