Q/LB.□XXXXX-XXXXDB43/TXXXX—2025目次TOC\o"1-1"\h\t"標準文件_一級條標題,2,標準文件_附錄一級條標題,2,"前言 II1范圍 12規范性引用文件 13術語和定義 14方法原理 15儀器設備和材料 16檢測 16.1儀器準備前言 16.2樣品準備及測定 27結果判定 28檢測限 2附錄A（資料性）試劑盒和檢測棒組成 4附錄B（資料性）結果判定 5前言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件由湖南省農業農村廳提出。本文件由湖南省農業標準化技術委員會歸口。本文件起草單位：長沙市農產品質量監測中心、北京市農產品質量安全中心、長沙市動植物疫病預防控制中心、長沙市農業科學研究院。本文件主要起草人：徐麗君、薛爽、李文輝、劉暢、馮晚霞、丑亞琴、楊博文、羅湘、范葉、張韜、顏克旭、陳玲歡、鄧清林、楊博、康洋、羅揚、賀磊、鄭躍蓮、譚丹、李妍芬、吳宇輝。屠宰企業多種抗生素殘留快速檢測法-微生物抑制法范圍本標準規定了屠宰企業的豬肉、豬肝、豬腎和雞肉大批量檢測樣品中β-內酰胺類、磺胺類、喹諾酮類、四環素類、大環內酯類、氨基糖苷類和酰胺醇類七大類35種藥物殘留快速檢測篩查的微生物抑制檢測方法。本標準適用于豬肉、豬肝、豬腎和雞肉中抗生素殘留快速篩選檢測，陽性結果須用其它定量檢測方法進行確證。規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規范格和試驗方法。術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。方法原理微生物在含有pH指示劑的瓊脂中培養產酸，培養基會變為黃色。當樣品中含有抗生素時，微生物的生長被抑制，培養基不變色，即仍保持紫色。儀器設備和材料KIS檢測棒檢測試劑盒。數字式加熱器。計時器。陰性質控的制備與保存：每批次樣品必須檢測一個陰性質控。將1片陰性質控片放入提供的容器中，加入1mL去離子水或蒸餾水，振蕩10s使質控片藥劑溶解，5min后再次振蕩，標記為陰性質控管。陰性質控在冷藏條件(0℃～4℃)下可保存5天。除非另有說明，本法所用的試劑均為分析純試劑，實驗用水應符合GB/T6682一級水的規定。檢測儀器準備打開數字式加熱器的電源，按說明書設定孵育所需溫度為64℃。樣品準備及測定使用管套的切割邊緣環形切割腎臟或肌肉等組織樣品，深度約1cm～2cm，注意確保去除脂肪層。拔出KIS檢測棒的取樣頭，握住取樣頭桿部，將取樣頭放入樣品的環形切口，沿切口轉動并移動取樣頭頭部約30s(液體樣品直接將棉頭放入其中10s即可)，直至取樣頭吸滿液體，去除取樣頭上的顆粒物，若取樣頭棉頭發白表明取樣不完全。豎直握住KIS檢測棒取樣頭，插入檢測棒下端小管，向下壓，同時緩慢旋轉，使取樣頭刺破上層密封箔膜并完全浸沒到上層清澈的液體中，但不刺破下層的密封箔膜，靜置2min。繼續向下壓，同時旋轉取樣頭，刺破下層的密封箔膜，使KIS檢測棒取樣頭至紫色瓊脂上方。豎直握住KIS檢測棒，在硬面上輕輕敲擊5次，使殘留液體全部流入紫色瓊脂上方。向上旋回取樣頭，再次輕敲KIS檢測棒5次。將檢測棒插入數字加熱器（64℃±2℃）孵育3h，孵育完成后取出檢測棒，使其冷卻，讀取檢測結果。檢測結果可穩定16h。陰性質控的測定參照以上操作進行，如果顯示黃色，則實驗成立。結果判定將瓊脂顏色與試劑盒提供的比色卡對照。在冷白色熒光燈下讀取結果，不要直接在日光下讀取結果。當瓊脂顏色為黃色或黃/綠色時，或當瓊脂下層顏色為黃色或黃/綠色或，上層顏色為紫色或棕色，而整管不是紫色時，報告“陰性”。當瓊脂顏色為紫色時，報告“篩查陽性”。檢測限本標準中各藥物的方法檢測限如下表所示。藥物名稱英文名稱本方法檢測限(μg/kg)青霉素GPenicillinG35氨芐西林Ampicillin40阿莫西林Amoxicillin40氯唑西林Cloxacillin200苯唑西林Oxacillin150頭孢噻呋Ceftiofur800頭孢匹林Cephapirin100頭孢氨芐Cefalexin150頭孢喹肟Cefquinome40磺胺二甲氧嗪Sulfadimethoxine50達氟沙星Danofloxacin40二氟沙星Difloxacin200恩諾沙星Enrofloxacin60氟甲喹Flumequine400沙拉沙星Sarafloxacin8土霉素Oxytetracycline150四環素Tetracycline100金霉素Chlortetracycline150多西環素Doxycycline70泰樂菌素Tylosin70紅霉素Erythromycin70吡利霉素Pirlimicin*80替米考星Tilmicosin50拖拉霉素Tulathromycin*400新霉素Neomycin400林可霉素Lincomycin50慶大霉素Gentamicin50鏈霉素Streptomycin400雙氫鏈霉素Dihydrostreptomycin400大觀霉素Spectinomycin400新生霉素Novobiocin1000桿菌肽（枯草桿菌素）Bacitracin350氯霉素Chloramphenicol0.1氟苯尼考Florfenicol80甲砜霉素Thiamphenicol40

（資料性）試劑盒和檢測棒組成

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