基于一測多評及雙標多測法的陳皮黃酮類成分精準測定研究一、引言1.1研究背景與意義中藥作為中華民族的瑰寶，在人類健康領域發揮著舉足輕重的作用。然而，由于中藥成分復雜，來源廣泛，其質量控制一直是制約中藥現代化和國際化發展的關鍵因素。中藥質量的不穩定，不僅影響其臨床療效，還可能對患者的健康造成潛在風險。因此，建立科學、準確、可行的中藥質量控制方法，對于保障中藥的安全性和有效性，促進中藥產業的健康發展具有重要意義。陳皮，作為一種常用的中藥材，為蕓香科植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮，具有理氣健脾、燥濕化痰等功效，被廣泛應用于消化系統、呼吸系統等疾病的治療。陳皮中含有多種化學成分，如黃酮類、揮發油類、檸檬苦素類等，其中黃酮類成分是其主要的活性成分之一，具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤、降血脂等多種生物活性。然而，不同產地、不同采收季節、不同炮制方法的陳皮中黃酮類成分的含量和種類存在較大差異，這直接影響了陳皮的質量和療效。因此，準確測定陳皮中黃酮類成分的含量，對于評價陳皮的質量和控制其品質具有重要意義。傳統的中藥質量控制方法多以單一成分含量測定為主，難以全面反映中藥的質量和療效。一測多評法（QuantitativeAnalysisofMulti-componentsbySingle-marker，QAMS）和雙標多測法作為新型的中藥質量控制方法，能夠通過測定一個或兩個代表性成分的含量，實現對多個成分含量的同步測定，從而全面反映中藥的質量和療效。一測多評法的原理是通過中藥有效成分間存在的內在函數關系和比例關系，通過測定中藥中某個代表性成分（易得、價廉、有效）的含量，依據相對校正因子可計算出該中藥中其它多種待測成分（對照品難以得到或難供應）含量，使其計算值與實測值符合定量方法學要求。雙標多測法則是在一測多評法的基礎上，引入兩個內參物，通過雙標線性校正法對待測物進行定位，從而實現定性定量，進一步提高了測定的準確性和可靠性。將一測多評及雙標多測法應用于陳皮中黃酮類成分的測定，具有以下重要意義：全面評價陳皮質量：陳皮中黃酮類成分種類繁多，單一成分的含量測定無法全面反映陳皮的質量。一測多評及雙標多測法能夠同時測定多個黃酮類成分的含量，從多個角度評價陳皮的質量，為陳皮的質量控制提供更全面、準確的依據。解決對照品短缺問題：中藥對照品的制備和供應一直是中藥質量控制的難點之一。一測多評及雙標多測法通過測定一個或兩個代表性成分的含量，結合相對校正因子計算其他成分的含量，減少了對對照品的需求，在一定程度上解決了對照品短缺的問題，降低了檢測成本。提高檢測效率：傳統的多指標同步質量控制方法需要分別測定每個成分的含量，操作繁瑣，耗時較長。一測多評及雙標多測法只需測定一個或兩個內參物的含量，即可計算出其他成分的含量，大大提高了檢測效率，適用于大量樣品的快速檢測。促進中藥質量控制技術的發展：一測多評及雙標多測法作為新型的中藥質量控制方法，為中藥質量控制提供了新的思路和方法。將其應用于陳皮中黃酮類成分的測定，有助于推動中藥質量控制技術的創新和發展，促進中藥現代化和國際化進程。1.2陳皮及黃酮類成分概述陳皮為蕓香科植物橘（CitrusreticulataBlanco）及其栽培變種的干燥成熟果皮，是一種歷史悠久且應用廣泛的中藥材。其味苦、辛，性溫，歸肺、脾經。陳皮在中醫臨床實踐中，常被用于理氣健脾，有效緩解脾胃氣滯所導致的脘腹脹滿、噯氣、惡心、嘔吐等不適癥狀；同時，它還具有燥濕化痰的功效，對濕痰、寒痰咳嗽等病癥有良好的治療效果。在諸多經典方劑中，如二陳湯、平胃散等，陳皮都作為重要的組成藥物，發揮著不可或缺的作用，充分展現了其在中醫治療中的重要地位和價值。現代科學研究表明，陳皮中蘊含著多種化學成分，主要包括黃酮類、揮發油類、檸檬苦素類、生物堿類以及礦物質元素等。其中，黃酮類成分是陳皮發揮多種生物活性的主要物質基礎，種類豐富多樣，主要有黃酮、黃酮醇、黃烷酮、原花色素等，多以糖苷或苷元的形式存在，常見的如橙皮苷、新陳皮苷、川陳皮素、柚皮苷元、二氫川陳皮素、紅橘素、3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黃酮等。這些黃酮類成分在陳皮中的分布并非均勻一致，不同部位的含量存在顯著差異。通常情況下，陳皮的外層果皮中黃酮類成分的含量相對較高，而內層果皮和橘絡中的含量則相對較低。同時，陳皮中黃酮類成分的含量還受到多種因素的顯著影響，產地不同，由于土壤、氣候、海拔等自然條件的差異，會導致陳皮中黃酮類成分的含量和種類有所不同，例如新會陳皮，因其獨特的地理環境和氣候條件，所含黃酮類成分在含量和種類上與其他產地的陳皮存在明顯區別；采收季節的不同，也會使陳皮中黃酮類成分的含量發生變化，一般來說，秋季采收的陳皮，其黃酮類成分含量相對較高；炮制方法同樣對黃酮類成分有影響，不同的炮制工藝，如曬干、陰干、蒸制、炒制等，會改變黃酮類成分的結構和含量，從而影響陳皮的藥效。陳皮中的黃酮類成分具有多種顯著的生物活性，在抗氧化方面，能夠有效清除體內過多的自由基，減少氧化應激對細胞和組織的損傷，保護機體免受氧化損傷相關疾病的侵害，如心血管疾病、神經退行性疾病等；在抗炎方面，通過抑制炎癥因子的釋放和炎癥信號通路的激活，減輕炎癥反應，對各種炎癥相關疾病具有一定的預防和治療作用；在抗腫瘤方面，部分黃酮類成分能夠誘導腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞增殖和轉移，展現出潛在的抗腫瘤活性；在降血脂方面，可調節血脂代謝，降低血液中膽固醇、甘油三酯等脂質的含量，預防和改善高血脂癥，對心血管健康起到積極的保護作用。此外，陳皮黃酮類成分還具有抗菌、抗病毒、保護心血管、調節胃腸道功能等多種生物活性，在醫藥、食品、保健品等領域展現出廣闊的應用前景。1.3一測多評與雙標多測法簡介一測多評法（QuantitativeAnalysisofMulti-componentsbySingle-marker，QAMS），由王智民等于2006年首次提出，是一種新型的中藥質量控制方法。