1、牛轉鐵蛋白（飽和鐵形態(tài)，凍干粉末，細胞培養(yǎng)級別）Transferrin, Bovine Holo Form, PowderIron Rich, Cell Culture Grade產(chǎn)品介紹：轉鐵蛋白是血漿中主要的鐵傳遞蛋白，為細胞內化和細胞代謝提供所需的鐵。研究發(fā)現(xiàn)所有的細胞生長都離不開轉鐵蛋白。不但維持正常的細胞代謝依賴于以生物活性形態(tài)存在的鐵，鐵還是一些酶的輔助因子，比如RNA聚合酶，DNA合成酶。同時也是血紅蛋白的重要組成部分。轉鐵蛋白是血漿糖蛋白，從血漿中分離而來，牛轉鐵蛋白以兩種分子形態(tài)存在，分子量分別為74KD和78KD。每個轉鐵蛋白分子通過C端和N端結構位點可以結合兩分子鐵離子，

2、所以轉鐵蛋白以三種形態(tài)存在：脫鐵（不結合鐵離子），飽和鐵（結合兩分子鐵離子）和部分飽和，在生理情況下，轉鐵蛋白分子僅有 1/3 被鐵飽和。使用說明：轉鐵蛋白對于絕大部分細胞系在無血清培養(yǎng)基中生長是必需的，研究表明飽和鐵形態(tài)的轉鐵蛋白對于促進細胞生長是最有效的形態(tài)。對于雜交瘤，黏連細胞和懸浮細胞系，在細胞培養(yǎng)過程中，應保持培養(yǎng)基中轉鐵蛋白濃度在0.5-100g/ml。針對不同的細胞系，需要選擇最合適的濃度。J.H.Brock在小鼠淋巴細胞的無血清培養(yǎng)試驗中【1】，以碳14標記的胸苷利用度為指標，比較了鼠源、人源和牛源Tf的效果。結果顯示，無論在刀豆蛋白A或者脂多糖的刺激條件下，三種來源的Tf均能

3、顯著增加小鼠淋巴細胞對胸苷的利用度，三種Tf之間的差異不顯著。Larisa Tsavaler等在人紅白血病體外細胞系K562的無血清培養(yǎng)試驗中【2】，比較了人源轉鐵蛋白和牛源轉鐵蛋白的效果，結果顯示兩者在300ug/ml的濃度條件下，均能良好支持細胞生長，無顯著差異。Robert C Penhallow等研究了Hela細胞無血清培養(yǎng)基中Tf的效果【3】，結果顯示牛源Tf與人類細胞表面的Tf受體親和力較弱，在無血清Hela細胞培養(yǎng)生長試驗中，牛源Tf與人源Tf一樣能夠支持細胞生長，但需要的濃度要較高。轉鐵蛋白凍干粉需要保存在冷藏狀態(tài)下，使用之前再溶解。一般用PBS或者其它合適的溶劑在室溫下將轉鐵

4、蛋白凍干粉溶解成儲液，濃度在0.5-2.0mg/ml,然后用無菌濾膜進行過濾，濾液可在無菌條件下2-8保存30天。質量控制：產(chǎn)品質量從源頭開始控制，牛血漿從正規(guī)農場定制，進行正規(guī)的檢驗檢疫。經(jīng)過多步色譜純化得到的轉鐵蛋白，需進行60，10h的病毒滅活，然后用0.1m濾膜過濾。產(chǎn)品最后要進行包括純度，內毒素，酸堿度，鐵含量，水分，微生物限度等檢查，以確保產(chǎn)品符合細胞培養(yǎng)要求。附圖1、轉鐵蛋白的掃描圖譜附圖2、轉鐵蛋白SDS-PAGE圖譜1為marker，2為轉鐵蛋白參考文獻1、J. H. Brock。The effect of iron and transferrin on the respon

5、se of serum-free cultures of mouse lymphocytes to Concanavalin A and lipopolysaccharide。Immunology 1981，43：387392。2、Larisa Tsavaler, Barry S. Stein, and Howard H. Sussman。Demonstration of the Specific Binding of Bovine Transferrin to the Human Transferrin Receptor in K562 Cells: Evidence for Interspecies Transferrin Internalization。J Cell Physiol 1986，128：l8。3、Robert C. Penhallow, Anne Brown-Mason, And Robert C. Woodworth。Comparative Studies of the Binding and Growth-Sup