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文檔簡介
1、.實驗6 -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測 導學案【學習目的】1. 嘗試用吸附法制作固定化-淀粉酶。2. 應用固定化-淀粉酶進展淀粉水解的測定。3. 說明酶固定化的方法及制作原理。4. 通過此實驗討論固定化酶的應用價值。一、根底盤點:酶與固定化酶1酶:活細胞產生的具有催化作用的一類有機物,它是生物體內各種化學反響的催化劑。2固定化酶:將_的酶用_或_方法_,使之成為_而又有_的制劑。3將酶改造成固定化酶的原因是:由于酶_,且不利于_,所以要將酶改造成固定化酶。4酶固定化的方法有:_法、_法、_法和_法等。本實驗用的是_法。5固定化酶作用的機理:將固定化酶_,當_時,在_的作用下_。二、自主
2、探究:-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測實驗1. 實驗目的:1制備 。2進展 的測試。2. 實驗原理:用 法將-淀粉酶固定在 上。一定濃度的淀粉溶液經過 后,可使淀粉水解成 。用 測試,假設流出物呈_色,說明有_生成。淀粉 葡萄糖遇碘顯藍色 遇碘顯紅色 遇碘不顯色3本實驗使用的酶及特性:本實驗使用的酶是 的-淀粉酶,其作用的最適宜pH為_,最適宜溫度為_。4 實驗設備及用品:5 mL塑料注射器、50 mL燒杯、滴管、自行車用氣門芯及夾子、注射器架、試管或微量離心管3支。5實驗材料及其制備:淀粉酶的固定化:在燒杯中將5 mg 溶于4 mL 中 由于 ,可能有些不溶物; 再參加5g_
3、,不時攪拌30 min;然后將上述溶液裝入1支注射器中 該注射器的下端接有_并用_封住,石英砂體積約4 mL用 倍體積的蒸餾水_此注射器以除去 ,流速為1 mL/min。可溶性淀粉溶液:取_mg可溶性淀粉溶于100 mL_中,攪拌均勻。可溶性淀粉溶液:稱取0.127 g 和0.83 g 。加蒸餾水100 mL,完全溶解后裝入滴瓶中。6 實驗步驟: 固定化-淀粉酶,裝入注射器中 以0.3mL/min的流速滴加 過柱 流出5mL的淀粉溶液后接收0.5mL流出液 滴加 溶液,觀察顏色。用水稀釋_倍后再觀察顏色。 用_倍柱體積的蒸餾水洗滌固定化柱。放置在_冰箱中,幾天后重復實驗7預期實驗結果:三、我的
4、困惑:四、實驗優化方案:5、 最終實驗結果樣品水淀粉溶液淀粉濾液 KI-I2溶液稀釋1倍結果 對照+-+- 樣品1-+-+- 樣品2-+- 樣品3-+ 你的實驗到達預期實驗結果了嗎?假設沒有,請分析失敗原因。六、真題感悟1、2019浙江自選,17利用紫甘薯制酒可進步其附加值。請答復:由于酶在水溶液中不穩定,因此常將酶固定在某種介質上制成 。紫甘薯勻漿流經-淀粉酶柱后,取適量流出的液體,經脫色后參加KI-I2溶液,結果液體呈紅色。說明該液體中含有 。A. 淀粉 B. 糊精 C. 麥芽糖 D. 葡萄糖2、2019浙江自選,171某興趣小組欲利用固定化酶進展酶
5、解淀粉的實驗,分組見下表。組別固定化酶柱長度cm淀粉溶液的流速mL·min-1甲100.3乙100.5丙150.3丁150.5將吸附了淀粉酶的石英砂裝入柱中后,需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱,以除去_。按上表分組,將配制好的淀粉溶液參加到固定化酶柱中,然后取一定量的流出液進展KII2檢測。假設流出液呈紅色,說明有_生成;假設各組呈現的顏色有顯著差異,那么流出液中淀粉水解產物濃度最高的是_組。2以下關于上述固定化酶實驗的表達,錯誤的選項是_。A固定化酶柱長度和淀粉溶液流速決定了酶柱中酶的含量B淀粉溶液流速過快會導致流出液中含有淀粉C各組實驗所用的淀粉溶液濃度應一樣
6、D淀粉溶液的pH對實驗結果有影響3、2019浙江自選,17某工廠為了消費耐高溫植酸酶飼料添加劑,開展了產該酶菌株的挑選、酶的固定化及其特性分析研究,其流程如以下圖所示。請答復以下問題。4在適宜條件下,將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后,滴加到一定濃度的鈣離子溶液中,使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對酶進展。A.吸附 B.包埋 C.裝柱 D.洗滌5溫度與植酸酶相對酶活性的關系如下圖。以下表達錯誤的選項是。A.測試溫度中,固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60 和45 B.測試溫度范圍內,固定化植酸酶的相對酶活性波動低于非固定化植酸酶C.固定化與非固定化植酸酶相比,相對酶活性在80%以上時的溫度范
7、圍較寬D.65 時固定化與非固定化植酸酶的相對酶活性因蛋白質變性而位于最低點七、穩固練習1、以下各項中屬于固定化酶優點的是 A. 有利于增加酶的活性 B. 有利于產物的純化C. 有利于進步反響速度 D.有利于酶發揮作用2、以下關于淀粉酶的固定化過程的表達中錯誤的選項是A首先要在燒杯中將淀粉酶溶于4 mL蒸餾水中B再將5 g石英砂參加上述燒杯中,不時攪拌30 minC隨后將燒杯中的物質裝入1支下端接有氣門芯但并不封住的注射器中D最后用10倍體積的蒸餾水洗滌此注射器,除去那些未吸附的游離淀粉酶3、2019·金華十校聯考請答復與“固定化酶實驗有關的問題:1淀粉酶可以通過培養枯草桿菌來消費,是挑選高表達量菌株的最簡便方法之一。挑選出的菌株在發酵消費之前還需利用培養基進展擴大培養。2利用物理或化學的方法將淀粉酶固定后,成為且又有酶活性的制劑。假設用吸附法固定時,在裝柱后需要用 緩慢沖洗,直至流出液不使淀粉碘混合液發生為止。3將
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