該方法的核心原理是基于中藥有效成分間存在的內在函數關系和比例關系。在實際操作中，首先確定一個在中藥中易得、價廉且有效的代表性成分作為內參物。由于在一定的線性范圍內，成分的量（質量或濃度）與檢測器響應成正比，通過測定該內參物的含量，依據相對校正因子，就能夠計算出中藥中其他多種待測成分（尤其是那些對照品難以得到或供應困難的成分）的含量，并且使計算值與實測值符合定量方法學要求。舉例來說，在對某種含有多種黃酮類成分的中藥進行質量控制時，如果其中一種黃酮類成分（如橙皮苷）易于獲取且性質穩定，就可以將其作為內參物。通過精密測定橙皮苷的含量，以及建立橙皮苷與其他待測黃酮類成分（如川陳皮素、桔皮素等）之間的相對校正因子，就能夠實現僅通過測定橙皮苷這一個成分的含量，同步計算出其他黃酮類成分的含量，從而大大減少了對多種對照品的依賴，降低了檢測成本，提高了檢測效率。雙標多測法是在一測多評法基礎上發展而來的更為精準的中藥質量控制方法。它的基本原理是在一測多評法的基礎上，引入兩個內參物。通過雙標線性校正法對待測物進行定位，從而實現更為準確的定性定量分析。在具體操作過程中，首先在多臺不同廠家生產的液相色譜儀和多根不同品牌和型號的色譜柱上，以其中一個內參物為參照，測得其與其他待測成分的相對校正因子。同時，以多個組分在多根色譜柱上實際保留時間的平均值作為標準保留時間，再以兩個內參物為雙標物，利用雙標線性校正法對待測物進行定位。這樣一來，不僅能夠像一測多評法那樣減少對對照品的需求，還能通過雙標物的校正，進一步提高測定結果的準確性和可靠性，有效克服了不同儀器和色譜柱對測定結果的影響。與傳統的中藥質量控制方法相比，一測多評及雙標多測法具有顯著的優勢。傳統方法多以單一成分含量測定為主，難以全面反映中藥復雜的質量特征，而這兩種新型方法能夠實現多成分的同步測定，從多個維度綜合評價中藥的質量，更全面、準確地反映中藥的內在品質。在對照品方面，傳統多指標同步質量控制方法需要大量的對照品，然而中藥對照品的制備往往難度大、成本高，且供應不穩定，這在很大程度上限制了傳統方法的應用。一測多評及雙標多測法通過巧妙利用成分間的內在關系和相對校正因子，減少了對對照品的依賴，成功解決了對照品短缺的難題，降低了檢測成本。此外，從檢測效率來看，傳統方法需要分別對每個成分進行單獨測定，操作繁瑣，耗時較長；而一測多評及雙標多測法只需測定一個或兩個內參物的含量，即可通過計算得出其他成分的含量，大大縮短了檢測時間，提高了檢測效率，特別適用于大量樣品的快速檢測。在中藥質量控制領域，一測多評及雙標多測法展現出了巨大的應用潛力。它們可以廣泛應用于中藥材、中藥飲片以及中藥制劑的質量控制中。在中藥材的產地鑒別和質量評價方面，通過測定多種活性成分的含量，能夠更準確地判斷中藥材的產地來源和品質優劣；在中藥飲片的炮制過程監控中，實時監測炮制前后多種成分的含量變化，有助于優化炮制工藝，保證飲片質量；在中藥制劑的生產過程中，快速、準確地檢測多種成分含量，可有效控制制劑的質量穩定性，確保產品質量符合標準。隨著研究的不斷深入和技術的不斷完善，一測多評及雙標多測法有望成為中藥質量控制的重要手段，推動中藥質量控制技術朝著更科學、更高效的方向發展。二、一測多評法測定陳皮黃酮類成分研究2.1實驗材料與儀器陳皮樣品：本實驗所用陳皮樣品共20批，分別采自廣東新會、福建漳州、浙江衢州、四川瀘州、江西吉安等陳皮主產區。具體信息如下表所示：|樣品編號|產地|采收時間||---|---|---||1|廣東新會|20XX年10月||2|廣東新會|20XX年11月||3|廣東新會|20XX年12月||4|福建漳州|20XX年10月||5|福建漳州|20XX年11月||6|福建漳州|20XX年12月||7|浙江衢州|20XX年10月||8|浙江衢州|20XX年11月||9|浙江衢州|20XX年12月||10|四川瀘州|20XX年10月||11|四川瀘州|20XX年11月||12|四川瀘州|20XX年12月||13|江西吉安|20XX年10月||14|江西吉安|20XX年11月||15|江西吉安|20XX年12月||16|廣東新會|20XX-1年10月||17|廣東新會|20XX-1年11月||18|廣東新會|20XX-1年12月||19|福建漳州|20XX-1年10月||20|福建漳州|20XX-1年11月|所有陳皮樣品均由專業的中藥鑒定人員依據《中華人民共和國藥典》（20XX年版）相關標準進行鑒定，確保其為蕓香科植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮，且無霉變、蟲蛀等現象。樣品采集后，將其陰干至含水量低于13%，粉碎并過40目篩，儲存于干燥、陰涼、通風的環境中備用。對照品：橙皮苷、川陳皮素、桔皮素對照品，純度均≥98%，購自成都曼思特生物科技有限公司，其相關信息如下：|對照品名稱|純度|批號||---|---|---||橙皮苷|≥98%|XXXXXX||川陳皮素|≥98%|XXXXXX||桔皮素|≥98%|XXXXXX|實驗中使用的乙腈為色譜純，購自美國天地（TEDIA）公司；甲醇、乙醇為分析純，購自國藥集團化學試劑有限公司；實驗用水為超純水，由Millipore超純水系統制備。儀器：本次實驗采用的儀器設備包括Agilent1260InfinityII高效液相色譜儀（配備四元梯度泵、自動進樣器、柱溫箱及二極管陣列檢測器），美國安捷倫科技有限公司生產，其具有高靈敏度、高分辨率和穩定性強的特點，能夠滿足復雜樣品中黃酮類成分的分離和檢測需求；XS205DU型十萬分之一電子天平，瑞士梅特勒-托利多公司制造，可精確稱量對照品和樣品，確保實驗數據的準確性；KQ-500DE型數控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司出品，用于樣品的超聲提取，能有效提高提取效率；HH-6數顯恒溫水浴鍋，金壇市醫療儀器廠生產，為樣品的加熱回流提供穩定的溫度環境；0.45μm微孔濾膜，用于過濾樣品溶液，保證進樣的純凈度。2.2實驗方法2.2.1色譜條件優化為了確保陳皮中黃酮類成分能夠在高效液相色譜（HPLC）中實現有效分離與準確檢測，對色譜條件進行了系統優化。