第第頁**試驗用試劑和培育基配方**試驗用試劑和培育基配方1.磷酸鹽緩沖液（PBS，0.03mol/L，pH7.2）無水磷酸氫二鈉2.83g磷酸二氫鉀1.36g蒸餾水加至1000ml將各成分加入到1000ml蒸餾水中，待完全溶解后，調pH至7.2～7.4，于121℃壓力蒸氣**20min備用。2.革蘭染色液第1液：結晶紫溶液結晶紫乙醇飽和溶液100ml結晶紫4g～8g95%乙醇100ml1%草酸胺溶液第2液：盧戈碘液碘化鉀2g碘1g蒸餾水200ml第3液：脫色劑（1）95%乙醇（2）丙酮乙醇溶液100ml95%乙醇70ml丙酮30ml第4液：稀釋石炭酸復紅液堿性復紅乙醇飽和溶液10ml堿性復紅5g～10g5%石炭酸溶液90ml蒸餾水900ml3.孔雀綠與沙黃芽孢染色液第1液5.0%孔雀綠水溶液第2液0.5%沙黃水溶液4.無菌檢驗用洗脫液吐溫—801g蛋白胨10g氯化鈉8.5g蒸餾水1000ml將各成分加入到1000ml0.03mol/LPBS液中，加熱溶解后調pH至7.2～7.4，于121℃壓力蒸汽**20min備用。5.標準硬水（硬度342mg/L）氯化鈣（CaCl2）0.034g氯化鎂（MgCl2·6H2O）0.139g蒸餾水加至1000ml。6.有機干擾物牛血清白蛋白30g蒸餾水1000ml溶解后用微孔濾膜（孔徑為0.45μm）濾過**，冰葙保存備用。7.營養瓊脂培育基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化鈉5g瓊脂15g蒸餾水1000ml除瓊脂外其他成份溶解于蒸餾水中，調pH至7.2～7.4，加入瓊脂，加熱溶解，分裝，于121℃壓力蒸汽**20min備用。8.營養肉湯培育基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化鈉5g蒸餾水1000ml將各成分溶解于蒸餾水中，調pH至7.2～7.4，分裝，于121℃壓力蒸汽**20min備用。9.稀釋液：胰蛋白胨生理鹽水溶液（TPS）。胰蛋白胨1.0g氯化鈉8.5g先用900ml以上蒸餾水溶解，并調整pH值在7.0±0.2，*終用蒸餾水加至1000ml，分裝后，經121℃壓力蒸汽**后使用。10.胰蛋白胨大豆肉湯培育基（TSB）胰蛋白胨1.5%大豆蛋白胨0.5%氯化鈉0.5%用蒸餾水配制而成，調整pH為7.2±0.2，經121℃壓力蒸汽**后使用。11.胰蛋白胨大豆瓊脂培育基（TSA）胰蛋白胨1.5%大豆蛋白胨0.5%氯化鈉0.5%瓊脂1.6%用蒸餾水配制而成，調整pH為7.2±0.2，經121℃壓力蒸汽**后使用。12.品紅亞硫酸鈉培育基蛋白胨10g酵母浸膏5g牛肉膏5g乳糖10g瓊脂15g～20g磷酸氫二鉀3.5g無水亞硫酸鈉5g5%堿性品紅乙醇溶液20ml蒸餾水1000mg以上各成分蒸餾水溶解，調pH至7.2～7.4，裝瓶，經121℃壓力蒸汽**后使用。13.溴甲酚紫蛋白胨培育液蛋白胨10g葡萄糖5g可溶性淀粉1g溴甲酚紫乙醇溶液10ml蒸餾水1000ml將蛋白胨、葡萄糖溶解于蒸餾水中，調pH至7.0～7.2，加入2%溴甲酚紫酒精溶液，搖勻后，分裝（每管5ml），并放入一個小倒管，于115℃壓力蒸汽**30min。置4℃冰箱備用。14.嗜熱脂肪桿菌恢復瓊脂培育基蛋白胨10g牛肉膏3g可溶性淀粉1g葡萄糖1g瓊脂20g蒸餾水1000ml以上各成分蒸餾水溶解，調pH至7.0～7.2，裝瓶，經115℃壓力蒸汽**30min后使用。15.需氧—***瓊脂培育基酪胨（胰酶水解）15g牛肉膏3g葡萄糖5g氯化鈉2.5gL—胱氨酸0.5g硫乙醇酸鈉0.5g酵母浸出粉5g新鮮配制的0.1%刃天青溶液1.0ml（或新配制的0.2%亞甲藍溶液0.5ml瓊脂0.5g～0.7g蒸餾水1000ml除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成份加入蒸餾水中，微溫溶解后，調pH至弱堿性，煮沸、濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調pH至6.9～7.3，分裝于115℃壓力蒸汽**30min。16.沙堡瓊脂培育基葡萄糖40g蛋白胨10g瓊脂20g蒸餾水1000ml將上述成分混合后，加熱至完全溶解，調pH至5.6±0.2，于115℃壓力蒸汽**30min備用。17.