第三章

中藥制劑的檢查第三章

中藥制劑的檢查1【目的要求】掌握重金屬、砷鹽的檢查原理和方法熟悉《中國藥典》現行版制劑通則的檢查項目及特殊雜質的檢查原理了解農藥殘留量的檢查原理和方法了解黃曲霉毒素的檢查方法藥物分析學科【目的要求】藥物分析學科2中藥制劑的檢查項目：制劑通則檢查一般雜質檢查特殊雜質檢查微生物限度檢查藥物分析學科中藥制劑的檢查項目：藥物分析學科3§1中藥制劑雜質檢查一、中藥制劑的雜質指能危害人體健康或影響藥物質量的物質。（一）雜質的分類一般雜質（如酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽）特殊雜質：根據其來源、生產工藝及藥品的性質有可能引入的雜質。（二）雜質來源中藥材原料中帶入生產制備過程中引入貯存過程中引起的中藥制劑自身理化性質的改變藥物分析學科§1中藥制劑雜質檢查一、中藥制劑的雜質藥物分析學科4二、雜質的限量檢查1、雜質限量：藥物中所含雜質的最大允許量，通常用%或ppm表示。2、雜質限量檢查及計算方法1）限量檢查：規定一定限度，要求所檢測的樣品中某組分的含量不超過此限度。2）檢查方法對照品比較法：取一定量與被測雜質相同的純物質或其它對照品配制成標準溶液，與一定量供試藥物的溶液，在相同處理條件下，比較反應結果，從而確定雜質限量是否超過規定。靈敏度法：在供試品溶液中加入試劑，在一定反應條件下，觀察有無正反應出現。§1中藥制劑雜質檢查藥物分析學科二、雜質的限量檢查§1中藥制劑雜質檢查藥物分析學科5§1中藥制劑雜質檢查3）計算方法藥物分析學科§1中藥制劑雜質檢查3）計算方法藥物分析學科6§1中藥制劑雜質檢查例1：注射用雙黃連（凍干）中砷鹽限量檢查

取本品0.4g，加2%硝酸鎂乙醇溶液3ml，點燃，燃盡后，先用小火熾灼使炭化，再在500～600℃熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸5ml與水21ml使溶解，依法檢查（中國藥典2000版附錄ⅨF）如果標準砷溶液（1μgAs/ml）取用量為2ml，計算雜質限量。藥物分析學科§1中藥制劑雜質檢查例1：注射用雙黃連（凍干）中砷鹽限量檢7§1中藥制劑雜質檢查規定：含重金屬≯百萬分之五(5ppm)計算：應取標準鉛溶液(10

gPb/ml)多少ml？例2.葡萄糖中重金屬的檢查方法：藥物分析學科§1中藥制劑雜質檢查規定：含重金屬≯百萬分之五(5ppm)8§1中藥制劑雜質檢查例4.肉桂油中重金屬檢查取肉桂油10ml，加水10ml與鹽酸1滴，振搖后，通硫化氫氣使飽和，水層與油層均不得變色。例3.溴化鈉中砷鹽檢查S==x106=0.5gC.VL2.0X1/1064方法：中國藥典規定，取標準砷溶液2.0mL(每1mL相當于1μg砷)制備砷斑規定：含砷量不得超過4ppm計算：應取供試品量(g)？藥物分析學科§1中藥制劑雜質檢查例4.肉桂油中重金屬檢查例3.溴化9一、重金屬檢查法1、重金屬的概念重金屬是指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬.如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等.重金屬存在影響藥物的穩定性及安全性.鉛易在體內積蓄中毒,以Pb為代表.§2一般雜質檢查藥物分析學科一、重金屬檢查法§2一般雜質檢查藥物分析學科10一、重金屬檢查法（一）第一法：硫代乙酰胺法1、原理：§2一般雜質檢查2、適用范圍：適用于供試品不經有機破壞，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查。藥物分析學科一、重金屬檢查法§2一般雜質檢查2、適用范圍：適用于供試品11§2一般雜質檢查2操作方法樣品管對照管結果觀察樣品對照藥物分析學科§2一般雜質檢查2操作方法樣品管對照管結果觀察12§2一般雜質檢查3．討論①

