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文檔簡介
1、 . . . 一種去除牛血清白蛋白中脂肪酸的生產工藝技術領域 本發明涉與一種去除牛血清白蛋白提取過程中殘留脂肪酸的生產工藝。技術背景 牛血清白蛋白廣泛用于診斷試劑行業,生物工程、細胞培養等科學研究領域。制備牛血清白蛋白的方法很多,但在制備過程中均需添加辛酸鈉作為牛血清白蛋白的保護劑,產品存在制備純度不高,脂肪酸殘留量過高的弊端。一些生物醫學研究要求使用不含游離脂肪酸的牛血清白蛋白,否則牛血清白蛋白所含高濃度的脂肪酸將影響細胞培養、分化、代反應、生化測定等。例如,在3T3-L1脂肪細胞分化過程中不能使用普通牛血清白蛋白試劑,否則影響分化和細胞代狀態;在測定培養的組織細胞釋放的游離脂肪酸濃度時,也
2、必須用不含脂肪酸的牛血清白蛋白,否則難以準確測定甘油三酯水解和游離脂肪酸釋放。因此,對傳統工藝提取的牛血清白蛋白進行脫脂肪酸處理可提高牛血清白蛋白的純度,擴大牛血清白蛋白產品的應用圍。發明目的 本發明的目的在于提供一種去除牛血清白蛋白中脂肪酸的方法,用以解決傳統工藝提取的牛血清白蛋白中脂肪酸含量過高,不能適用于細胞培養、生物工程學實驗的難題。提高產品品質。發明容 本發明提供了一種去除牛血清白蛋白中殘留脂肪酸的處理工藝。它用料少,成本低,工藝簡單,生產出的產品適用于細胞培養和生物工程試驗。本發明的技術方案如下:本發明的工藝路線:1、 溶解。取適量的牛血清白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸餾水中,溶解
3、溫度在2327。 用濃度為0.2N的HCl,調節PH至33.5。2、 解析。充分溶解后的溶液牛血清白蛋白移至冰水混合物中進行冰水浴,同時持續攪拌,維持30min。3、 吸附。加入5%的活性炭,混勻,混懸液將混懸液移至冰水混合物中進行冰水浴,同時持續攪拌,維持1小時。過濾,濾渣回收后再利用。4、 濃縮。 濾液用0.2N的NaOH調節PH值至7.0,然后用20000分子量以下的超濾器進行超濾濃縮。5、 凍干。將濃縮液按凍干曲線凍干,即將超濾后的濃縮液迅速冷凍至-40,持續1小時左右,升到-25,持續1020小時,再緩慢升溫至,維持小時,升溫至保存溫度,分裝為成品。上述步驟中的為.5步驟2中的活性炭
4、用量為56%步驟3中的冰水混合物的溫度為04本發明的優點在于:1、 用料少、成本低、工藝簡單。本方法利用少量的活性炭在04溫度下攪拌吸附1小時即可完成。2、 可操作性強、易于工業化生產。3、 所成產的產品純度高,脂肪酸含量極微,可以滿足細胞培養、生物工程實驗要求的標準。4、 本方法的稅收率高,回收率可以達到90%。5、 成本低、經濟效益顯著。質量標準對比檢驗項目處理后的牛血清白蛋白處理前的牛血清白蛋白外觀白色或類白色凍干粉末白色或類白色凍干粉末溶解性1%溶液溶解時間2min1%溶液溶解時間2min純度98%98%蛋白質含量98%98%水分.5%5%脂肪酸含量0.002%0.3%具體實施方式 實
5、施例1本發明的工藝步驟:1、 牛血清白蛋白處理: 取1kg牛血清白蛋白粗品,溶解于10L的蒸餾水中,充分攪拌至溶液澄清。2、 解析和吸附 用0.2N的HCl,調節溶液PH至3.2,將溶液置于冰水混合物中,攪拌水浴30min。 稱取活性炭500g,邊攪拌邊慢慢加入。加入后持續攪拌1小時。3、 過濾 將混懸液用定性濾紙過濾,收集濾液,活性炭回收處理后可重復利用。4、 濃縮 濾液用0.2N的NaOH調節PH值至7.0,然后將濾液用分子量為20000的超濾柱進行超濾濃縮。5、 凍干 將濃縮液按凍干曲線凍干,即將超濾后的濃縮液迅速冷凍至-40,持續1小時左右,升到-25,持續12小時,再緩慢升溫至,維持
6、4小時,升溫至保存溫度,保持30分鐘。6、 包裝 回收產品稱重后,用塑料瓶按照包裝規格分裝后為成品不含脂肪酸的牛血清白蛋白。本品包裝為100g容量的塑料瓶。活性炭(200目)為活性炭廠出產的針用活性炭鹽酸(分析純)為市渤海化學試劑廠出產。氫氧化鈉(分析純)為市天力化學試劑出產。實施例2 1、 牛血清白蛋白處理: 取1kg牛血清白蛋白粗品,溶解于10L的蒸餾水中,充分攪拌至溶液澄清。2、 解析和吸附 用0.2N的HCl,調節溶液PH至3.0,將溶液置于冷藏室溫度為4的冷藏庫中,攪拌30min。 稱取活性炭500g,邊攪拌邊慢慢加入。加入后持續攪拌1小時。3、 過濾 將混懸液用定性濾紙過濾,收集濾液,活性炭回收處理后可重復利用。4、 濃縮 濾液用0.2N的NaOH調節PH值至7.0,然后將濾液用分子量為20000的超濾柱進行超濾濃縮。5、 凍干 將濃縮液按凍干曲線凍干,即將超濾后的濃縮液迅速冷凍至-40,持續1小時左右,升到-25,持續18小時,再緩慢升溫至,維持4小時,升溫至保存溫度,保持30分鐘。6、 包裝 回收產品稱重后,用塑料瓶按照包裝規格分裝后為成品。本品包裝為100g容量的塑料瓶。活性炭為活性炭廠出產的針用活性炭(200目)。鹽酸(分析純)為市渤海化學試劑廠出產。氫氧化鈉(分析純)為市天力化學試劑出產。申請人: 奇特生物高
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