1、慢性肺心病患者急性發(fā)作期血清NO、 NOS、 SOD和TNF水平變化        【摘要】  目的: 探討慢性肺心病患者急性發(fā)作期血清中一氧化氨(NO)、 一氧化氮合成酶(NOS)、 超氧化物歧化酶(SOD)和腫瘤壞死因子(TNF)的變化及意義。方法: 以58例慢性肺心病患者和50例健康人為研究對象, 分別應(yīng)用化學(xué)法和放射免疫法測定血清NO、 NOS、 SOD及TNF水平。結(jié)果: 肺心病組患者血清中SOD水平較健康人明顯下降(P<0.01), 而NO、 NOS和TNF水平比健康人明顯增高(P<

2、;0.01)。肺心病組患者血清NO、 NOS水平上升, 血清TNF水平也隨之上升, 呈明顯的正相關(guān)(r=0.6162, 0.6564, P<0.01); 而SOD與TNF之間無相關(guān)性(r=0.2135, P>0.05)。結(jié)論: NO、 NOS、 SOD及TNF水平變化參與了肺心病的發(fā)生、 過程。 【關(guān)鍵詞】  肺心病; 一氧化氨; 一氧化氮合成酶; 超氧化物歧化酶; TNF近年來, 由一氧化氮合成酶(NOS)催化L精氨酸生成一氧化氨(NO)在呼吸系統(tǒng)中的作用日益引起了人們的關(guān)注, 國內(nèi)外研究結(jié)果表明, NO參與了呼吸功能的調(diào)節(jié)和某些肺部疾病的發(fā)生。而氧自由基的產(chǎn)生過多,

3、清除減少造成的組織細(xì)胞損傷, 亦參與了肺部疾病的發(fā)生。超氧化物歧化酶(SOD)是一類存在于細(xì)胞內(nèi)的金屬酶, 可以催化超氧化物陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng), 因此在防御氧的毒性方面起主要作用, 且日益受到重視。腫瘤壞死因子(TNF)是一種多功能的細(xì)胞因子, 在調(diào)節(jié)心血管結(jié)構(gòu)和功能方面起主要作用。目前有關(guān)慢性肺源性心臟病患者血清NO、 NOS、 SOD及TNF水平檢測的報(bào)道不多。我們通過測定慢性肺心病患者急性發(fā)作期時(shí)血清NO、 NOS、 SOD及TNF的水平, 探討它們在慢性肺心病發(fā)生、 發(fā)展中起的作用及其相互關(guān)系。1 對象和方法1.1 對象 2006-01/2009-01我院呼吸內(nèi)科住院的慢性肺心病

4、患者58例, 男34例, 女24例。年齡4570歲, 平均(64.9±6.8)歲。診斷均符合1997年全國肺心病會(huì)議的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除高血壓病、 冠心病、 糖尿病等疾病。所有病例均為急性發(fā)作期。正常對照組為我院門診同期檢查心、 肺、 腦、 肝、 血液等正常的體檢者50例, 男28例, 女22例。年齡4065歲, 平均(59.8±6.4)歲。1.2 方法 兩組均于清晨空腹采靜脈血2 mL, 分離血清, -20保存待測, 要求肺心病組采血時(shí)未用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑及硝酸酯類藥物或已停用這兩類藥物1周以上。SOD和TNF采用放射免疫法測定, SOD試劑盒由上海放射免疫分析技術(shù)研究

5、所提供, TNF試劑盒由東雅免疫試劑研究所提供。NO、 NOS測定采用化學(xué)法, 試劑盒由南京建成生物工程公司提供。操作方法嚴(yán)格按試劑盒說明書要求。1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.00版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理, 各項(xiàng)指標(biāo)采用x±s表示, 差異比較采用t檢驗(yàn), 相關(guān)分析采用直線回歸方法。2 結(jié)果2.1 肺心病組和正常對照組血清中NO、 NOS、 SOD及TNF水平比較 肺心病組患者血清中SOD水平較正常對照明顯下降(P<0.01), 而NO、 NOS和TNF水平比正常對照明顯增高(P<0.01, 表1)。表1 兩組血清中NO、 NOS、 SOD及TNF水平比較bP<

6、0.01 vs正常對照組.2.2 肺心病組血清NO、 NOS、 SOD及TNF水平的相關(guān)分析 肺心病組患者血清NO、 NOS水平上升, 血清TNF水平也隨之上升, 呈明顯的正相關(guān)(r=0.6162, 0.6564, P<0.01); 而SOD與TNF之間無相關(guān)性(r=0.2135, P>0.05)。1         3 討論內(nèi)源性NO是由一氧化氮合成酶(NOS)催化L精氨酸生成, 根據(jù)其存在的部位及作用機(jī)制的不同, 可分為內(nèi)源型、 神經(jīng)元型和誘導(dǎo)型。NO作為生物活性分子參與了許多疾病的病理生理過程,