標準鉛溶液濃度：27ml溶液中Pb2+標準溶液10

g/ml1~2ml②

硫代乙酰胺試液：95版藥典改用硫代乙酰胺為顯色劑③

溶液的pH：pH在3.0~3.5時,呈色較完全.④

供試品溶液有顏色時的處理a.外消色法：Ⅰ.稀焦糖溶液調節，

Ⅱ.指示劑調節b.內消色

藥物分析學科§2一般雜質檢查3．討論①

標準鉛溶液濃度：27ml溶液13§2一般雜質檢查3．討論⑤

干擾物的排除方法a.供試品中微量高價Fe3+存在干擾：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S,產生混濁影響檢查.排除：加入抗壞血酸或鹽酸羥胺使Fe3+還原為Fe2+.如：葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查.b.供試品為鐵鹽（大量的Fe3+）Fe3+在HCl溶液中能形成配位化合物用乙醚提取Fe3++HCl→[HFeCl6]2-（黃色）或水層加氨試液調至堿性,殘存的Fe3+可用KCN掩蔽,按第三法檢查.

如：枸櫞酸鐵銨的重金屬檢查藥物分析學科§2一般雜質檢查3．討論⑤

干擾物的排除方法藥物分析學科14一、重金屬檢查法（二）第二法：灼燒后檢查1、原理：供試品先熾灼破壞后,使有機結合的重金屬游離,再按第一法檢查.§2一般雜質檢查2、適用范圍：適用于供試品需灼燒破壞，取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，經處理后在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查適用于絕大多數的中藥藥物分析學科一、重金屬檢查法§2一般雜質檢查2、適用范圍：適用于絕大多15一、重金屬檢查法（二）第二法：灼燒后檢查3、操作：§2一般雜質檢查緩緩熾灼放冷H2SO40.5-1.0ml供試品炭化

加熱

HNO3

500-600℃H2SO4除盡放冷完全灰化

蒸干HCl2ml水15ml中性按第一法檢查

蒸干氨試液注意：做空白試驗

藥物分析學科一、重金屬檢查法§2一般雜質檢查16一、重金屬檢查法（二）第二法：灼燒后檢查4、討論：a.HNO3處理后,必須蒸干除盡NO.b.熾灼溫度嚴格控制：500-600℃c.含鈉鹽或氟的有機藥物在熾灼時改用鉑坩堝或硬質玻璃

(瑪瑙)蒸發皿.如：鹽酸氟奮乃靜中重金屬檢查§2一般雜質檢查藥物分析學科一、重金屬檢查法§2一般雜質檢查藥物分析學科17一、重金屬檢查法（三）第三法：硫化鈉法1、原理在堿性介質中,以Na2S為顯色劑,使Pb2+與S2-作用生成PbS的混懸液,與一定量標準鉛溶液經同法處理所呈顏色比較,不得更深.2、適用范圍

適用于難溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）但能溶解于堿性溶液的藥物中重金屬的檢查.3、方法取供試品適量,加NaOH試液5ml和水20ml使溶解后,置納氏比色管中,加Na2S試液5滴,搖勻,與一定量標準鉛溶液經同法處理所呈顏色比較.§2一般雜質檢查藥物分析學科一、重金屬檢查法§2一般雜質檢查藥物分析學科18一、重金屬檢查法（四）第四法：微孔濾膜法1、原理同第一法2、適用范圍當重金屬含量低(2-5

g)時,在比色管中難于目視觀察,采用本法.3、方法使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上(鉛斑)提高檢查的靈敏度.§2一般雜質檢查藥物分析學科一、重金屬檢查法§2一般雜質檢查藥物分析學科19二、砷鹽檢查法（一）古蔡氏法Gutzeit（法定方法）1、原理：§2一般雜質檢查①AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H2O砷化氫與溴化汞試紙作用：②AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2(黃色)AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3(棕色)As5+反應速度慢，需將As5+轉化為As3+初生態的氫藥物分析學科二、砷鹽檢查法§2一般雜質檢查①AsO33-+3Zn+920二、砷鹽檢查法（一）古蔡氏法Gutzeit1、原理：故加入碘化鉀、酸性氯化亞錫還原劑，將5價砷還原為3價砷AsO43-+2I-+2H+