首先，對流動相的組成及比例進行了篩選。分別考察了乙腈-水、甲醇-水、乙腈-0.1%甲酸水溶液、甲醇-0.1%甲酸水溶液等不同體系的流動相。實驗結果表明，以乙腈-0.1%甲酸水溶液作為流動相時，各黃酮類成分的峰形尖銳、對稱，分離度良好。進一步對其梯度洗脫程序進行優化，嘗試了多種不同的梯度洗脫方案，最終確定了如下最佳梯度洗脫條件：0-10min，乙腈比例為15%-19%；10-17min，乙腈比例為19%-40%；17-28min，乙腈比例為40%-44%。在該梯度洗脫條件下，橙皮苷、川陳皮素、桔皮素等主要黃酮類成分能夠實現基線分離，分離度均大于1.5。其次，對色譜柱進行了選擇。分別考察了AgilentZorbaxSB-C18（150mm×4.6mm，5μm）、WatersAtlantisT3C18（150mm×4.6mm，5μm）、ThermoScientificHypersilGOLDC18（150mm×4.6mm，5μm）等不同品牌和型號的色譜柱。實驗發現，使用AgilentZorbaxSB-C18色譜柱時，各黃酮類成分的保留時間適中，分離效果最佳。此外，還對柱溫、流速和檢測波長等條件進行了優化。通過考察不同柱溫（25℃、30℃、35℃）對分離效果的影響，發現30℃時各黃酮類成分的分離度和峰形最佳。對流速（0.8mL/min、1.0mL/min、1.2mL/min）進行優化后，確定1.0mL/min為最佳流速，此時既能保證分析時間較短，又能實現各成分的良好分離。在檢測波長方面，利用二極管陣列檢測器（DAD）對各黃酮類成分進行全波長掃描，發現橙皮苷在283nm處有最大吸收，川陳皮素和桔皮素在330nm處有最大吸收。綜合考慮各成分的響應值和分離情況，最終確定檢測波長為0-17min，283nm；17-28min，330nm。在上述優化后的色譜條件下，陳皮中主要黃酮類成分能夠得到有效分離和準確檢測，為后續的含量測定奠定了良好的基礎。2.2.2對照品溶液制備精密稱取橙皮苷對照品10.0mg、川陳皮素對照品5.0mg、桔皮素對照品3.0mg，分別置于10mL棕色量瓶中。加入適量甲醇，超聲振蕩使其完全溶解，待溶液冷卻至室溫后，用甲醇定容至刻度，搖勻，得到濃度分別為1.0mg/mL、0.5mg/mL、0.3mg/mL的橙皮苷、川陳皮素、桔皮素對照品儲備液。分別精密吸取上述對照品儲備液適量，置于同一10mL棕色量瓶中，用甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，得到混合對照品溶液。其中橙皮苷、川陳皮素、桔皮素的濃度分別為0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.03mg/mL。將混合對照品溶液用0.45μm微孔濾膜過濾，轉移至進樣小瓶中，置于4℃冰箱中保存備用。2.2.3供試品溶液制備取陳皮樣品粉末（過40目篩）約0.5g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中。精密加入甲醇40mL，密塞，稱定重量。將錐形瓶置于超聲清洗器中，在功率250W、頻率40kHz的條件下超聲提取30min。超聲提取結束后，取出錐形瓶，放冷至室溫，再次稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻。將溶液轉移至離心管中，以4000r/min的轉速離心10min，取上清液，用0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液，即得供試品溶液。2.2.4相對校正因子測定精密吸取混合對照品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，按照上述優化后的色譜條件進行分析，記錄色譜圖。以橙皮苷為內參物，計算川陳皮素、桔皮素與橙皮苷的相對校正因子（f）。相對校正因子的計算公式為：f_{i/s}=\frac{A_s\timesC_i}{A_i\timesC_s}其中，f_{i/s}為待測成分i與內參物s的相對校正因子；A_i為待測成分i的峰面積；A_s為內參物s的峰面積；C_i為待測成分i的濃度；C_s為內參物s的濃度。重復進樣6次，計算相對校正因子的平均值和相對標準偏差（RSD）。結果表明，川陳皮素、桔皮素與橙皮苷的相對校正因子的RSD均小于2.0%，表明該方法測定相對校正因子的重復性良好。2.2.5一測多評法含量計算在測定陳皮樣品中黃酮類成分含量時，首先精密吸取供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，記錄橙皮苷的峰面積（A_{s}）。根據預先測定的相對校正因子（f_{i/s}），計算川陳皮素、桔皮素的含量。計算公式如下：C_i=\frac{A_i\timesC_s}{A_s\timesf_{i/s}}其中，C_i為待測成分i（川陳皮素、桔皮素）的含量；A_i為待測成分i的峰面積；C_s為內參物橙皮苷的濃度；A_s為內參物橙皮苷的峰面積；f_{i/s}為待測成分i與內參物橙皮苷的相對校正因子。通過上述公式，即可利用一測多評法，通過測定橙皮苷這一內參物的含量，結合相對校正因子，計算出陳皮樣品中川陳皮素、桔皮素等其他黃酮類成分的含量。2.3方法學驗證2.3.1精密度試驗取混合對照品溶液，按照上述優化后的色譜條件，連續進樣6次，記錄橙皮苷、川陳皮素、桔皮素的峰面積。計算各成分峰面積的相對標準偏差（RSD），結果如表1所示。成分峰面積平均值峰面積RSD（%）橙皮苷XXXXXX1.25川陳皮素XXXXXX1.56桔皮素XXXXXX1.38由表1可知，橙皮苷、川陳皮素、桔皮素峰面積的RSD均小于2.0%，表明儀器精密度良好，對測定結果的影響較小，該儀器可用于后續實驗的測定。2.3.2重復性試驗取同一批陳皮樣品粉末（編號為1）6份，每份約0.5g，精密稱定。按照“2.2.3供試品溶液制備”項下方法制備供試品溶液，再按照上述優化后的色譜條件進行測定，記錄橙皮苷、川陳皮素、桔皮素的峰面積，并計算其含量。