蘭索拉唑腸溶微丸的研制

蘭索拉唑是一種具有獨(dú)特機(jī)制、特異性和長(zhǎng)期鎮(zhèn)靜作用的藥物，具有高度的相互作用機(jī)制、高度的特征性、強(qiáng)酸性反應(yīng)和長(zhǎng)期藥物作用。它可以廣泛用于治療與酸分泌有關(guān)的各種消化功能障礙疾病。其在壁細(xì)胞內(nèi)酸性環(huán)境中轉(zhuǎn)化成兩種有活性的衍生物蘭索拉唑砜以及5-羥基蘭索拉唑,能與H達(dá)克普隆1儀器與設(shè)備UV759紫外分光光度計(jì)、FA-1104電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司),ZRS-8G溶出儀(天津市天大天發(fā)有限公司),PB-8精密pH計(jì)(北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司),LC-2010A高效液相色譜儀(日本島津公司),KQ-50B超聲清洗機(jī)(昆山市超聲儀器有限公司),SMA-0.75籃式研磨機(jī)(上海索維機(jī)電有限公司),LS230激光粒度測(cè)定儀(美國(guó)貝克曼庫爾有限公司),日立新型高分辨場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡SU8010(日本日立公司),FLB-3流化床制粒包衣機(jī)(遼寧祥安制藥機(jī)械有限公司)。蘭索拉唑原料藥(桂林華信制藥有限公司),蘭索拉唑以及雜質(zhì)對(duì)照品(批號(hào)100709-201304,中國(guó)生物制品檢定所),蘭索拉唑腸溶膠囊(規(guī)格30mg,批號(hào)062A,天津武田藥品有限公司),微晶纖維素、羥丙基纖維素E5(湖州展望藥業(yè)有限公司),吐溫80(上海申宇醫(yī)藥化工有限公司),檸檬酸三乙酯(阿法埃莎化學(xué)有限公司),尤特奇L30D-55(上海贏創(chuàng)-德固賽投資有限公司),甲醇、乙腈(天津康科德化學(xué)試劑有限公司),其他試劑均為分析純,市售。2蘭索拉唑腸溶微丸的表征本實(shí)驗(yàn)作者以溶出度以及微丸外觀狀態(tài)等為主要指標(biāo),考察不同因素對(duì)制劑的影響。通過掃描電鏡觀察微丸的表面和內(nèi)部形態(tài)確保包衣效果,依據(jù)以上各因素確定了蘭索拉唑腸溶微丸最優(yōu)工藝處方。依據(jù)優(yōu)選的處方進(jìn)行影響因素以及加速實(shí)驗(yàn)考察制劑的穩(wěn)定性。2.1蘭索拉唑包含藥物素的制備蘭索拉唑作為一種難溶性藥物,通過濕法研磨技術(shù)減小藥物粒徑對(duì)改善微丸溶出度以及提高上藥率都有非常明顯的作用2.1.1羥丙甲基纖維素e質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)微丸用藥率的影響分別稱取適量羥丙甲基纖維素加水配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%、8%和10%的載體溶液,加入適量蘭索拉唑,研磨,制得不同載體質(zhì)量分?jǐn)?shù)的藥物混懸液,考察藥丸的上藥率。計(jì)算結(jié)果表明羥丙甲基纖維素E5質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%時(shí)上藥率為81.6%;羥丙甲基纖維素E5質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%時(shí)上藥率為89.7%;羥丙甲基纖維素E5質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%時(shí)上藥率為92.8%。通過結(jié)果可知隨著羥丙甲基纖維素E5質(zhì)量分?jǐn)?shù)的上升,上藥率隨之增加,但是增加羥丙甲基纖維素-E5質(zhì)量分?jǐn)?shù)會(huì)造成部分微丸黏連。另外將含藥素丸置于pH6.8緩沖溶液中進(jìn)行溶出度實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖1。由圖1可知隨著羥丙甲基纖維素E5質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加會(huì)影響藥物的釋放,所以結(jié)合上藥率以及溶出的結(jié)果選擇羥丙甲基纖維素E5的質(zhì)量分?jǐn)?shù)8%為最佳。2.1.2高溫處理對(duì)藥物降解的影響分別以磷酸氫二鈉、氫氧化鈉、碳酸鈣、氫氧化鎂以及碳酸鈉作為pH調(diào)節(jié)劑加入到藥物混懸液中。