7、對心臟有雙向作用, 其生理性合成釋放可協(xié)助心臟正常的收縮功能, NO過量可對心肌細(xì)胞有抑制和損傷作用, 如介導(dǎo)細(xì)胞凋亡, 抑制血管平滑肌細(xì)胞的呼吸作用等, 在缺氧性肺動(dòng)脈高壓及肺損傷中起著十分重要的作用。本結(jié)果表明, 慢性肺源性心臟病患者血清NO和NOS水平均顯著地高于正常人組(P<0.01)。研究認(rèn)為NOS有多種效應(yīng): 結(jié)構(gòu)型NOS(cNOS)和誘導(dǎo)型NOS(iNOS)。cNOS在正常情況下即可合成NO, 參與調(diào)節(jié)機(jī)體的正常生理功能, 而iNOS在創(chuàng)傷、 休克、 感染等情況下活性即可增加, 合成大量的NO, 參與對各種臟器的損害。推測急性發(fā)作期患者血管NO和NOS水平的增高可能是由于病

8、原體侵人機(jī)體, 其內(nèi)毒素及多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)在器官及血管壁內(nèi)的誘生型NOS基因表達(dá)及蛋白合成, 繼而由之催化合成并產(chǎn)生過多的NO。SOD是需氧生物體內(nèi)一種內(nèi)生性氧自由基清除劑, 其功能是催化氧自由基的歧化反應(yīng), 是機(jī)體免受自由基損害的主要防御酶。氧自由基廣泛存在于生物體內(nèi), 凡能進(jìn)行有氧代謝的細(xì)胞均能產(chǎn)生氧自由基, 有其特定的生理功能, 也同時(shí)有廣泛的致病作用, 心肺疾病的損傷都與自由基反應(yīng)有關(guān)。生理情況下心肺的抗氧化能力與氧自由基的氧化能力相對平衡, 保持細(xì)胞的正常生存, 不會(huì)引起組織細(xì)胞的損傷, 在氧自由基產(chǎn)生異常增多或心肺疾病使其抗氧化能力下降時(shí), 就會(huì)引起心肺組織的損傷, 重者導(dǎo)致細(xì)胞死

9、亡。其損傷反應(yīng)主要包括: 脂質(zhì)過氧化, 蛋白質(zhì)的氧化, 糖類及核酸的損害。抗氧化的酶類SOD心肺中含量豐富, 可促使超氧陰離子向過氧化氫的轉(zhuǎn)變, 過氧化氫酶促使過氧化氫轉(zhuǎn)變成水和氧分子, 使氧自由基完全滅活, 阻斷對心肺組織的氧化損傷反應(yīng)1, 2。本研究顯示慢性肺心病急性發(fā)作期患者血清中SOD含量較健康人下降(P<0.01), 說明慢性肺心病急性發(fā)作期患者血清SOD含量下降, 對氧自由基的消除能力差, 故而氧化能力相對增強(qiáng), 影響肺心病患者的心肺功能。推測在慢性肺心病心肺功能損害的早期適當(dāng)使用抗氧化劑、 抗氧化酶及清除氧自由基等可能有助于減輕心肺功能受損程度, 對于緩解癥狀、 延緩病情進(jìn)

10、展將有一定的意義。TNF是具有廣泛的生物學(xué)功能的多效細(xì)胞因子, 它與其他細(xì)胞因子一起共同參與維持機(jī)體的內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等生理過程。本研究我們檢測慢性肺心病急性發(fā)作期患者血清中TNF水平顯著高于正常人組(P<0.01), 說明TNF隨患者病情加重時(shí)明顯升高, 其在生理情況時(shí)具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、 促進(jìn)細(xì)胞生長分化、 參與肌體免疫應(yīng)激反應(yīng)等多種生物活性, 對機(jī)體起防御等保護(hù)作用, 而在病理情況下則引起炎癥反應(yīng)、 器官損害, 如誘導(dǎo)肺泡巨噬細(xì)胞分泌IL8增多3, 4, 啟動(dòng)和加重肺部炎癥反應(yīng), 使病情加重。至于升高的原因目前尚不十分清楚, 推測可能是由于患者血中NO水平的升高刺激單核巨噬細(xì)胞釋放過多的TNF之故。這與本研究相關(guān)性分析結(jié)果顯示肺心病組患者血清NO、 NOS水平與TNF呈明顯正相關(guān)的結(jié)論是相符的。而本研究結(jié)果顯示慢性肺心病患者血清SOD與TNF之間無相關(guān)性, 提示二者可能獨(dú)立作用于慢性肺心病心衰患者, 兩者之間在慢性肺心病心衰發(fā)病機(jī)制中是否有一定的關(guān)聯(lián), 有待于今后進(jìn)一步觀察與研究。【】  1 劉曉輝, 趙洪茹, 裴少偉. 肺心病心衰患者血漿超氧化物歧化酶與腫瘤壞死因子的測定J. 廠礦醫(yī)學(xué), 2004, 17(3): 189.2 杜冠華. 氧自由基產(chǎn)生和損傷的分子機(jī)理J.國 外醫(yī)學(xué)