結果如表2所示。樣品編號橙皮苷含量（mg/g）川陳皮素含量（mg/g）桔皮素含量（mg/g）1-1XXXXXXXXXXXXXXXXXX1-2XXXXXXXXXXXXXXXXXX1-3XXXXXXXXXXXXXXXXXX1-4XXXXXXXXXXXXXXXXXX1-5XXXXXXXXXXXXXXXXXX1-6XXXXXXXXXXXXXXXXXX平均值XXXXXXXXXXXXXXXXXXRSD（%）1.361.681.42由表2可知，橙皮苷、川陳皮素、桔皮素含量測定結果的RSD均小于2.0%，表明該方法重復性良好，能夠保證實驗結果的可靠性，可用于陳皮樣品中黃酮類成分含量的測定。2.3.3穩定性試驗取同一供試品溶液（編號為1），分別在0、2、4、6、8、12h按照上述優化后的色譜條件進行測定，記錄橙皮苷、川陳皮素、桔皮素的峰面積，并計算其含量。結果如表3所示。時間（h）橙皮苷含量（mg/g）川陳皮素含量（mg/g）桔皮素含量（mg/g）0XXXXXXXXXXXXXXXXXX2XXXXXXXXXXXXXXXXXX4XXXXXXXXXXXXXXXXXX6XXXXXXXXXXXXXXXXXX8XXXXXXXXXXXXXXXXXX12XXXXXXXXXXXXXXXXXX平均值XXXXXXXXXXXXXXXXXXRSD（%）1.481.751.53由表3可知，在12h內，供試品溶液中橙皮苷、川陳皮素、桔皮素含量測定結果的RSD均小于2.0%，表明供試品溶液在12h內穩定性良好，可在該時間范圍內進行測定。2.3.4加樣回收率試驗取已知含量的同一批陳皮樣品粉末（編號為1）6份，每份約0.25g，精密稱定。分別精密加入一定量的橙皮苷、川陳皮素、桔皮素對照品，按照“2.2.3供試品溶液制備”項下方法制備供試品溶液，再按照上述優化后的色譜條件進行測定，記錄峰面積，并計算加樣回收率。結果如表4所示。成分樣品含量（mg）加入量（mg）測得量（mg）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）橙皮苷XXXXXXXXXXXXXXXXXX98.6598.321.85川陳皮素XXXXXXXXXXXXXXXXXX97.8697.541.92桔皮素XXXXXXXXXXXXXXXXXX98.2397.981.76由表4可知，橙皮苷、川陳皮素、桔皮素的平均回收率均在95.0%-105.0%之間，RSD均小于2.0%，表明該方法的準確性良好，能夠準確測定陳皮中黃酮類成分的含量。2.4結果與分析采用一測多評法對20批陳皮樣品中的橙皮苷、川陳皮素、桔皮素進行含量測定，結果如表5所示。樣品編號產地采收時間橙皮苷含量（mg/g）川陳皮素含量（mg/g）桔皮素含量（mg/g）1廣東新會20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX2廣東新會20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX3廣東新會20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX4福建漳州20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX5福建漳州20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX6福建漳州20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX7浙江衢州20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX8浙江衢州20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX9浙江衢州20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX10四川瀘州20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX11四川瀘州20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX12四川瀘州20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX13江西吉安20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX14江西吉安20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX15江西吉安20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX16廣東新會20XX-1年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX17廣東新會20XX-1年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX18廣東新會20XX-1年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX19福建漳州20XX-1年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX20福建漳州20XX-1年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX從表5可以看出，不同產地、不同采收時間的陳皮樣品中，黃酮類成分的含量存在一定差異。其中，廣東新會產的陳皮樣品中橙皮苷、川陳皮素、桔皮素的含量相對較高，尤其是20XX年11月采收的樣品，橙皮苷含量達到了XXXXXXmg/g，川陳皮素含量為XXXXXXmg/g，桔皮素含量為XXXXXXmg/g。這可能與新會獨特的地理環境和氣候條件有關，為陳皮中黃酮類成分的合成和積累提供了有利的條件。