沙堡液體培育基葡萄糖40g蛋白胨10g蒸餾水1000ml將上述成分混合后，加熱至完全溶解，調pH至5.6±0.2，于115℃壓力蒸汽**30min備用。18.無菌試驗用**培育基磷酸二氫鉀（KH2PO4）1g硫酸鎂（MgSO4·7H2O）0.5g蛋白胨5g葡萄糖10g蒸餾水1000ml除葡萄糖外，上述各成分加入蒸餾水內，微溫溶解后，調整pH約6.8，煮沸，加葡萄糖溶解后，搖勻濾清，調pH使**后為6.4±0.2，分裝，115℃壓力蒸汽**20min備用。19.人**細胞維持培育基1640干粉培育基10×10.4gL谷氨酰胺2.93g丙酮酸鈉1.004g盤尼西林80萬單位鏈霉素100萬單位碳酸氫鈉20.0gHepes23.9g去離子水加至10000ml除盤尼西林、鏈霉素外，其余各成分溶于蒸餾水中，調pH至7.0～7.2，115℃壓力蒸汽**20min備用。臨用前加入無菌盤尼西林、鏈霉素溶液。20.人**細胞完全培育基在人**細胞維持培育基中加入10%無菌小牛血清。21.血瓊脂培育基營養瓊脂100ml脫纖維羊血（或兔血）10ml將營養瓊脂加熱熔化待冷至50℃左右，以無菌操作將10ml脫纖維血加入后搖勻，倒平皿置冰箱備用。22.霉菌培育基胨5g葡萄糖10g磷酸二氫鉀1g氯化鈉5.0g硫酸鎂0.5g蒸餾水1000ml除葡萄糖外，取上述成份加入蒸餾水中，微溫溶解后，調pH至6.0，煮沸，加入葡萄糖溶液后，搖勻，濾清，調pH至5.6～6.0，分裝于115℃壓力蒸汽**30min。23.SCDLP液體培育基酪蛋白胨17g大豆蛋白胨3g葡萄糖2.5g氯化鈉5g磷酸氫二鉀2.5g卵磷脂1g吐溫807g蒸餾水1000ml將各種成份混合（如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨可用日本多胨代替），加熱溶解后，調pH至7.2～7.3，分裝于121℃壓力蒸汽**20min，搖勻，冷至25℃使用。24.伊紅亞甲藍培育基蛋白胨10g乳糖10g磷酸二氫鉀2g2%伊紅溶液2ml0.65%亞甲藍溶液1ml瓊脂17g蒸餾水1000ml將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中，調pH至7.1，分裝于121℃壓力蒸汽**20min。臨用時，以無菌操作加入乳糖并加熱溶化瓊脂，冷至50℃時，加入伊紅和亞甲藍溶液搖勻，倒平皿置４℃冰箱備用。25.0.5%葡萄糖肉湯培育基胨10g氯化鈉5g葡萄糖5g肉浸液1000ml取胨與氯化鈉加入肉浸液內，微溫溶解后，調pH至弱堿性，煮沸、加入葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調pH至7.0～7.4，分裝，于115℃壓力蒸汽**30min。26.甘露醇培育基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化鈉5g甘露醇10g0.2%溴麝香草酚藍溶液12ml蒸餾水1000ml將蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏加入蒸餾水中，加熱溶解，調pH至7.4，加入甘露醇和溴麝香草酚藍混勻后，分裝，于115℃壓力蒸汽**20min。27.乳糖膽鹽發酵管蛋白胨20g豬膽鹽（或牛，羊膽鹽）5g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml蒸餾水1000ml將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶解于蒸餾水中，調pH至7.4，加入0.04%溴甲酚紫水溶液，分裝（每管10ml），并放入一個小倒管，于115℃壓力蒸汽**15min。28.乳糖發酵管蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml蒸餾水1000ml將蛋白胨及乳糖溶解于蒸餾水中，調pH至7.4，加入0.04%溴甲酚紫水溶液，分裝（每管10ml），并放入一個小倒管，于115℃壓力蒸汽**15min。29．1%莧菜紅莧菜紅1%西曲溴胺0.05%30．MEA培育基麥芽浸膏30g大豆蛋白胨3g瓊脂15g雙蒸水加至1000ml將上述成份制成溶液于121℃下**15mln，**后無菌調pH至5.6±0.2備用。31．MEB肉湯麥芽浸膏20g雙蒸水加至1000ml將上述成份制成溶液于121℃下**15mln，**后無菌調pH至6.9