1、試述NK細胞對靶細胞的殺傷途徑及分子機制?答：（1）穿孔素/顆粒酶途徑：即抗體依賴的細胞介導的細胞毒性（ADCC）。顆粒酶與穿孔素一起貯存于NK細胞的胞漿顆粒中，NK細胞借助其FcrRⅢ與結合于靶細胞上的IgGFc段結合，活化的NK細胞可釋放穿孔素與顆粒酶，其中穿孔素可發揮類似補體膜攻擊復合物的功效，在有鈣離子存在的條件下，可在靶細胞膜上形成“孔道”，使細胞膜的通透性增加，使水電解質快速進入胞內至靶細胞崩解破壞。顆粒酶是一種絲氨酸蛋白酶，可循穿孔素形成的“孔道”進入靶細胞內，通過激活凋亡有關的酶系統造成細胞凋亡。（2）Fas/FasL途徑：Fas分子也稱為APO－1或CD95，屬于Ι型跨膜糖蛋白，FasL是Ⅱ型跨膜糖蛋白,當FasL與Fas結合時，Fas能夠向細胞傳遞“死亡信號”，數小時內細胞凋亡。Fas的凋亡信號重要是通過與其胞漿區有關的死亡構造域蛋白（FADD）介導的?；罨驨K細胞（FasL）＋靶細胞（Fas）→形成Fas三聚體→胞漿內的死亡構造域相聚成簇→與Fas有關死亡構造域蛋白結合→募集和激活caspase8→caspase8級聯反映造成靶細胞凋亡。具體為：Fas與FasL結合后，受體發生多聚化，胞漿區的死亡構造域蛋白（DD）也發生多聚化，使得位于胞漿內的FADD能夠通過其C端的DD與受體胞漿的DD結合。FADD首先通過C端的DD結合Fas，另首先通過N端的死亡反映構造域（DEM）與caspase－8N端的DEM結合，通過caspase－8誘導效應性caspase蛋白酶的激活，降解本身的DEM并最后造成細胞凋亡的發生。（3）TNF-α/TNFR-1途徑：NK細胞能夠分泌細胞因子TNF-α，TNF通過①變化靶細胞溶酶體的穩定性，造成多個水解酶外漏；②影響細胞膜磷脂代謝；③變化靶細胞糖代謝使組織中pH減少；④以及活化靶細胞核酸內切酶，降解基因組DNA從而引發程序性細胞死亡等機理殺傷靶細胞。環節為：TNF-α＋靶細胞（I型TNF受體）結合→形成TNF-R三聚體→胞漿內的死亡構造域相聚成簇→激活caspase8→造成靶細胞凋亡。（4）抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用（ADCC）：NK細胞體現的FcγRⅢA(CD16)重要結合人的IgG1和IgG3的Fc端（Cγ2、Cγ3功效區），在針對靶細胞特異性IgG抗體的介導下，可殺傷對應的靶細胞，這一殺傷過程稱為抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用。IL-2和IFN-γ明顯增強NK細胞介導的ADCC作用。NK細胞發揮ADCC后，其本身體現Fas并可通過Fas/FasL機制發生化活誘導的細胞死亡。2、試述腫瘤免疫治療的辦法有哪些？簡述其原理？答：腫瘤免疫治療是指通過激發和增強及機體的免疫功效，以達成控制和殺傷腫瘤細胞的目的。根據機體抗腫瘤免疫效應機制，腫瘤免疫治療可分為:(1)非特異性免疫治療:是指應用某些免疫調節劑通過非特異性地增強機體的免疫功效,激活機體的抗腫瘤免疫應答,以達成治療腫瘤的目的。例如：卡介苗、某些細胞因子如IL-2等均屬于這類。（2）主動免疫治療：是指給機體輸入含有抗原性的瘤苗，運用腫瘤抗原的免疫原性，采用多個有效手段使宿主免疫系統產生針對腫瘤抗原的抗腫瘤免疫應答以治療腫瘤的辦法。該法應用的前提是宿主的免疫功效狀態即腫瘤抗原能刺激機體產生免疫反映。具體做法是給荷瘤宿主注射含有免疫原性的瘤苗，也有使用已在體外被已知腫瘤抗原或腫瘤細胞甚至腫瘤組織裂解物所致敏的樹突狀細胞，即攜帶腫瘤抗原信息的“樹突狀細胞瘤苗”免疫荷瘤宿主。以期機體本身主動產生抗腫瘤的適應性免疫應答。達成治療腫瘤的目的。此種辦法對地手術后去除微小的轉移瘤灶和隱匿瘤、防止腫瘤轉移和復發有較好的應用效果。（3）被動免疫治療：是指直接給機體輸注外源的免疫效應物質，由這些外源性效應物質在機體內發揮治療腫瘤作用。重要有下列兩大類：抗腫瘤導向治療，運用高度特異性的單克隆抗體為載體，將細胞毒性的殺傷分子帶到腫瘤病灶處，可特異地殺傷腫瘤細胞；過繼免疫療法，是取對腫瘤有免疫力的供者淋巴細胞轉輸給腫瘤者，或取患者本身的免疫細胞在體外活化、增殖后，再轉輸入患者體內，使其在患者體內發揮腫瘤作用。，針對機體腫瘤的特異性外源的免疫效應物質涉及：抗體、細胞因子、免疫效應細胞等，由這些外源性的免疫效應物質在宿主體內發揮抗腫瘤作用。