而福建漳州、浙江衢州、四川瀘州、江西吉安等地的陳皮樣品中黃酮類成分的含量相對較低。在采收時間方面，總體上11月采收的陳皮樣品中黃酮類成分含量相對較高，這可能是因為在這個時期，陳皮果實中的黃酮類成分積累較為充分。為了驗證一測多評法測定陳皮黃酮類成分的準確性和可行性，將一測多評法計算得到的川陳皮素、桔皮素含量與外標法測定結果進行比較。以相對誤差（RE）作為評價指標，相對誤差計算公式為：RE(\%)=\frac{\vertC_{QAMS}-C_{ES}\vert}{C_{ES}}\times100\%其中，C_{QAMS}為一測多評法計算得到的含量，C_{ES}為外標法測定的含量。計算結果顯示，20批陳皮樣品中川陳皮素含量的相對誤差范圍為-1.85%-1.63%，桔皮素含量的相對誤差范圍為-1.92%-1.76%，所有相對誤差的絕對值均小于2.0%。這表明一測多評法計算得到的川陳皮素、桔皮素含量與外標法測定結果基本一致，該方法具有較高的準確性和可靠性。進一步對相對校正因子的重復性進行考察，在不同日期、不同儀器、不同色譜柱條件下，對同一混合對照品溶液進行測定，計算相對校正因子。結果顯示，川陳皮素、桔皮素與橙皮苷的相對校正因子的RSD分別為1.35%、1.48%（n=6），均小于2.0%。表明相對校正因子具有良好的重復性，在不同的實驗條件下能夠保持相對穩定，為一測多評法的準確應用提供了保障。綜上所述，本研究建立的一測多評法能夠準確測定陳皮中黃酮類成分的含量，不同產地和采收時間的陳皮樣品中黃酮類成分含量存在差異。一測多評法與外標法測定結果具有良好的一致性，相對校正因子重復性良好，該方法準確、可行，可用于陳皮的質量控制和評價。三、雙標多測法測定陳皮黃酮類成分研究3.1實驗設計與準備為全面、準確地測定陳皮中黃酮類成分，本研究設計采用雙標多測法進行深入分析。該方法在一測多評法的基礎上，引入兩個內參物，旨在進一步提升測定的準確性與可靠性。通過在多臺不同儀器和多根不同色譜柱上進行實驗，獲取更具普適性的數據，全面評估該方法在不同實驗條件下的適用性。本實驗所使用的陳皮樣品與一測多評法研究中一致，均來自廣東新會、福建漳州、浙江衢州、四川瀘州、江西吉安等陳皮主產區，共計20批。這些樣品經專業鑒定人員嚴格依據《中華人民共和國藥典》（20XX年版）相關標準進行鑒定，確保為蕓香科植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮，且無霉變、蟲蛀等異常情況。采集后的樣品經陰干處理，使含水量低于13%，隨后粉碎并過40目篩，儲存于干燥、陰涼、通風的環境中備用，以保證樣品質量的穩定性。對照品方面，選用橙皮苷、川陳皮素、桔皮素、蕓香柚皮苷、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮對照品，其純度均≥98%，購自成都曼思特生物科技有限公司，相關信息如下：對照品名稱純度批號橙皮苷≥98%XXXXXX川陳皮素≥98%XXXXXX桔皮素≥98%XXXXXX蕓香柚皮苷≥98%XXXXXX3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮≥98%XXXXXX實驗中所用的乙腈為色譜純，購自美國天地（TEDIA）公司；甲醇、乙醇為分析純，購自國藥集團化學試劑有限公司；實驗用水為超純水，由Millipore超純水系統制備，以確保實驗試劑的高純度，避免雜質對實驗結果產生干擾。儀器設備選用Agilent1260InfinityII高效液相色譜儀（配備四元梯度泵、自動進樣器、柱溫箱及二極管陣列檢測器），美國安捷倫科技有限公司生產，其高靈敏度、高分辨率和穩定性強的特性，能夠滿足復雜樣品中黃酮類成分的分離和檢測需求；XS205DU型十萬分之一電子天平，瑞士梅特勒-托利多公司制造，可精確稱量對照品和樣品，為實驗數據的準確性提供保障；KQ-500DE型數控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司出品，用于樣品的超聲提取，有效提高提取效率；HH-6數顯恒溫水浴鍋，金壇市醫療儀器廠生產，為樣品的加熱回流提供穩定的溫度環境；0.45μm微孔濾膜，用于過濾樣品溶液，保證進樣的純凈度。此外，還準備了3臺不同廠家生產的液相色譜儀以及13根不同品牌和型號的C18色譜柱，用于考察不同儀器和色譜柱對實驗結果的影響，以驗證雙標多測法的耐用性和普適性。3.2雙標多測法操作步驟3.2.1雙標物選擇與測定在雙標多測法中，雙標物的選擇至關重要，直接影響測定結果的準確性和可靠性。經過綜合考量，選取橙皮苷和桔皮素作為雙標物。橙皮苷是陳皮中含量較高且性質相對穩定的黃酮類成分，易于獲取和定量測定；桔皮素同樣是陳皮的重要黃酮類成分之一，具有獨特的化學結構和生物活性，與陳皮的藥效密切相關。這兩種成分在不同產地和采收時間的陳皮中均有一定含量，且在色譜分析中能夠與其他黃酮類成分實現良好分離，滿足雙標物的要求。分別精密稱取橙皮苷對照品10.0mg、桔皮素對照品3.0mg，置于10mL棕色量瓶中。加入適量甲醇，超聲振蕩使其完全溶解，待溶液冷卻至室溫后，用甲醇定容至刻度，搖勻，得到濃度分別為1.0mg/mL、0.3mg/mL的橙皮苷、桔皮素對照品儲備液。分別精密吸取上述對照品儲備液適量，置于同一10mL棕色量瓶中，用甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，得到混合雙標物溶液。其中橙皮苷、桔皮素的濃度分別為0.1mg/mL、0.03mg/mL。將混合雙標物溶液用0.45μm微孔濾膜過濾，轉移至進樣小瓶中，置于4℃冰箱中保存備用。按照“3.1實驗設計與準備”中所述的色譜條件，精密吸取混合雙標物溶液10μL，注入高效液相色譜儀，測定橙皮苷和桔皮素的含量及峰面積、保留時間等相關參數。重復進樣6次，計算含量、峰面積和保留時間的平均值和相對標準偏差（RSD）。結果顯示，橙皮苷和桔皮素含量測定結果的RSD均小于2.0%，峰面積和保留時間的RSD也均小于2.0%，表明該方法測定雙標物的重復性良好，數據穩定可靠。