→AsO33-+I2+H2OAsO43-+Sn2++2H+→AsO33-+Sn4++H2OI2+Sn2+→2I-+Sn4+4I-+Zn2+→[ZnI4]2-Sn2++Zn→Sn+Zn2+§2一般雜質檢查促進反應向右進行形成鋅錫齊，有利于反應平穩的進行藥物分析學科二、砷鹽檢查法§2一般雜質檢查促進反應向右進行形成鋅錫齊，21二、砷鹽檢查法（一）古蔡氏法Gutzeit2、裝置：3、操作：①A瓶：標準砷溶液(1μg/ml)2ml+鹽酸5ml+水21ml+KI試液5ml+酸性SnCl2試液5滴，室溫放置10min②A瓶＋鋅粒2g，接導氣管C③25℃-40℃水浴45min取出，比較砷斑顏色深淺§2一般雜質檢查HgBr2試紙醋酸鉛棉60mg(裝管高度6-8cm)藥物分析學科二、砷鹽檢查法§2一般雜質檢查HgBr2試紙醋酸鉛棉60m22二、砷鹽檢查法（一）古蔡氏法Gutzeit4、討論1）Zn粒2）溴化汞試紙的選擇3）適宜的PH值及反應溫度和時間4）

干擾物的排除a、供試品是硫化物,亞硫酸鹽,硫代硫酸鹽干擾：排除方法：加入濃硝酸處理b、供試品是鐵鹽(Fe3+)干擾：Fe3+能消耗還原劑(KI、SnCl2),并能氧化砷化氫.排除方法：先加酸性SnCl2試液使Fe3+→Fe2+§2一般雜質檢查藥物分析學科二、砷鹽檢查法§2一般雜質檢查藥物分析學科23二、砷鹽檢查法（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）（法定）第一步：同古蔡氏法生成砷化氫第二步：砷化氫還原Ag-DDC溶液,產生紅色的膠態銀.目視比色法儀器分析510nm，可定量§2一般雜質檢查SSHAg63+AsC2H5NC2H5CSS+C2H5NC2H5CAsH3

C2H5NC2H5CSSAgNCSS+6藥物分析學科二、砷鹽檢查法§2一般雜質檢查SSHAg63+AsC2H524二、砷鹽檢查法（三）白田道夫法（靈敏度低）1、原理：SnCl2在HCl中能將砷鹽還原為棕褐色的膠態砷,與一定量的標準砷溶液按同法處理后進行比較,判斷供試品中砷鹽的限量.§2一般雜質檢查2As3++3SnCl2+6HCl2As+3SnCl4+6H+棕褐色2、對含銻藥物中砷鹽的檢查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法.藥物分析學科二、砷鹽檢查法§2一般雜質檢查2As3++3SnCl25§2一般雜質檢查二、砷鹽檢查法（四）奇列氏法（次磷酸法）1、原理：在鹽酸酸性溶液中,次磷酸還原砷鹽為棕色的游離砷,與標準砷溶液同法處理后比較顏色.NaH2PO2+HCl→H3PO2+NaCl3H3PO2+H3AsO3→3H3PO3+2AS↓2.特點不受S2-,SO32-,Sb干擾靈敏度較古蔡氏法低藥物分析學科§2一般雜質檢查二、砷鹽檢查法藥物分析學科26§2一般雜質檢查三、鐵鹽檢查法第一法硫氰酸鹽法1.原理鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配離子,與一定量標準鐵溶液用同法處理后所呈的顏色進行比較.2.操作4ml25mld.HCl30%硫氰酸銨過硫酸銨50mgH2O50mlH2O

