2020pcr考試試題及答案

一、單項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術的主要發明人是（）A.KaryMullisB.JamesWatsonC.FrancisCrickD.RosalindFranklin答案：A2.PCR反應中，DNA變性所需的溫度一般是（）A.55-60℃B.72℃C.90-95℃D.37℃答案：C3.以下哪種物質不是PCR反應的基本成分（）A.模板DNAB.引物C.RNA聚合酶D.dNTPs答案：C4.在PCR反應中，引物的作用是（）A.提供起始合成的3'-OH末端B.提供起始合成的5'-OH末端C.終止反應D.提供能量答案：A5.PCR反應的循環次數一般為（）A.1-5次B.10-20次C.20-30次D.50-100次答案：C6.以下哪種PCR技術可以用于定量分析（）A.普通PCRB.實時熒光定量PCRC.巢式PCRD.反向PCR答案：B7.PCR反應中，延伸階段的溫度一般是（）A.55-60℃B.72℃C.90-95℃D.37℃答案：B8.如果PCR反應沒有得到預期的產物，可能的原因不包括（）A.引物設計錯誤B.模板DNA質量差C.反應體系中酶量過多D.反應溫度合適答案：D9.在PCR反應中，dNTPs的作用是（）A.作為合成DNA的原料B.作為酶的激活劑C.作為引物D.作為緩沖劑答案：A10.以下關于PCR的說法錯誤的是（）A.具有高度的特異性B.靈敏度高C.只能擴增DNAD.可以在短時間內大量擴增目的DNA答案：C二、多項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應的特點包括（）A.特異性強B.靈敏度高C.簡便快捷D.對模板要求低答案：ABC2.影響PCR反應的因素有（）A.引物B.模板C.酶D.反應溫度和時間答案：ABCD3.以下哪些是PCR技術的應用領域（）A.基因克隆B.疾病診斷C.法醫學鑒定D.遺傳疾病的檢測答案：ABCD4.以下屬于PCR衍生技術的有（）A.巢式PCRB.多重PCRC.反向PCRD.實時熒光定量PCR答案：ABCD5.在設計PCR引物時，需要考慮的因素有（）A.引物長度B.引物的GC含量C.引物的特異性D.引物之間不能互補答案：ABCD6.PCR反應體系中，緩沖液的作用包括（）A.維持pH值B.提供離子環境C.穩定酶活性D.作為底物答案：ABC7.以下關于實時熒光定量PCR的描述正確的是（）A.可以實現對起始模板的定量分析B.有熒光染料法和熒光探針法C.靈敏度高D.特異性強答案：ABCD8.巢式PCR的優點包括（）A.提高特異性B.提高靈敏度C.降低非特異性擴增D.操作簡單答案：ABC9.在進行PCR實驗時，防止污染的措施有（）A.實驗分區B.使用一次性耗材C.嚴格的操作規范D.定期對儀器設備進行清潔答案：ABCD10.以下關于PCR反應中模板DNA的說法正確的是（）A.可以是基因組DNAB.可以是cDNAC.質量會影響反應結果D.純度要求高答案：ABCD三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR只能擴增雙鏈DNA。（）答案：錯誤2.引物在PCR反應中是可以重復利用的。（）答案：錯誤3.實時熒光定量PCR比普通PCR更加靈敏。（）答案：正確4.PCR反應中，延伸時間越長越好。（）答案：錯誤5.巢式PCR是進行兩輪PCR反應。（）答案：正確6.在PCR反應體系中，dNTPs的濃度越高越好。（）答案：錯誤7.只要引物設計正確，PCR就一定能得到目的產物。（）答案：錯誤8.所有的RNA都可以通過反轉錄后進行PCR擴增。（）答案：錯誤9.PCR反應中，酶的活性不受溫度影響。（）答案：錯誤10.多重PCR是在一個反應體系中同時擴增多個目的基因。（）答案：正確四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述PCR的基本原理。答案：PCR即聚合酶鏈式反應，以擬擴增的DNA分子為模板，以一對分別與模板互補的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成。通過多次循環，使目的DNA片段得到大量擴增。2.請說明在PCR反應中引物設計的重要性及原則。答案：重要性：引物是PCR反應的關鍵因素，直接影響反應的特異性和擴增效率。原則：合適的長度（一般18-30bp）、合適的GC含量（40%-60%）、引物特異性強、引物之間不能互補等。3.簡述實時熒光定量PCR的工作原理。答案：在PCR反應體系中加入熒光基團，隨著PCR反應的進行，產物不斷積累，熒光信號強度也隨之變化。通過檢測每個循環的熒光信號，可實時監測PCR反應進程，并且根據標準曲線對起始模板進行定量分析。4.說明巢式PCR的操作過程。答案：先進行第一輪PCR，以基因組等為模板，使用一對引物擴增出包括目的片段在內的較大DNA片段；然后以第一輪PCR產物為模板，使用內部引物進行第二輪PCR，從而特異性地擴增出目的DNA片段。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論PCR技術在新型冠狀病毒檢測中的應用。答案：PCR技術可用于檢測新冠病毒的核酸。通過設計針對新冠病毒特定基因序列的引物，從患者樣本中提取核酸進行PCR擴增。若能擴增出特定產物，則為陽性，有助于快速診斷感染病例，對疫情防控有重要意義。2.如何提高PCR反應的特異性？答案：可從引物設計、優化反應條件兩方面入手。設計特異性強、長度和GC含量合適的引物，嚴格控制反應溫度、時間、酶量和模板質量等反應條件。3.請分析PCR技術在基因工程中的作用。答案：在基因工程中