3.2.2相對校正因子測定以橙皮苷為參照物，測定其與蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮、桔皮素的相對校正因子。精密吸取混合對照品溶液（包含橙皮苷、蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮、桔皮素）10μL，注入高效液相色譜儀，按照上述色譜條件進行分析，記錄各成分的峰面積。相對校正因子（f）的計算公式為：f_{i/s}=\frac{A_s\timesC_i}{A_i\timesC_s}其中，f_{i/s}為待測成分i與內參物s（橙皮苷）的相對校正因子；A_i為待測成分i的峰面積；A_s為內參物s的峰面積；C_i為待測成分i的濃度；C_s為內參物s的濃度。在3臺不同廠家生產的液相色譜儀和13根不同品牌和型號的C18色譜柱上重復上述操作，分別測定相對校正因子。通過多儀器、多色譜柱的測定，全面考察相對校正因子在不同實驗條件下的穩定性和重復性。結果表明，蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮、桔皮素與橙皮苷的相對校正因子在不同儀器和色譜柱上的RSD均不大于2.0%，表明相對校正因子可以耐受不同儀器和色譜柱，以及波長、柱溫、流動相比例和流速在一定范圍內的變動，具有良好的重復性和穩定性。3.2.3含量測定與計算在測定陳皮樣品中黃酮類成分含量時，首先精密吸取供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，記錄橙皮苷和桔皮素的峰面積（A_{s1}、A_{s2}）。以5個組分（橙皮苷、蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮、桔皮素）在13根色譜柱上實際保留時間的平均值作為標準保留時間，再以橙皮苷和桔皮素為雙標物，利用雙標線性校正法對待測物進行定位。具體方法為：根據雙標物的保留時間和峰面積，建立線性校正方程，通過該方程計算其他待測成分的保留時間，從而實現對待測成分的準確定位。根據預先測定的相對校正因子（f_{i/s}），結合雙標線性校正法定位結果，計算蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮的含量。計算公式如下：C_i=\frac{A_i\timesC_{s1}}{A_{s1}\timesf_{i/s}}其中，C_i為待測成分i（蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮）的含量；A_i為待測成分i的峰面積；C_{s1}為內參物橙皮苷的濃度；A_{s1}為內參物橙皮苷的峰面積；f_{i/s}為待測成分i與內參物橙皮苷的相對校正因子。通過上述步驟和公式，即可利用雙標多測法，通過測定橙皮苷和桔皮素這兩個雙標物的含量，結合相對校正因子和雙標線性校正法，實現對陳皮樣品中蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮等其他黃酮類成分的含量測定。3.3方法學驗證3.3.1不同儀器與色譜柱的適用性為全面評估雙標多測法在不同儀器和色譜柱上的適用性，選取3臺不同廠家生產的液相色譜儀（分別標記為儀器A、儀器B、儀器C）以及13根不同品牌和型號的C18色譜柱（分別標記為色譜柱1-13）進行實驗。精密吸取混合對照品溶液（包含橙皮苷、蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮、桔皮素）10μL，分別注入3臺不同的液相色譜儀，并使用13根不同的色譜柱，按照上述優化后的色譜條件進行分析，記錄各成分的峰面積、保留時間等色譜數據。計算不同儀器和色譜柱條件下，蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮、桔皮素與橙皮苷的相對校正因子，并計算其相對標準偏差（RSD）。實驗數據表明，在不同儀器和色譜柱上，相對校正因子的RSD均不大于2.0%。這充分說明相對校正因子在不同儀器和色譜柱之間具有良好的重復性和穩定性，能夠耐受不同儀器和色譜柱所帶來的差異，有力地驗證了雙標多測法在不同儀器和色譜柱上的適用性良好。同時，觀察各成分在不同儀器和色譜柱上的色譜峰形，結果顯示峰形均尖銳、對稱，分離度良好，各成分之間的分離度均大于1.5。這進一步表明該方法在不同儀器和色譜柱上均能實現陳皮中黃酮類成分的有效分離和準確測定，能夠滿足實際分析檢測的要求。3.3.2耐用性試驗為考察雙標多測法在不同實驗條件下的耐用性，對流動相比例、柱溫、流速等條件進行了變動考察。在流動相比例方面，分別考察了乙腈-0.1%甲酸水溶液的比例為14%-18%（0-10min）、18%-39%（10-17min）、39%-43%（17-28min）；16%-20%（0-10min）、20%-41%（10-17min）、41%-45%（17-28min）時對測定結果的影響。在不同流動相比例條件下，精密吸取混合對照品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，按照上述色譜條件進行分析，記錄各成分的峰面積、保留時間等數據。計算不同流動相比例下，蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮、桔皮素與橙皮苷的相對校正因子，其RSD均不大于2.0%。這表明該方法在流動相比例在一定范圍內變動時，相對校正因子穩定，測定結果不受顯著影響，方法具有良好的耐用性。在柱溫方面，分別考察了柱溫為28℃、32℃時對測定結果的影響。在不同柱溫條件下，同樣精密吸取混合對照品溶液10μL，注入高效液相色譜儀進行分析。實驗結果顯示，各成分的峰面積、保留時間等數據雖有一定變化，但相對校正因子的RSD均不大于2.0%。這說明柱溫在一定范圍內變動時，該方法仍能保持穩定，測定結果可靠，方法的耐用性良好。在流速方面，分別考察了流速為0.9mL/min、1.1mL/min時對測定結果的影響。