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文檔簡介

項(xiàng)目四酶抑制法測農(nóng)藥殘留農(nóng)藥殘留（Pesticideresidues），是指農(nóng)藥使用后一定時(shí)期內(nèi)沒有被分解而殘留于生物體、收獲物、土壤、水體、大氣中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。農(nóng)藥殘留的測定意義檢測原理在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下，膽堿酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物（碘化硫代乙酰膽堿ATCI或碘化硫代丁酰膽堿BTCI）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑（二硫代二硝基苯甲酸DTNB）發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測定吸光度的變化值（△A），計(jì)算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的存在。儀器與試劑儀器紫外-可見分光光度計(jì)；水浴鍋；離心機(jī)；燒杯；試管；剪刀等。試劑膽堿酯酶；底物；顯色劑。檢測步驟——樣品處理葉菜剪成1cm左右見方的碎片，塊莖類取橫截面樣品或取其表皮取2g果蔬樣品，塊莖類取4g，放入三角瓶中，加入10mL緩沖液，振蕩1～2min倒出提取液，靜置2min，待測。若提取液混濁或雜質(zhì)太多可過濾后再測。檢測步驟——對照測試反應(yīng)瓶中加入5mL緩沖液，再分別加入200μL酶液和顯色劑，混勻，靜置靜置反應(yīng)10min后加入200μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，及時(shí)放入儀器的測量室第1通道，合上蓋，調(diào)零。記錄三分鐘后顯示屏顯示的吸光度，此值記為△A0。檢測步驟——樣品測試于反應(yīng)瓶中加入5mL待測液，再分別加入200μL酶液和顯色劑，混勻，10min后加入200μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，及時(shí)放入儀器的測量室第1通道，合上蓋，調(diào)零記錄三分鐘后顯示屏顯示的吸光度，此值記為△At。數(shù)據(jù)處理及判斷抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt)/ΔΑ0]×100%若樣品抑制率≥50%，表示樣品農(nóng)殘超標(biāo)，為陽性結(jié)

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