將混懸液凍干,凍干粉末置于高溫(60℃)、高濕[相對(duì)濕度(75±5)%]條件下,放置10d,計(jì)算10d藥物降解量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)過10d高溫處理以碳酸鈉為穩(wěn)定劑的處方藥物降解0.5%,其他處方?jīng)]有降解。10d高濕處理磷酸氫二鈉和氫氧化鈉處方藥物降解0.8%,碳酸鈣處方藥物降解1.9%,氫氧化鎂處方藥物降解1.2%,碳酸鈉處方藥物降解0.7%。以磷酸氫二鈉和氫氧化鈉調(diào)節(jié)含藥混懸液pH時(shí),在高溫、高濕的條件下都有良好的穩(wěn)定性,所以選擇磷酸氫二鈉和氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。2.1.3隔離層面包液質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)微丸品質(zhì)的影響由于丙烯酸樹脂類腸溶材料偏酸性,因此含藥素丸需要包裹隔離層,將藥物跟腸溶材料隔離開。常用的包衣材料有羥丙甲纖維素和羥丙基纖維素,有研究證明,羥丙甲纖維素作為拉唑類藥物的隔離層,能提高藥物的穩(wěn)定性,因此選用羥丙甲纖維素作為隔離材料稱取適量羥丙甲纖維素加水配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%、10%和12%的溶液,按照隔離衣包衣工藝參數(shù)進(jìn)行包衣。在包衣過程中可以發(fā)現(xiàn)雖然隨著羥丙甲纖維素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加隔離衣可以更好地黏附在微丸表面形成良好的隔離保護(hù),但是當(dāng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到10%以上時(shí),流化床會(huì)呈現(xiàn)出一種不太穩(wěn)定的包衣狀態(tài),使包衣效率明顯下降,因此選定隔離層包衣液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%。另外對(duì)隔離層增重也進(jìn)行了考察。考察隔離衣增重(按羥丙甲纖維素E5計(jì))分別為15%、20%和25%。將不同增重隔離丸按照腸溶衣工藝參數(shù)包裹腸溶衣,將制備好的微丸置于40℃烘箱加熱24h,觀察微丸變色情況。當(dāng)隔離衣增重低于20%時(shí)腸溶微丸放置于40℃烘箱加熱24h后微丸顏色發(fā)生變化呈現(xiàn)出淡紫色,當(dāng)隔離衣膜增重達(dá)到25%時(shí)該條件下微丸顏色無變化。結(jié)合該結(jié)果將隔離衣的增重定為25%。2.2蘭索拉唑侖微丸的制備2.2.1腸溶面包系統(tǒng)常用的腸溶材料有丙烯酸樹脂類和鄰苯二甲酸醋酸纖維素類,初步選擇雅克宜93A19326和尤特奇L30-D55水分散體作為腸溶包衣材料。雅克宜是一種全配方的分散于水中的干性丙烯酸類腸溶包衣系統(tǒng),可應(yīng)用于諸如片劑、顆粒劑和丸劑之類的固體劑型的薄膜包衣,為全球認(rèn)可的腸溶聚合物,具有完全配方的包衣系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn);尤特奇L30-D55是甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯質(zhì)量比1∶1的共聚物質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%的水分散體包衣液。兩種材料在胃部酸性條件下不溶解,到小腸中在pH大于5.5時(shí)溶解。參考尤特奇應(yīng)用技術(shù)手冊(cè)和雅克宜應(yīng)用技術(shù)資料,配制兩種腸溶包衣液,固含量為30%(按丙烯酸樹脂計(jì)),增塑劑用量為聚合物的10%。按照蘭索拉唑腸溶微丸制備工藝包腸溶衣,計(jì)劃增重(按聚合物計(jì))30%。將腸溶丸取出放入0.1mol·L2.2.2腸溶微丸的篩選腸溶衣膜作為功能性材料,要達(dá)到小腸溶解的效果,衣膜必須完整、致密而且要達(dá)到一定厚度才能起到耐酸作用。本實(shí)驗(yàn)作者以蘭索拉唑含藥素丸以及隔離層最終處方包衣之后,腸溶衣分別增重(按共聚物計(jì))15%、20%、25%和30%。增塑劑用量為聚合物的10%。按照腸溶衣工藝參數(shù)包裹腸溶衣,包完后,將微丸置于25℃,相對(duì)濕度(75±5)%條件下觀察微丸變色情況。通過肉眼觀察可知市售制劑達(dá)克普隆自制微丸在高濕條件下都略有變色現(xiàn)象,主要是因?yàn)槭惺勰c溶微丸是采用離心造粒法制得,而自制微丸采用液相層積法制備,含藥層以及隔離層都采用水溶性材料羥丙甲基纖維素E5,微量的藥物在微丸中順質(zhì)量分?jǐn)?shù)梯度發(fā)生遷移,與腸溶材料接觸發(fā)生變色現(xiàn)象。