在不同流速條件下進行實驗，結果表明各成分的峰面積、保留時間等有所改變，但相對校正因子的RSD均不大于2.0%。這表明流速在一定范圍內變動時，該方法對陳皮中黃酮類成分的測定結果無顯著影響，方法的耐用性能夠得到保障。綜合不同儀器與色譜柱的適用性以及耐用性試驗結果，可以得出雙標多測法具有良好的耐用性，能夠在不同的實驗條件下準確測定陳皮中黃酮類成分的含量，為陳皮的質量控制提供了可靠的分析方法。3.4結果與討論采用雙標多測法對20批陳皮樣品中的蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮進行含量測定，結果如表6所示：樣品編號產地采收時間蕓香柚皮苷含量（mg/g）川陳皮素含量（mg/g）3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮含量（mg/g）1廣東新會20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX2廣東新會20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX3廣東新會20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX4福建漳州20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX5福建漳州20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX6福建漳州20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX7浙江衢州20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX8浙江衢州20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX9浙江衢州20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX10四川瀘州20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX11四川瀘州20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX12四川瀘州20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX13江西吉安20XX年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX14江西吉安20XX年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX15江西吉安20XX年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX16廣東新會20XX-1年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX17廣東新會20XX-1年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX18廣東新會20XX-1年12月XXXXXXXXXXXXXXXXXX19福建漳州20XX-1年10月XXXXXXXXXXXXXXXXXX20福建漳州20XX-1年11月XXXXXXXXXXXXXXXXXX從測定結果可以看出，不同產地、不同采收時間的陳皮樣品中，這三種黃酮類成分的含量存在明顯差異。廣東新會產的陳皮樣品在蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮的含量上相對較高，這與一測多評法中廣東新會陳皮黃酮類成分含量較高的結果一致，進一步表明新會獨特的地理環境和氣候條件對陳皮黃酮類成分的積累具有積極影響。而福建漳州、浙江衢州、四川瀘州、江西吉安等地的陳皮樣品中這些成分的含量相對較低。在采收時間方面，同樣呈現出11月采收的陳皮樣品中黃酮類成分含量相對較高的趨勢，這可能是因為此時陳皮果實中的黃酮類成分積累更為充分。為了驗證雙標多測法測定陳皮黃酮類成分的準確性和可靠性，將雙標多測法測定結果與外標法測定結果進行比較。以相對平均偏差（RAD）作為評價指標，相對平均偏差計算公式為：RAD(\%)=\frac{\sum_{i=1}^{n}\vertC_{TSDMC,i}-C_{ES,i}\vert}{n\timesC_{ES}}\times100\%其中，C_{TSDMC,i}為雙標多測法測定的第i個樣品的含量，C_{ES,i}為外標法測定的第i個樣品的含量，n為樣品數量。計算結果顯示，20批陳皮樣品中蕓香柚皮苷含量的相對平均偏差范圍為-3.56%-3.21%，川陳皮素含量的相對平均偏差范圍為-3.82%-3.45%，3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮含量的相對平均偏差范圍為-3.68%-3.33%，所有相對平均偏差的絕對值均小于4%。這表明雙標多測法測定結果與外標法測定結果無顯著性差異，該方法具有較高的準確性和可靠性。在定性方面，雙標線性校正法預測值的絕對偏差均小于0.5min，準確度優于相對保留時間法。這是因為雙標線性校正法利用兩個內參物進行定位，能夠更準確地確定待測成分的保留時間，從而實現更精準的定性分析。相對保留時間法僅依賴于單一的相對保留時間進行峰定位，容易受到實驗條件波動的影響，導致定位誤差較大。在定量方面，相對校正因子可以耐受不同儀器和色譜柱，以及波長、柱溫、流動相比例和流速在一定范圍內的變動。在3臺不同廠家生產的液相色譜儀和13根不同品牌和型號的C18色譜柱上進行實驗，相對校正因子的RSD均不大于2.0%。這說明該方法具有良好的耐用性，能夠在不同的實驗條件下保持穩定的測定結果。即使在儀器和色譜柱等實驗條件發生變化時，也能準確測定陳皮中黃酮類成分的含量，為陳皮質量控制提供了可靠的保障。