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文檔簡介
1、康美膚燒傷膏對燙傷創面、表達的影響及療效觀察 摘要 目的:觀察康美膚燒傷膏對燙傷創面的療效及IL-6、IL-8的表達情況。方法:用免疫組織化學方法分析在燙傷后第1、3、5、7、14天創面組織白細胞介素表達水平的變化。結果:IL-6、IL-8在康美膚燒傷膏治療組和對照組于傷后的表達均有高峰,對照組和治療組的表達高峰時間均為傷后第3天,峰值低于對照組。結論:康美膚燒傷膏對創面具有一定療效,與IL-6、IL-8的表達有關。關鍵詞 康美膚燒傷膏;白細胞介素6;白細胞介素8Abstract Objective:To treat the burned wounds with Kangmeifu Burns
2、 Ointment and observe the expression levels of Interleukin in the process of wound healing. Methods:Immunohistochemistry analysis methods were conducted to examine the expressions of Interleukin in both groups at 1,3,5,7,14 days after scalding Results:IL-6、IL-8 had one peaks respectively in both gro
3、ups. The peaks in the blank control group and Kangmeifu Burns Ointment treated occurred at the 3 days,and the peak value was a little lower than that in the blank control group Conclusion:Kangmeifu Burns Ointment can inhibit the process of wound tissue healing through enhancing IL-6、IL-8 expressionK
4、ey word Kangmeifu Burns Ointment;IL-6;IL-8康美膚燒傷膏是根據閩南名醫黃金鋼驗方,由福建地產藥材九龍藤、金線蓮、冰片等組成的中藥外用軟膏劑,臨床上主治各種度燒傷,對淺度、深度和殘余創面愈合均有一定的作用1。在創面愈合過程中,白細胞介素(IL-6、IL-8)等細胞因子參與多方面和多層次的調控2。為探討其在促進創面愈合過程中的分子機制,本文進行了下述實驗,以探討康美膚燒傷膏對燙傷創面愈合中IL-6、IL-8表達的影響。1材料與方法1.1材料、試劑與動物康美膚燒傷膏(自制);白細胞介素(IL-6、IL-8)試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司);SD大鼠,體重1
5、80220 g,雌雄各半,由福建醫科大學動物中心提供。合格證號:SGXK(閩2004-0002號)。1.2模型建立造模前24 h,大鼠用8%硫化鈉脫毛,面積約30 cm2,用戊巴比妥鈉(30 mg/kg)腹腔麻醉,浸入100水浴槽孔(面積約30 cm2)內持續燙15 s,造成面積約30 cm2的圓形深度創面,病理切片證實。將大鼠隨機分成2組,各只。治療組:傷后創面用康美膚燒傷膏均勻涂抹,1次/d;對照組:傷后創面不用藥,用清水清洗,1次/d。分別于傷后1、3、5、7、14 d取創面組織標本,用4甲醛固定,石蠟包埋,備用。1.3觀察指標1.3.1大體及組織學觀察觀察大鼠兩組創面愈合時間、分泌物、
6、結痂及感染情況;燙傷后不同時間兩組創面的病理組織學觀察。1.3.2免疫組織化學染色分析創傷后第1、3、5、7、14天,取部分創基及少許周圍正常皮膚,置液氮中保存備用。創面組織經4甲醛固定,常規石蠟包埋。4 m厚連續切片,免疫組化染色按相應試劑盒說明進行,苯胺顯色,蘇木精伊紅復染,脫水透明,中性樹膠封片。將IL-6和IL-8的表達情況分為三個等級:陰性()胞漿或胞膜未見著色;陽性(+)胞漿內顆粒較細,顯色高于背景;強陽性(+)胞漿內陽性顆粒粗而多,顯色明顯。2結果2.1大體及組織學觀察大鼠燙傷后2 d創面干燥結痂,痂皮呈淡黃色,質地較軟,無異常分泌物及感染等。治療組第14天創面愈合率為(43.8
7、3±6.42),明顯高于對照組的(33.08±5.34)(P<0.05)。組織學觀察可見治療組創面炎性滲出及水腫程度均較對照組輕(圖1)。圖1大鼠度燙傷皮膚創面組織學觀察正常皮膚;燙傷創面;康美膚燒傷膏組創面組織炎癥反應輕;自然愈合組創面組織炎癥滲出明顯 2.2免疫組織化學結果結果見表1。由表可知,IL-6呈高水平表達,兩組創面均于傷后第1天開始,在中性粒細胞和單核細胞中表達IL-6,第3天達高峰,第5天起表達水平逐漸下降。但用藥組的IL-6峰值較對照組低,差異有統計學意義(P<0.05)。IL-8呈高水表1 兩組創面不同時相點IL-6、IL-8
8、表達的比較(只)與對照組比較,*P<0.05平表達,用藥組與對照組在傷后第l天,均可見淋巴細胞和單核細胞IL-8的表達;第3天成纖維細胞中亦有明顯表達,第5天起表達水平緩慢下降;但對照組明顯低于用藥組,兩組比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表l。3討論研究表明,IL-6能誘導B細胞的終末分化,刺激漿細胞瘤和雜交瘤的生長,誘導肝細胞產生急性期蛋白質,刺激造血干細胞,刺激T細胞和胸腺細胞3。IL-8能趨化和激活中性粒細胞,趨化嗜堿性粒細胞和釋放組胺,促進T淋巴細胞參與免疫應答作用,增加內皮細胞的通透能力4。IL-6、IL-8是介導應激、炎癥、免疫反應等急性期反應重
9、要的介質之一5-7,在燒傷早期和膿毒癥等兩者顯著升高,其變化與動物燒傷后臟器功能衰竭的發生、預后有密切關系。由本實驗可知,在燙傷創面組織IL-6表達中,治療組和對照組兩組創面均于傷后第1天開始,在中性粒細胞和單核細胞中表達,第3天達高峰,第5天起表達水平逐漸下降。但治療組的創面愈合中,第14天創面愈合率明顯大于對照組的(P<0.05);同時,IL-6的表達峰值明顯低于對照組,差異有統計學意義。在IL-8表達中,傷后第l天用藥組和對照組創面淋巴細胞和單核細胞中均有表達,傷后第3天在成纖維細胞中亦有大量表達,而后隨著炎癥的消退表達逐漸減弱。表明IL-8作為一種促炎性細胞因子,參與了創
10、面修復的病理生理發展過程。傷后第3天,用藥組IL-8的表達明顯低于對照組,此現象一直維持到實驗觀察結束。實驗表明康美膚燒傷膏對創面愈合具有一定療效,與IL-6、IL-8的表達有關,也提示了IL-6、IL-8的表達水平可作為燒燙傷治療過程創面愈合的指標參考。參考文獻1徐偉,洪振豐,王瑞國.康美膚燒傷膏制備工藝的研究J.福建中醫學院學報,2007,17(1):24-25.2Deveci M,Eski M,Sengezer K, et a1Effects of cerium nitrate bathing and promp bum wound excision on IL-6 and TNF-q
11、levels in burned ratsJBurns,2000,26(6):41-45.3王德昌,吳秋合.嚴重燒傷患者血漿IL-6、IL-8水平及其與感染的關系J.中華燒傷雜志,2000,16(3):185-186.4Baggiolini MChemokines in pathology and medicineJJ Intern Med,2001,250(6):91-92.5張紅金,陳德昌,湯大明,等.燙傷對小鼠皮膚內炎性細胞因子基因表達的影響J.中國急救醫學,2003,23(3):147-148.6Xue H,McCauley RL,Zheng W,Martini DX.Altered int
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