1、生物分離與純化技術(shù)模擬試卷九答案1.2.3.4.5.、名詞解釋（每小題 3分，共15分）離心分離技術(shù)：是基于固體顆粒和周圍液體密度存在差異，在離心場中使不同密度的固體顆粒加速沉降的分離過程。物理萃取：即溶質(zhì)根據(jù)相似相溶的原理在兩相間達(dá)到分配平衡，萃取劑與溶質(zhì)之間不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。有機(jī)聚合物沉析：利用生物分子與某些有機(jī)聚合物形成沉淀而析出的分離技術(shù)稱為有機(jī)聚合物沉析。平衡離子：離子交換樹脂中與功能基團(tuán)以離子鍵聯(lián)結(jié)的可移動的平衡離子，亦稱活性離子。離子交換層析：是以離子交換劑為固定相，根據(jù)物質(zhì)的帶電性質(zhì)不同而進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。、單選題（每小題1分，共15分）1 .葡聚糖凝膠可使用那種溶劑溶脹（

2、C）A.甲醇B乙醇C.緩沖液2 .不能用于固液分離的手段為（A.離心B過濾 C.超濾 D.3 .最常用的干燥方法有（ DD.乙酸乙酯0雙水相萃取）A常壓干燥 B、減壓干燥C、噴霧干燥D、以上都是4 .物理萃取即溶質(zhì)根據(jù)（ B ）的原理進(jìn)行分離的A.吸附 B.相似相溶C分子篩D 親和5 .適合小量細(xì)胞破碎的方法是（B ）A.高壓勻漿法B.超聲破碎法C.高速珠磨法D.高壓擠壓法6 .關(guān)于分配柱層析的基本操作錯誤 （D ） oA裝柱分干法和濕法兩種B分配柱層析法使用兩種溶劑，事先必須先使這兩個相互相飽和C用硅藻土為載體，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盤的棒把硅藻壓緊壓平D分配柱層析適用于分離極性比

3、較小、在有機(jī)溶劑中溶解度大的成分，或極性很相似的成分。7 .顆粒與流體的密度差越小，顆粒的沉降速度（A.越小B.越大C.不變D.無法確定8.A.“類似物容易吸附類似物”的原則，一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)（ 極性溶劑 B .非極性溶劑 C .水 D .溶劑9.AB、關(guān)于大孔樹脂洗脫條件的說法，錯誤的是: 最常用的是以高級醇、酮或其水溶液解吸。 對弱酸性物質(zhì)可用堿來解吸。對弱堿性物質(zhì)可用酸來解吸。如吸附系在高濃度鹽類溶液中進(jìn)行時，則常常僅用水洗就能解吸下來。10 .親和層析的洗脫過程中，在流動相中減去配基的洗脫方法稱作A、陰性洗脫 B、劇烈洗脫 C、正洗脫11 .下列哪一項(xiàng)不是常

4、用的濾布材料（C ）A.法蘭絨B. 帆布C.濾紙D.斜紋布12 .陰樹脂易受有機(jī)物污染，污染后，可用（ BA檸檬酸 B 10%NaCl+2%5%NaOHi合溶液 CD 、負(fù)洗脫）處理氨基三乙酸 D EDTA13 . HPLB哪種色譜的簡稱（CA.離子交換色譜 B.氣相色譜C.高效液相色譜14 .適合于親脂性物質(zhì)的分離的吸附劑是（ BA.活性炭B.氧化鋁C.硅膠D.磷酸鈣D.凝膠色譜）。15 .分離純化早期，由于提取液中成分復(fù)雜，目的物濃度稀，因而易采用A、分離量大分辨率低的方法G分離量小分辨率高的方法、分離量小分辨率低的方法、各種方法都試驗(yàn)一下，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果確定、判斷題（每小題1分，共10分）

5、有機(jī)溶劑被細(xì)胞壁吸收后，會使細(xì)胞壁膨脹或溶解，導(dǎo)致破裂，把細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)物釋放到水相中去。2.3.向含有生化物質(zhì)的水溶液中加入一定量親水性的有機(jī)溶劑，能使生化物質(zhì)沉淀析出。等電點(diǎn)沉淀在實(shí)際操作中應(yīng)避免溶液pH上升至5以上。（V ）4.5.在聚丙烯酰胺凝膠中加入陰離子去污劑十二烷基硫酸鈉（SDS,影響凝膠的形成。（X ）當(dāng)氣體的溫度超過其臨界溫度，壓力超過臨界壓力之后，物質(zhì)的聚集狀態(tài)就介于氣態(tài)和液態(tài)之間，成為超臨界流體。6.7.凍結(jié)-融化法凍結(jié)的作用是破壞細(xì)胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)，增加其親水性和通透性來破壞細(xì)胞的。鹽析作用也能減少有機(jī)溶劑在水中的溶解度，使提取液中的水分含量減少。可以促使生化物質(zhì)轉(zhuǎn)入有機(jī)相從