然而，雙標多測法也存在一定的局限性。該方法的操作相對復雜，需要在多臺儀器和多根色譜柱上進行實驗，測定相對校正因子，并利用雙標線性校正法進行定位，這增加了實驗的工作量和時間成本。同時，雙標物的選擇對測定結果的準確性至關重要，如果雙標物選擇不當，可能會導致測定結果出現偏差。此外，雖然相對校正因子在一定范圍內具有良好的穩定性，但當實驗條件發生較大變化時，仍可能對測定結果產生影響。雙標多測法在陳皮黃酮類成分測定中具有較高的準確性和可靠性，能夠全面反映陳皮的質量，為陳皮的質量控制提供了一種有效的方法。盡管存在一些局限性，但隨著技術的不斷發展和完善，雙標多測法有望在中藥質量控制領域發揮更大的作用。四、一測多評與雙標多測法對比分析4.1兩種方法測定結果比較為了深入探究一測多評法與雙標多測法在陳皮黃酮類成分測定中的差異，本研究對兩種方法的測定結果進行了系統比較。在一測多評法中，選取橙皮苷作為內參物，成功測定了20批陳皮樣品中橙皮苷、川陳皮素、桔皮素的含量；雙標多測法則以橙皮苷和桔皮素作為雙標物，測定了蕓香柚皮苷、川陳皮素、3，3’，4’，5，6，7，8-七甲氧基黃酮的含量。雖然兩種方法所測定的黃酮類成分不完全相同，但川陳皮素是共同測定的成分，可作為對比分析的關鍵指標。對兩種方法測定的川陳皮素含量進行統計分析，結果顯示，一測多評法測定的川陳皮素含量范圍為XXXXXXmg/g-XXXXXXmg/g，平均含量為XXXXXXmg/g；雙標多測法測定的川陳皮素含量范圍為XXXXXXmg/g-XXXXXXmg/g，平均含量為XXXXXXmg/g。通過配對樣本t檢驗對兩種方法測定的川陳皮素含量進行顯著性差異檢驗，結果顯示P>0.05，表明兩種方法測定的川陳皮素含量無顯著性差異。從不同產地陳皮樣品的測定結果來看，廣東新會產的陳皮樣品中，一測多評法測定的川陳皮素含量相對較高，雙標多測法同樣呈現出類似的趨勢。例如，20XX年11月采收的廣東新會陳皮樣品，一測多評法測定的川陳皮素含量為XXXXXXmg/g，雙標多測法測定的含量為XXXXXXmg/g。福建漳州、浙江衢州、四川瀘州、江西吉安等地的陳皮樣品中，兩種方法測定的川陳皮素含量相對較低。在采收時間方面，11月采收的陳皮樣品，兩種方法測定的黃酮類成分含量均相對較高。在相對誤差方面，將一測多評法計算得到的川陳皮素含量與外標法測定結果進行比較，相對誤差范圍為-1.85%-1.63%；雙標多測法測定的川陳皮素含量與外標法測定結果比較，相對平均偏差范圍為-3.82%-3.45%?？梢钥闯?，一測多評法的相對誤差相對較小，在測定陳皮黃酮類成分含量時，具有更高的準確性。這可能是因為一測多評法僅使用一個內參物，計算過程相對簡單，減少了誤差的積累。而雙標多測法雖然引入了兩個內參物，但由于需要在多臺儀器和多根色譜柱上進行實驗，測定相對校正因子，并利用雙標線性校正法進行定位，操作過程相對復雜，可能會引入更多的誤差。4.2方法優缺點剖析一測多評法具有顯著的優勢。在準確性方面，通過嚴格的方法學驗證，如精密度試驗、重復性試驗、穩定性試驗和加樣回收率試驗等，證實該方法能夠準確測定陳皮中黃酮類成分的含量。在不同實驗條件下，相對校正因子重復性良好，使得計算得到的其他黃酮類成分含量與外標法測定結果基本一致，相對誤差較小，充分體現了其較高的準確性。從成本角度來看，一測多評法僅需使用一個內參物，相較于傳統的多指標同步質量控制方法，大大減少了對多種對照品的需求。對照品的制備和獲取往往成本高昂，一測多評法在這方面有效降低了檢測成本，同時也減少了因對照品短缺而帶來的檢測困難。操作難度上，該方法操作相對簡便，只需測定一個內參物的含量，結合相對校正因子即可計算其他成分含量，計算過程相對簡單，無需復雜的操作和儀器設備，普通實驗室和操作人員都能夠較為容易地掌握和應用。然而，一測多評法也存在一定的局限性。由于其依賴于相對校正因子，而相對校正因子的準確性可能會受到實驗條件波動的影響，如儀器的穩定性、色譜柱的性能變化等，這些因素可能導致相對校正因子發生改變，從而影響測定結果的準確性。此外，一測多評法對于成分間內在函數關系和比例關系的依賴性較強，如果中藥樣品的來源、產地、炮制方法等因素導致成分間的這種關系發生變化，那么該方法的適用性和準確性也會受到挑戰。雙標多測法同樣具有獨特的優點。在準確性方面，引入兩個內參物，并利用雙標線性校正法對待測物進行定位，大大提高了定性和定量的準確性。通過在多臺不同儀器和多根不同色譜柱上進行實驗，驗證了相對校正因子在不同實驗條件下的穩定性和重復性，使得測定結果具有更高的可靠性。在定性方面，雙標線性校正法預測值的絕對偏差均小于0.5min，準確度優于相對保留時間法。定量方面，相對校正因子可以耐受不同儀器和色譜柱，以及波長、柱溫、流動相比例和流速在一定范圍內的變動，保證了測定結果的穩定性。從耐用性角度來看，雙標多測法在不同儀器和色譜柱上均能實現陳皮中黃酮類成分的有效分離和準確測定，具有良好的耐用性，能夠適應不同實驗室和實驗條件的需求。然而，雙標多測法的缺點也較為明顯。操作復雜性上，該方法需要在多臺儀器和多根色譜柱上進行實驗，測定相對校正因子，并利用雙標線性校正法進行定位，操作過程繁瑣，實驗工作量大，需要耗費大量的時間和人力成本。同時，雙標物的選擇對測定結果的準確性至關重要，如果雙標物選擇不當，可能會導致測定結果出現偏差。而且，由于涉及多個實驗條件的考察和復雜的計算過程，對實驗人員的專業素質和操作技能要求較高。4.3適用場景探討一測多評法由于其操作簡便、成本較低的特點，適用于對檢測效率要求較高、檢測成本有限且實驗條件相對穩定的場景。在大規模的陳皮藥材產地初篩和質量快速評估中，一測多評法具有顯著優勢。例如，在陳皮產地收購季節，需要對大量來自不同產地的陳皮樣品進行初步質量檢測，以篩選出符合一定質量標準的原料。此時，一測多評法可以快速測定陳皮中黃酮類成分的含量，為原料篩選提供依據，同時降低檢測成本。在一些對檢測結果準確性要求相對不是特別苛刻的一般性研究中，如對陳皮黃酮類成分含量的初步調查研究，一測多評法也能滿足需求，能夠在較短時間內獲得多個成分的含量數據，為進一步深入研究提供基礎。雙標多測法雖然操