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文檔簡介
1、目的掌握尿蛋白定性試驗的方法。方法一磺基水楊酸法原理在酸性條件下,磺基水楊酸的磺酸根陰離子與蛋白質氨基酸陽離子結合,形成不溶性蛋白鹽器材小試管或凹玻片。試劑200g L 磺基水楊酸溶液:磺基水楊酸200g 溶于 1000ml 蒸餾水中。標本來源病人不同程度的蛋白尿標本。尿蛋白定性結果判斷反應外觀結果報告相當蛋白質含量( g/仍清澈透明()<0.05微混濁( ±)0.050.1明顯白色混濁,但無顆粒(+ )0.10.5明顯白色混濁且出現顆粒(+)0.52.0明顯白色混濁且有絮狀沉淀(+ )2.05.0嚴重混濁且有大凝塊沉淀( + )>5.0操作步驟以試管法為例:1、加尿液在
2、2 支試管中各加清晰尿液1ml( 如為混濁尿標本,應離心后取上清液;堿性尿應滴,使尿液pH 為 5 左右再試驗 )。2、加試劑在1 支試管中加磺基水楊酸2 滴并混勻, 1min 時與另 1 支試管中空白尿液比較,3、判斷結果見表。報告方式尿蛋白定性:陰性或陽性( 磺基水楊酸法 )本法結果陽性,即可報告陽性。必要時可用加熱乙酸法證實,并以加熱乙酸法為準報告結果方法二加熱乙酸法原理加熱煮沸使蛋白質變性凝固,加乙酸使尿 pH 接近蛋白質等電點 (pH5 左右 )而加速蛋白質沉器材中試管、木夾、酒精燈。試劑5(V V) 冰乙酸溶液。標本來源病人不同程度的蛋白尿標本。操作步驟1、加尿液在試管中加清晰尿液
3、至管高2 3 處,混濁尿標本應離心后取上清液再試驗。2、煮沸尿液用木夾夾持(或手持 )試管下 1 3 處,加熱煮沸試管上13 處內的尿液 (注意:試管均勻加熱,防止尿液沸濺)。3、觀察結果將試管上部加熱處尿液與試管下部未加熱尿液比較;觀察有無混濁變化。4、加試劑在試管中加入5(v v)冰乙酸 2 滴。5、再煮沸尿液、立即觀察結果,方法同步驟3。6、結果判斷和報告見表。報告方式尿蛋白定性:陰性或陽性( 加熱乙酸法 )方法三干化學試帶法方法學評價尿蛋白定性陽性有重要意義,通常篩檢試驗陽性時,應再用第二種尿蛋白檢測方法加以確證蛋白質定性試驗,最常用的是干化學試帶法,磺基水揚酸法次之,加熱乙酸法用于確
4、證。1、干化學試帶法只對白蛋白敏感(70mg L) ,對球蛋白不敏感, 故不適用于腎病患者;但操2、磺基水楊酸法與白、 球蛋白等均起反應,敏感性高 (50mg L) ,為篩檢試驗之首選, 但易堿性尿時可出現假陽性;反應時間超過 lmin ,陽性程度增加,故應準時觀察判斷結果。本法查本周蛋白尿,即被檢尿遇此試劑出現渾濁,但加熱后消退。3、加熱乙酸法與白、球蛋白均起反應,敏感性較低 (150mg L)、但檢測結果可靠、常作為或陽性的確證試驗; 非新鮮尿可出現假陽性; 電解質含量少的尿液或加乙酸量過多過少 (超過本反應可呈假陰性,前者可在尿中加 1 2 滴飽和氯化鈉糾正后再試驗,后者則強調加酸量參考值陰性。臨床意義尿蛋白定性陽性稱為蛋白尿,主要反映了腎小球通透性增加或腎小球和 ( 或)腎小管損害。持是腎臟病變的重要指標,其陽性程度一般與病變程度呈正相關。1、腎前性蛋白尿多發性骨髓瘤所致本周蛋白尿、血紅蛋白尿、急性溶血或擠壓傷等所致2、腎性蛋白尿多由腎小球
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