1、云南紅豆杉生長過程中10-去乙酰巴卡亭的含量變化云南紅豆杉生長過程中10-去乙酰巴卡亭的含量變化作者：李海峰，趙志蓮，劉光明 【摘要】目的研究云南紅豆杉生長過程中不同部位10-去乙酰巴卡亭(10-deacetyl baccatin)的含量變化。方法采用色譜柱agilent c18色譜柱（250 mm4.6 mm，5 m），流動相為甲醇-乙腈-水(421345），流速1.0 mlmin-1，柱溫32，檢測波長234 nm，測定云南紅豆杉生長過程中不同部位10-去乙酰巴卡亭的含量。結果回歸方程 y = 15.290 29x -4.059 76 (r = 0.999 0)，線性范圍5.50550 g

2、ml-1；加樣回收率（n=6）98.6%，rsd為2.4%。在云南紅豆杉生長期樹皮中10-去乙酰巴卡亭含量高于枝葉，是枝葉中最高含量的1.498倍；休眠芽分化期和休眠期是10-去乙酰巴卡亭積累的關鍵時期，在枝葉中的含量顯著高于樹皮，最高含量達0.115 0%是樹皮中最高含量的1.769倍，二年生枝葉中含量略高于一年生枝葉。結論該方法簡便、準確度高，可用于云南紅豆杉枝葉的質量控制。 【關鍵詞】 云南紅豆杉 生長過程 10-去乙酰巴卡亭 高效液相色譜法abstract：objectiveto study the content change of 10-deacetyl baccatin of t

3、he different parts in the growing process of taxus yunnanensis.methodshplc was adopted.the mobile phase of agilent c18 chromatogram column (4.6 mm250 mm, 5 m) was meoh-acetonitrile-h2o(42:13:45), the flow speed was 1.0 mlmin-1, the column temperature was 30 and the detection wavelength was set at 23

4、4 nm. the content change of 10-deacetyl baccatin of the different parts in the growing process of taxus yunnanensis was determined. resultsthe regression equation of tenuifolin was y = 15.290 29x -4.059 76 (r = 0.999 0) and the linear range was 5.50550 gml-1 . the recoveries of 10-deacetyl baccatin

5、was 98.6% ( rsd = 2.4%).in the growing season of taxus yunnanensis, the content of 10-deacetyl baccatin in bark was higher than that in branches and leaves, its 1.498 times of the highest content in branches and leaves.the differentiation period of dormant bud and the period of dormancy were the cri

6、tical period of 10-deacetyl baccatin accumulation, the content in branches and leaves was notable higher than that in bark, the highest content was up to 0.115 0%, its 1.769 times of the highest content in bark. the content in biennial branches and leaves was higher than that in the annual.conclusio

7、nthis method is convenient and has high accuracy. it can be used for quality control of taxus yunnanensis branches and leaves.key words： taxus yunnanensis; growth; 10-deacetyl baccatin; hplc10-去乙酰巴卡亭(10-deacetyl baccatin,簡稱為10-dab)1是從紅豆杉屬植物（taxus）短枝葉中分離、提取得到的一種紫杉烷二萜類化合物，是目前和 科學 研究用紫杉醇和多烯紫杉醇化學半合成的重要前

8、體化合物，在緩解紫杉醇資源短缺問題中起著不可替代的作用。云南紅豆杉taxus yunnanensis是我國現(xiàn)有幾種紅豆杉植物中紫杉醇和10-dab含量較高、分布最廣的樹種2。從紅豆杉枝葉中提取、分離10-dab，再經(jīng)過化學半合成生產(chǎn)紫杉醇和多烯紫杉醇，是一條不破壞紅豆杉野生植物資源基礎上能實現(xiàn)資源再生利用的有效途徑。有關10-dab的研究報道主要是從紅豆杉植物中提取、分離、含量測定、半合成紫杉醇和多烯紫杉醇，而對云南紅豆杉生長過程中不同部位10-dab含量變化研究未見報道。因此，本文利用高效液相法對云南紅豆杉生長過程中不同部位10-dab的含量變化作了檢測，為建立科學、合理的云南紅豆杉枝葉采摘

9、標準提供 參考 。 1 儀器與試劑 美國惠普公司agilent1100高效液相色譜儀，包括溶劑箱、四元梯度泵、真空脫氣機、微量自動進樣器、恒溫柱溫箱、可變波長檢測器。賽樣臺式 計算 機（agilent chemstation 色譜站）。buchi旋轉蒸發(fā)儀，sy8200t超聲波清洗器（上海聲源超聲波儀器設備有限公司），ab104 電子 天平（瑞士mettletoledo公司），dzf-6021型真空干燥箱（上海一恒科技有限公司）。待添加的隱藏文字內容210-dab標準品由sicma提供（純度99%）；樣品處理用甲醇、醋酸乙酯為分析純；高效液相專用去離子水，進行高效液相分析的流動相乙腈、甲醇均為

10、色譜純。 2 方法與結果 2.1 對照品儲備液的制備精密稱取10-dab 1 100 g加入到10 ml容量瓶中，用ch3oh溶解并定容，得對照品儲備液(110 gml-1)。2.2 供試品溶液的制備按 文獻 3報道的方法，精密稱取樣品粉末（60目篩）0.5 g，置于100 ml容量瓶中，加甲醇20 ml，超聲處理30 min，浸泡24 h，過濾，濾渣分別用15 ml ch3oh按此步驟重復處理2次，合并3次提取濾液，30水浴濃縮，加醋酸乙酯-5 %nahco3（11）40 ml萃取，收集醋酸乙酯層，水層分別用10 ml醋酸乙酯萃取兩次，合并三次萃取的醋酸乙酯層，30水浴濃縮揮干溶劑，用5 ml甲醇定容，0.45 m濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。2.3 色譜條件按文獻3報道的方法，色譜柱為agilent c18色譜柱（250 mm4.6 mm，5 m），流動相為甲醇-乙腈-水（421345），檢測波長234 nm，流速1.0 mlmin-1，柱溫32，進樣量10 l。2.4 方法專屬性在“2.3”項色譜條件下，分別取對照品溶液和供試品溶液進樣測定，得到特征峰，供試品溶液與雜質分離良好，無干擾（對照品與樣品的色譜見12)。2.5 線性關系考察分別精密吸取適量的對照品儲備液，用甲醇依次稀釋成55.0 ，44.0 ，