隨著腸溶衣增重增加變色現(xiàn)象逐漸趨于消失,但是隨著腸溶衣的不斷增加,包衣效率逐漸下降,所以希望篩選出最適宜增重量,保證不影響微丸的溶出度以及穩(wěn)定性。首先取25%、30%腸溶衣增重量微丸依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行溶出實(shí)驗(yàn),考察腸溶衣增重量對(duì)溶出度的影響。分別取包衣增重為25%、30%的腸溶微丸與市售制劑達(dá)克普隆由圖2可見,相比于腸溶衣增重25%而言腸溶衣增重30%在胃酸中對(duì)微丸的保護(hù)效果更好,且腸溶衣增重30%的釋放度與達(dá)克普隆2.2.3流化床設(shè)置工藝參數(shù)取蘭索拉唑隔離丸適量置于流化床中,開啟流化床設(shè)置工藝參數(shù)(進(jìn)風(fēng)溫度35~45℃;產(chǎn)品溫度25~30℃;出風(fēng)溫度20~30℃;風(fēng)量90~150m2.3電鏡觀察及其微丸結(jié)構(gòu)肉眼觀察,蘭索拉唑腸溶微丸為白色球體,表面光滑圓整,外形美觀。用掃描電鏡對(duì)微丸的外觀及橫切面進(jìn)行微觀掃描,電鏡照片見圖3。由圖3可見微丸圓整度良好,表面光滑。由橫切面觀察,微丸內(nèi)部結(jié)構(gòu)致密。該腸溶微丸分別有四層,分別為微晶纖維素丸芯、藥物層積層、隔離層以及腸溶衣層,各層界限明確,包裹均勻完整。觀察腸溶衣層狀態(tài)結(jié)構(gòu)致密無縫隙,能很好的保證微丸的耐酸性以及穩(wěn)定性。2.4出度、含量及有關(guān)物質(zhì)是否在規(guī)定限度內(nèi)藥物制劑穩(wěn)定性最主要的評(píng)價(jià)指標(biāo)是在有效期內(nèi)制劑的溶出度、含量及有關(guān)物質(zhì)是否在規(guī)定限度內(nèi)。本實(shí)驗(yàn)作者主要考察了高濕、高溫、光照對(duì)蘭索拉唑腸溶微丸穩(wěn)定性的影響,同時(shí)進(jìn)行了加速試驗(yàn)對(duì)腸溶微丸穩(wěn)定性進(jìn)行考察2.4.1貯藏期間不同溫度對(duì)腸溶微丸的外觀和理化性質(zhì)影響將自制微丸和達(dá)克普隆自制微丸60℃條件下5d試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)B為0.076%,雜質(zhì)C為0.076%,未檢測(cè)到雜質(zhì)A及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.152%,標(biāo)示百分含量為99.5%,溶出度為96.4%。自制微丸25℃、相對(duì)濕度75%條件下5d試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)B為0.071%,雜質(zhì)C為0.085%,未檢測(cè)到雜質(zhì)A及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.156%,標(biāo)示百分含量為99.2%,溶出度為94.0%。自制微丸照度4500lx條件下5d試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)B為0.077%,雜質(zhì)C為0.064%,未檢測(cè)到雜質(zhì)A及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.141%,標(biāo)示百分含量為100.2%,溶出度為96.4%。自制微丸60℃條件下10d試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)B為0.093%,雜質(zhì)C為0.091%,未檢測(cè)到雜質(zhì)A及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.184%,標(biāo)示百分含量為99.1%,溶出度為92.2%。自制微丸25℃、相對(duì)濕度75%條件下10d試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)B為0.088%,雜質(zhì)C為0.100%,未檢測(cè)到雜質(zhì)A及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.188%,標(biāo)示百分含量為98.5%,溶出度為91.4%。