該辦法不依賴于機體本身的免疫功效狀態。3、試述腫瘤干細胞的靶向治療手段有哪些？簡述其原理？答：（1）干擾腫瘤干細胞（CSC）傳導通路即克制腫瘤細胞表面信號通路的活化：如Wnt通路、Hedgehog傳導通路、Norch傳導通路、ＮＦ－κＢ通路等，這些通路多與腫瘤干細胞的生長、增殖、自我更新、逃逸凋亡等親密有關。（2）針對CSC特定基因的治療：在CSC中特定基因的體現或沉默對CSC的增殖、凋亡含有調控作用，靶向作用于這些基因，變化其體現，能夠克制CSC生長或誘導其凋亡。（3）針對表面標志物的靶向治療：針對CSC表面存在某些特異性的標志物如CD34、CD133等，以這些標志物為靶點對其進行殺傷，此為CSC的靶向治療又提供了一種切實可行的途徑。（4）針對CSC微環境的治療：CSC微環境在CSC的生長增殖過程中起著重要作用，首先它為CSC提供充足的營養和調控生長分化的多個因子，另首先它也為CSC抵抗外界損害提供了有利的屏障。微環境對維持CSC自我更新及異質性含有重要調節功效,在正常干細胞中,微環境通過提供克制信號、克制增殖和分化來保持干細胞的本身穩態、克制腫瘤的形成，同時提供短暫的信號增進干細胞的增殖、支持受損組織的再生。一旦克制增殖和分化的信號與短暫增進增殖的信號之間的平衡被打破，干細胞就會轉化為CSC增進腫瘤的形成。干擾微環境和破壞其賴以生存的物質基礎，能夠有效地克制CSC，還能夠提高他治療辦法的療效。（5）誘導CSC分化的治療：,因CSC含有較強的自我更新和分化的潛能，可通過人為誘導CSC分化，使之轉化為腫瘤終末細胞，即正常的或不分裂的細胞從而克制腫瘤的生長，既能避免進一步增殖，同時又增加了放化療敏感性。現在雖只處在構想階段，但也不失為一種可能的腫瘤治療途徑。如全反式維甲酸作為分化誘導劑治療急性早幼粒細胞白血病是一種成功的范例。。4、試述異常體現的共刺激分子在本身免疫病發生機制中可能的作用？如何通過共刺激分子對本身免疫疾病進行輔助診療和治療？答：共刺激分子可大致分為“正性協同刺激分子”和“負性協同刺激分子”，兩者的異常體現與本身免疫性疾病的發生發展親密有關。其中“正性協同刺激分子”的異常增高體現可造成機體免疫功效平衡的失調，打破本身耐受，造成本身免疫性疾病?！柏撔詤f同刺激分子”介導的克制信號在維持免疫耐受中發揮著核心性作用，其缺失造成本身耐受性的變化是也是本身免疫病的致機制之一。另外協同刺激分子體現異常，造成免疫系統紊亂可至T、B細胞的異?；罨彩怯绊懕旧砻庖卟“l生的重要因素。共刺激分子有助于本身免疫性疾病的輔助診療：如可通過檢測共刺激分子的體現狀況（如檢測CD4+CD28-T細胞比例、CD4+T細胞上OX40和ICOS體現）來輔助診療何種本身免疫性疾病。另首先通過檢測共刺激分子體現水平，還能夠用于判斷疾病嚴重程度，從而指導臨床用藥等。另外檢測治療前后共刺激分子體現率變化可提示治療效果及復發幾率。共刺激分子還可有助于本身免疫性疾病的治療，如共刺激分子“OX40”分子只體現在炎癥部位的抗原特異性T細胞上，若只針對OX40/OX40L進行的治療，則治療效應只會作用于這群T細胞，而不會影響其它外周T細胞的功效，從而大大減少了治療所引發的副作用。5、試述維持造血干細胞增殖及分化的辦法？答：維持造血干細胞增殖及分化普通需滿足以下條件。（1）基質細胞：造血干細胞的長久維持與造血微環境的基質細胞是分不開的，體外擴增會使造血細胞分化，造成HSPC造血重建能力削弱，基質細胞支持下的擴增體系可減輕這一副作用?；|細胞的作用：①造血干細胞的長久維持與造血微環境②增強擴增后細胞的歸巢與植入能力。③減少分化、抗凋亡。（2）培養基：血清是良好的天然培養液，但血清成分復雜、變異大，增加了實驗的不擬定因素，特別動物血的基質細胞是分不開的，在培養體系中加入基質細胞能夠發揮三個方面的重要作用：支持HSPC的體外擴增。清存在動物攜帶病原體傳染人類的隱患以及異種蛋白免疫原性，現多主張使用無血清培養基，研究表明無血清、無基質的培養體系配合多個細胞因子也能支持臍血HSPC的體外擴增，擴增后的細胞能成功地植入到亞致死量照射的NOD/SCID鼠內并維持了長久造血的能力。（3）造血細胞因子組合：至今最佳的細胞因子組合尚未擬定，抱負的HSPC移植物應當是由HSC及定向HPC共同構成的混合體，擴增應關注維持HSC質與量的最佳