1、 一、植物組織培養(yǎng)的過程 1.菊花的組織培養(yǎng)過程 二、影響植物組織培養(yǎng)的因素及成功的關(guān)鍵 1影響因素 (1)內(nèi)部因素：材料的選取。 (2)外部因素：營養(yǎng)成分的種類及配比；植物激素的用量及使用順序；ph、溫度、光照等。 2獲得成功的關(guān)鍵 (1)植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗逆性差，對培養(yǎng)條件要求較高。 (2)培養(yǎng)材料一旦被微生物污染，就會導(dǎo)致實驗失敗。原因是微生物增殖快，生長迅速，消耗養(yǎng)分多，并產(chǎn)生代謝廢物毒害培養(yǎng)材料。 (3)無菌技術(shù)主要包括對操作空間、實驗用具、實驗材料以及操作者的消毒滅菌。三、實驗操作中應(yīng)注意的幾個問題 1材料的選取：菊花的組織培養(yǎng)實驗中，應(yīng)選擇未開花植株的莖上部新

2、萌生的側(cè)枝；月季花藥的培養(yǎng)實驗中，應(yīng)選擇花粉發(fā)育過程中的單核靠邊期的花粉進行培養(yǎng)。 2外植體消毒：所用消毒劑為體積分數(shù)為70%的酒精和質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是無菌水。 3培養(yǎng)過程：在初期，菊花的組織培養(yǎng)需光照，月季花藥的培養(yǎng)不需光照，而在后期均需光照。 【解析】脫分化、再分化過程與植物激素生長素和細胞分裂素有關(guān)，且生長素用量與細胞分裂素用量直接影響培養(yǎng)過程。當(dāng)生長素/細胞分裂素比值高時，有利于根的分化，抑制芽的分化，即表中的c組；當(dāng)生長素/細胞分裂素比值低時，有利于芽的分化，抑制根的分化，即表中的d組；當(dāng)比值適中時，有利于促進愈傷組織的生長，即表中的b組。欲快速、大量獲

3、得此植物的花芽，必須首先獲得大量的嫩枝。 【答案】 (1)b、c、d細胞分裂素濃度大于生長素濃度 (2)細胞分裂素含量與生長素含量之間的比例(或培養(yǎng)基中細胞分裂素與生長素的濃度比)d1植物激素在組織培養(yǎng)過程中的作用2.如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物被污染，特別是真菌性污染，一定不要打開培養(yǎng)瓶。應(yīng)先將被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸氣鍋內(nèi)進行高壓蒸汽滅菌，再打開培養(yǎng)瓶進行清理。區(qū)分污染類型的方法：比較菌落特征。真菌污染：有顏色的絨毛狀菌落；細菌污染：有光澤的黏液狀菌落。 1.(2008江蘇)下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是( ) a培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓 b培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素影

4、響愈傷組織的生長和分化 c離體器官或組織的細胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織 d同一株綠色開花植物不同部位的細胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同d 【解析】此題考查學(xué)生對植物組織培養(yǎng)技術(shù)的掌握。培養(yǎng)基中加入蔗糖的目的：一方面可以提供營養(yǎng)，另一方面可以調(diào)節(jié)滲透壓；在整個組織培養(yǎng)過程中影響再分化的關(guān)鍵是生長素和細胞分裂素的使用比例和使用順序；組織培養(yǎng)過程中的第一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)是脫分化，從而形成愈傷組織；組織培養(yǎng)的對象既可以是體細胞也可以是生殖細胞，因此獲得的愈傷組織的基因組成不一定相同，采用綠色開花植物的生殖器官部位如花藥進行培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因只有體細胞的一半。2.(2008江蘇)某組織培養(yǎng)實驗室

5、的愈傷組織被真菌嚴重污染，為查找污染原因設(shè)計了4個實驗，實驗條件除圖示外其他均相同。下列各圖表示實驗結(jié)果，據(jù)圖可得出的初步結(jié)論是(多選)( ) abcda污染主要不是培養(yǎng)基滅菌時間短造成的b污染主要來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織c調(diào)節(jié)培養(yǎng)基ph不能解決污染問題d調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問題【解析】從圖一不難看出培養(yǎng)基滅菌時間長短不是污染的主要原因；無論調(diào)節(jié)ph還是調(diào)節(jié)溫度都不能解決污染的問題；由于其他實驗條件都相同，只要離體組織滅菌的時間足夠長，污染率會大大降低，說明沒有其他污染途徑，因此離體組織滅菌時間不夠是污染的主要來源。 3.(2009山東)人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。

