1、色譜柱的維護與調養在高壓液相色譜中的應用摘要：科學技能的生長，使得色譜技能也得到進一步的生長，不竭有新的聯用的技能得到應用。生物醫學的生長，也不竭要求高敏捷和高選擇性的要領對研究的東西舉行定性和定量的研究。關鍵詞：色譜柱維護與調養高壓液相色譜應用0弁言色譜作為一種分散技能與要領，自本世紀初起已經有100多年的汗青了，如今已經成為闡發化學學科中的一個緊張的分支。在人類進入新期間之際，人們面對著在信息科學、生命科學、質料科學、環境科學等范疇的快速生長的挑釁，在這些范疇人才的需求成為國度高度生長的至關緊張的因素。而色譜技能是生命科學、質料科學、環境科學必不成少的本領和東西。根據比來的統計在全天下各種

2、闡發儀器中景象色譜儀和液相色譜儀的營銷總額占25%-30%。科學技能的生長，使得色譜技能也得到進一步的生長，不竭有新的聯用的技能得到應用。生物醫學的生長，也不竭要求高敏捷和高選擇性的要領對研究的東西舉行定性和定量的研究。1色譜柱的相干性子1.1色譜柱的界說：裝填有結實相用以分散混淆組分的柱管。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等外形。1.2分類：色譜柱可分為添補柱和開管柱兩大類。液相色譜通常均接納添補柱。色譜柱的分散結果取決于所選擇的結實相，以及色譜柱的制備和操縱條件。簡樸而言：常見的分派住填料：碳十八柱DS/18)、碳八柱ty了/8、碳六柱Hexyl/6、碳四柱Butyl/4、碳一

3、注ethyl/1、陰離子互換柱SAX)、陽離子互換柱SX、苯基柱Phenyl、氨基柱Ain/NH2、氰基柱yan/N/Nitrile。常見的吸附柱填料：硅膠柱色譜柱的選擇會直接影響混淆物中組分的分散。舉例來講：對付添補柱而言，可選擇的結實相較多，柱容量較大，但是受柱長的限定，分散本擁有限，重要應用于簡樸化合物的分散。2色譜柱的維護與調養2.1色譜柱的維護。我們在利用新的色譜柱應該在我們本身的液相色譜儀上舉行性能測試，縱然用色譜柱附帶的查驗陳訴上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效。而且，在以后的利用中，應時常對色譜柱舉行測試。而且在利用的歷程中經常有堵塞的征象，造成這種征象的重要緣故原由是溶劑中

4、的不溶物樣品中的不溶物泵進樣器等中的不溶物柱內不溶物的形成等。假設當色譜柱堵塞以后我們可以對色譜柱舉行修復，起首，利用含鹽緩沖液后如離子對試劑應用溶解性強的溶劑如水舉行沖洗。其次，先斷開檢測器，然后用對來自樣品中的物質有強溶解性的溶劑舉行沖洗，對付反相色譜柱，可利用甲醇、乙睛、四氫呋喃、氯仿、庚烷等，在此條件下，應制止溶劑的pH低于2或高于8。末了假設顛末上述照舊沒有修復，色譜柱壓力照舊沒有落落，那么要斷開檢測器，將色譜柱反標的目的安排，然后查抄柱壓，假設壓力不變落落，那么保持色譜柱反標的目的毗連，用低于0.5l/in流速沖洗一小時。假設壓力不落落，那么要看內置過濾器是否被堵塞，假設被堵塞應沖

5、洗或調換，假設入口端的填料產生堵塞，柱子將不成能被徹底規復，只能通已往掉入口端的部分填料，重新添補舉行有限的柱效規復。而且修復的厚度是2-5。2.2色譜柱的調養。色譜柱在利用前，最好舉行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為以后評價柱性能變革的參考。但要留意：柱性能大概由于所利用的樣品、活動相、柱溫等條件的差異而有所差異；別的，在做柱性能測試時是根據色譜柱出廠陳訴中的條件舉行(出廠測試所利用的條件是最正確條件)，只有如許，測得的結果才有可比性。我們在對色譜柱利用前舉行測試以后，我們要根據差異的環境對色譜柱舉行調養：反相色譜柱天天實行后的調養：利用緩沖液或含鹽的活動相，實行完成后應用10%的甲醇/