樣品標準溶液影響藥物穩定性藥物分析學科§2一般雜質檢查三、鐵鹽檢查法2.操作4ml25mld.27§2一般雜質檢查四、硫酸鹽檢查指示性雜質1、原理硫酸鹽與氯化鋇在鹽酸酸性溶液中生成硫酸鋇的白色渾濁液,與一定量標準硫酸鉀溶液與氯化鋇在相同條件下生成的渾濁比較.2.操作法2ml40mld.HCl25%BaCl25mlH2O50mlH2O

樣品標準溶液濃度范圍：0.1mg~0.5mgSO42-/50ml藥物分析學科§2一般雜質檢查四、硫酸鹽檢查指示性雜質1、原理2.操28§2一般雜質檢查五、氯化物檢查指示性雜質1.原理利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應,生成氯化銀白色渾濁液,與一定量標準氯化鈉溶液在相同條件下產生的氯化銀渾濁程度比較,濁度不得更大.Cl-+Ag+AgCl↓H+5mlHNO3/50ml，30-40℃，置暗處反應)※適宜的濃度范圍：50-80μgCl-/50ml藥物分析學科§2一般雜質檢查五、氯化物檢查指示性雜質1.原理H+5m29§2一般雜質檢查六、干燥失重藥品在規定的條件下，經干燥后所減失的重量，包括水分及其他揮發性成分。檢查方法常壓恒溫干燥（烘干法）----受熱較穩定的中藥制劑恒重：連續2次干燥后的重量差異不超過0.3mg干燥劑干燥----受熱易分解或揮發的供試品硅膠，五氧化二磷，硫酸等干燥劑減壓干燥—熔點低、受熱不穩定及較難趕除水分的供試品藥物分析學科§2一般雜質檢查六、干燥失重藥品在規定的條件下，經干燥后所30§2一般雜質檢查七、水分測定法檢查方法烘干法----不含或含少量揮發性成分的供試甲苯法----含揮發性成分的供試品減壓干燥----含揮發性成分的貴重藥品氣相色譜法----散劑、顆粒劑、丸劑、片劑等各類型中藥制劑中微量水分的測定費休法藥物分析學科§2一般雜質檢查七、水分測定法檢查方法藥物分析學科31§2一般雜質檢查八、熾灼殘渣1、定義：有機物經高溫熾灼后殘留的非揮發性物及雜質，多為金屬的氧化物或無機鹽類。2、操作：供試品1.0～2.0g→置已恒重的坩堝中→精密稱定→熾灼至炭化→放冷→硫酸0.5～1ml使濕潤→低溫除盡硫酸蒸氣→700～800℃至灰化→精密稱定→恒重3、注意：如需將殘渣留作重金屬檢查，則熾灼溫度必須控制在500～600℃。藥物分析學科§2一般雜質檢查八、熾灼殘渣1、定義：有機物經高溫熾灼后殘32§2一般雜質檢查九、灰分測定1、總灰分：中藥經粉碎后加熱，高溫熾灼至灰化，則其細胞組織及其內含物成為灰燼而殘留，由此所得灰分為“生理灰分”，即總灰分

2．酸不溶性灰分

中藥經高溫熾灼得到的總灰分加鹽酸處理，得到不溶于鹽酸的灰分，成為酸不溶性灰分。注意：當灰分本身差異較大時，增加酸不溶性灰分的測定藥物分析學科§2一般雜質檢查九、灰分測定1、總灰分：中藥經粉碎后加熱，33§2一般雜質檢查十、有害元素的測定05版藥典增加“鉛、鎘、砷、汞、銅”的限量測定測定方法：原子吸收分光光度法電感耦合等離子體質譜法測定藥材：甘草、黃芪、西洋參、丹參、白芍、金銀花限量：鉛≤5ppm，鎘≤0.3ppm，砷≤2ppm，汞≤0.2ppm，銅≤20ppm藥物分析學科§2一般雜質檢查十、有害元素的測定05版藥典增加“鉛、鎘、34§3特殊雜質檢查特殊雜質：指在該藥品的生產和貯存過程中，根據其來源、生產