6、利用細胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下： 請回答： (1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進行_。接種前，要對人參根進行_。 (2)用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做_。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于_污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于_污染。滅菌消毒外植體真菌(霉菌)細菌 (3)用少量_酶處理愈傷組織，獲取單細胞或小細胞團，在液體培養(yǎng)基中進行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。 (4)人參皂苷易溶于水溶性(親水性)有機溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用_方法，操作時應(yīng)采用_加熱。果膠萃取(浸取)水浴 【解析】山東理綜生物試題的選修1試題，歷年來，都是立足課

7、本，主要考查課本的基礎(chǔ)知識，題目較簡單。以植物組織培養(yǎng)為材料背景考查了植物組織培養(yǎng)過程中涉及的培養(yǎng)基及消毒滅菌的相關(guān)知識及污染后的菌落特征的比較。同時考查了選修1中關(guān)于物質(zhì)的提取和鑒定的專題，跨度較大，考查的知識面較廣。 (1)接種前，要對材料進行消毒(不能填滅菌，滅菌時是采用強烈的因素殺菌)，配制培養(yǎng)基并分裝后要用滅菌鍋滅菌。 (2)比較菌落特征： 真菌污染：有顏色的絨毛狀菌落；細菌污染：有光澤的黏液狀菌落。 (3)利用果膠酶處理愈傷組織可以獲得單個的細胞。 (4)由題干知，人參皂苷易溶于親水性有機溶液，故而采用萃取的方法可以從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷。4.在月季花藥培養(yǎng)成單倍體植株的過程中

8、，應(yīng)選擇哪個時期最易成活( )a單核期前的花藥 b單核期后的花藥c單核期花藥 d雙核期c【解析】單核期花藥(花粉)具有較強的分裂能力，故而易成活。 5.(2011東北四校模擬)菊花的組織培養(yǎng)的大致過程如下圖所示。請回答下列問題：(1)外植體的消毒：選取生長旺盛的嫩枝，沖洗干凈。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分數(shù)為70%的 中搖動23次，持續(xù)67 s，立即將外植體取出，在無菌水中清洗。吸干表面水分，放入質(zhì)量分數(shù)為0.1%的 溶液中12 min。取出后，在無菌水中至少清洗3次，其目的是 。酒精氯化汞或升汞漂凈消毒液(2)菊花組織培養(yǎng)過程中，啟動細胞分裂、b (填名稱)、再分化的關(guān)鍵激素

9、是 。通過b過程產(chǎn)生的愈傷組織細胞與枝條韌皮部細胞形態(tài)結(jié)構(gòu) (相同/不同)，其根本原因是 。(3)該實驗操作成功的關(guān)鍵是 ，所以要對外植體、超凈工作臺等消毒，對 等滅菌，實驗操作過程都要在 旁進行。試管幼苗的獲得證明菊花體細胞具有 性。脫分化細胞分裂素、生長素不同基因的選擇性表達無菌操作或無菌技術(shù)培養(yǎng)基或培養(yǎng)器具酒精燈的火焰全能6.(原創(chuàng))胡蘿卜的韌皮部細胞通過無菌操作接種入試管后，在一定條件下可以形成試管苗，請回答下列問題：(1)在組織培養(yǎng)過程，如果先使用生長素，后使用細胞分裂素，則 。(2)對外植體(韌皮部)消毒：先用 消毒，再用 消毒。(3)在培養(yǎng)基中加入蔗糖的目的是 。有利于分裂但不分化體積分數(shù)為70%的酒精質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓7.(改編)(1)植物組織培養(yǎng)可實現(xiàn)玉米等植物的大規(guī)?？焖俜敝?，圖解如下，由外植體通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育成完整植物，這項技術(shù)利用了 原理，通過培養(yǎng)技術(shù)進行植物繁育，可以很好地保持親本的優(yōu)良性狀，原因是 。a、b分別代表 和