6、水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。留意：不克不及用純水沖洗柱子，應該在水中參加10%的甲醇，防范將填料沖塌陷。恒久保存色譜柱：如色譜柱要長時間保存，必需存于符合的溶劑下。對付反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以儲存于嚴酷脫水后的純粹己烷中，離子互換柱可以儲存于水含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞中，并將購置新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度最好是室溫。歸納綜合起來就是：柱子在任何環境下不克不及碰撞、彎曲或猛烈震驚；當柱子和色譜儀聯結時，閥件或管路必然要洗濯干凈；要留意活動相的脫氣；制止利用高粘度的溶劑作為活動相；進樣樣品要提純；嚴酷操縱進樣量；天天闡發事情竣事后，要洗濯進樣

7、閥中殘留的樣品；天天闡發測定竣事后，都要用得當的溶劑來洗濯柱；假設闡發柱恒久不利用，應用得當有機溶劑保存并關閉。3色譜柱的維護與調養在高壓液相色譜中的應用高效液相色譜(HPL)是20世紀60年代后期生長起來的分散闡發技能，是當代分散測定的緊張本領。問世以來，因其具有分散效能高、闡發速率快、檢測敏捷度好、能闡發高沸點但不克不及氣化的熱不不變生理活性物質的特點而被普及應用于生物化學、藥物及臨床闡發。高效液相色譜柱是斲喪品，會隨利用時間或進樣的次數增長，出現色譜峰上下落，峰寬加大或出現肩峰，柱效落落。必要按期舉行徹底洗濯和再生，差異的色譜柱洗濯要領各不雷同好比：3.1反相柱別離用甲醇:水=90:10

8、，純甲醇HPL級，異丙醇HPL級，二氯甲烷HPL級等溶劑作為活動相，依次沖洗，每種活動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積.然后再以相反的序次沖洗。3.2正相柱別離用正己烷HPL級，異丙醇HPL級，二氯甲烷HPL級，甲醇HPL級等溶劑做活動相，按序沖洗，每種活動相流經色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大，可低落流速，制止壓力過高).留意利用溶劑的序次不要顛倒，用甲醇沖洗完后，再以相反的序次沖洗至正己烷，全部的活動相必需嚴酷脫水。3.3離子互換柱長時間在緩沖溶液中利用和進樣，將導致色譜柱離子互換本領落落，用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生，反之，用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。別的，

9、還可以選擇能溶解柱內污染物的溶劑為活動相做正標的目的和反標的目的沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不成能規復到新柱的程度的.假設柱子裝反了，可以調返來，但大概會造成柱內擔體塌陷.在不得已的環境下只管不要反裝色譜柱。增強色譜柱的維護與調養對付色譜柱高壓液相色譜中應用有著緊張的意義，訂定色譜柱辦理的尺度操縱規程并嚴酷實行。每一根新購進的色譜柱必需造冊登記，內容包羅：消費公司、品名、型號、規格、購進時間、啟用時間、單價、柱內庇護溶液等。色譜柱分類存放，硅膠柱、化學鍵合硅膠柱、氰基或氨基柱、離子互換樹脂柱、凝膠柱各用一個色譜柱盒，盒上貼上標簽，注明種別。隨柱說明書裝入密實袋附在登記本上。每啟用一根色譜柱，在色譜柱上貼上標簽，注明啟用日期。每根柱子每兩個月調養一次，特殊是對付一些利用頻率少的柱子，由于安排時間長，輕易干柱，每一次做好調養記載。對付確已失效的柱子，做好停用記載，不克不及隨意拋棄，專門存放，假設現用的柱子的填料必