6、而提高萃取率。8.9.氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點(diǎn)沉析。甲醇沉淀作用與乙醇相當(dāng)，但對蛋白質(zhì)的變性作用比乙醇、丙酮都小，所以應(yīng)用廣泛。(X)10.若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子（如Ca2kMg2+ Zn2播），則等電點(diǎn)pH升高。（，）一 一 一 一 一 一裝一.,一 一訂一四、填空題（每小題1分，共15分）1 .常用離心設(shè)備可分為（離心沉降）和（離心過濾）兩大類；2 .根據(jù)吸附劑與吸附質(zhì)之間存在的吸附力性質(zhì)的不同，可將吸附分為（物理）、（化學(xué)）、（極性）和（交換）吸附;3 .根據(jù)干燥曲線，物料干燥可分為（恒速干燥階段）和（降速干燥階段）兩個階段；題目得分評卷人一題目得分評卷人二

7、題目得分評卷人三（，）題目得分評卷人四4 .影響離子交換速度的因素有（樹脂粒度）、（交聯(lián)度）、（溶液流速）、（溫度）、（離子的大小）、（離子的化合價）和（離子濃度）考試學(xué)科生物分離與純化技術(shù)組、命題教師課題組考場支勺考生班級系主任考生姓名訂一一一一一一線五、簡答題(每小題7分，共35分)題目得分評卷人五1 .沉析溶劑選擇主要應(yīng)考慮以下因素。(1)、是否與水互溶，在水中是否有很大的溶解度；(2)、介電常數(shù)小，沉析作用強(qiáng)。(3)、對生物分子的變性作用小。(4)、毒性小，揮發(fā)性適中。2 .吸附色譜分離化學(xué)成分的原理是什么？簡述硅膠、氧化鋁、聚酰胺、活性炭這四種吸附劑的主要用途和特點(diǎn)。利用混合物中各成

8、分在兩相中吸附力的差異進(jìn)行分離。硅膠可分離各類成分。氧化鋁分離堿性或親脂性成分。活性炭分離水溶性成分。聚酰胺是氫鍵吸附，適合分離黃酮成分3 .試列舉改變透析袋孔徑大小的方法。(1)用64%M化鋅溶液處理15分鐘，可使膜孔徑增大，使大分子也能通過膜孔。(2)纖維素膜用27叱酸叱咤溶液處理，會使孔徑減小。(3)將透析袋內(nèi)盛滿水，在兩端進(jìn)行拉伸，會使透析袋變薄，加快透析速率；如果不向袋內(nèi)注入水而充滿空氣在兩端拉伸，膜的孔徑會變小，使有些溶質(zhì)不能透過膜。4 .常見的超濾裝置有哪些。(1)無攪拌式裝置(2)攪拌或振動式裝置(3)小棒超濾器(4)淺道系統(tǒng)超濾裝置(5)中空纖維系統(tǒng)超濾器5.根據(jù)溶解度不同，

9、蛋白質(zhì)有幾種分離純化方法。利用蛋白質(zhì)溶解度的差異是分離蛋白質(zhì)的常用方法之一。影響蛋白質(zhì)溶解度的主要因素有溶液的pH值、離子強(qiáng)度、溶劑的介電常數(shù)和溫度等。1)等電點(diǎn)沉淀蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時溶解度最小。單純使用此法不易使蛋白質(zhì)沉淀完全，常與其他方法配合使用。2)鹽析沉淀中性鹽對蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定性有顯著的影響。一定濃度的中性鹽可破壞蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定因素而使蛋白質(zhì)鹽析沉淀。鹽析沉淀的蛋白質(zhì)一般保持著天然構(gòu)象而不變性。有時不同的鹽濃度可有效地使蛋白質(zhì)分級沉淀。通常單價離子的中性鹽(NaCl)比二價離子的中性鹽(NH4)2SO4對蛋白質(zhì)溶解度的影響要小。3)低溫有機(jī)溶劑沉淀法在一定量的有機(jī)溶劑中，蛋白質(zhì)分子間極性基團(tuán)的靜電引力增加，而水化作用降低，促使蛋白質(zhì)聚集沉淀。此法沉淀蛋白質(zhì)的選擇性較高，且不需脫鹽，但溫度高時可引起蛋白質(zhì)變性，故應(yīng)注意低溫條件。一般在0