自制微丸照度4500lx條件下10d試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)B為0.079%,雜質(zhì)C為0.072%,未檢測(cè)到雜質(zhì)A及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.151%,標(biāo)示百分含量為99.2%,溶出度為94.1%。達(dá)克普隆達(dá)克普隆由以上結(jié)果可知,溫度對(duì)腸溶微丸的外觀和含量沒有顯著性影響,在高溫條件下,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)藥物的累積釋放量無明顯變化,說明該制劑在高溫條件下較為穩(wěn)定。濕度對(duì)腸溶微丸的含量、有關(guān)物質(zhì)沒有顯著性影響,但在高濕條件下微丸出現(xiàn)變色,呈現(xiàn)出淡紫色。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),藥物的在酸中的溶出度有所增加。說明該制劑在高濕條件下不穩(wěn)定。光照對(duì)腸溶微丸的外觀、含量、有關(guān)物質(zhì)含量均無顯著影響,說明該腸溶微丸對(duì)光較為穩(wěn)定。2.4.2個(gè)月試驗(yàn)結(jié)果取自制樣品采用模擬上市包裝形式以及達(dá)克普隆在溫度(40±2)℃、相對(duì)濕度(75±5)%的條件下放置3個(gè)月分別于第1、2和3月取樣,按考察項(xiàng)目下要求進(jìn)行檢查,與0d結(jié)果比較,結(jié)果如下。自制微丸加速1個(gè)月試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)B為0.060%,雜質(zhì)C為0.060%,未檢測(cè)到雜質(zhì)A及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.120%,標(biāo)示百分含量為99.75%,溶出度為98.3%。自制微丸加速2個(gè)月試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)A為0.050%,雜質(zhì)C為0.070%,未檢測(cè)到雜質(zhì)B及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.120%,標(biāo)示百分含量為99.63%,溶出度為97.4%。自制微丸加速3個(gè)月試驗(yàn)結(jié)果,雜質(zhì)C為0.090%,未檢測(cè)到雜質(zhì)A、雜質(zhì)B及其他雜質(zhì),總雜質(zhì)為0.090%,標(biāo)示百分含量為98.67%,溶出度為93.2%。達(dá)克普隆結(jié)果表明,自制微丸與市售制劑在加速試驗(yàn)后含量、有關(guān)物質(zhì)均符合限度要求。自制微丸溶出度好于市售制劑,含量與有關(guān)物質(zhì)基本一致。3藥物的包裝、使用和顆粒a.通過影響因素以及加速實(shí)驗(yàn)測(cè)得的穩(wěn)定性結(jié)果表明,蘭索拉唑腸溶微丸在加速試驗(yàn)條件下考察3個(gè)月,各項(xiàng)指標(biāo)均未見明顯改變,表明本品相對(duì)穩(wěn)定;影響因素試驗(yàn)表明,自制制劑與市售制劑降解趨勢(shì)一致,在高溫、高濕及光照條件下,有關(guān)物質(zhì)均有增加,且高濕>高溫>光照。本品在光照、堿性條件下較穩(wěn)定,在高溫、高濕條件下穩(wěn)定性稍差,產(chǎn)生較多降解產(chǎn)物,考慮到實(shí)際儲(chǔ)存、運(yùn)輸?shù)男枰褪惺鬯幬锏陌b,可以選用高鋁塑泡罩包裝,以避免藥物因吸濕而降解,可減少影響藥品藥效因素的作用,有利于保持藥品穩(wěn)定性b.本實(shí)驗(yàn)作者采用液相層積法制備蘭索拉唑腸溶微丸對(duì)比市售制劑采用離心造粒法制備微丸。觀察溶出實(shí)驗(yàn)、影響因素及加速實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,液相層積法的優(yōu)勢(shì)在于溶出較為完全,但在影響因素實(shí)驗(yàn)的高濕實(shí)驗(yàn)以及加速實(shí)驗(yàn)中均出現(xiàn)微丸略有變色的情況,出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因主要是含藥層以及隔離層都采用水溶性材料羥丙甲基纖維素E5,微量的藥物在微丸中質(zhì)量分?jǐn)?shù)梯度發(fā)生遷移,與腸溶材料接觸發(fā)生變色現(xiàn)象。但這種變色對(duì)于微丸穩(wěn)定性無明顯影響,耐酸性以及有關(guān)物質(zhì)限度均符合要求。c.蘭索拉唑?yàn)橥庀w,包括右旋體((R)-蘭索拉唑)與左旋體((S)-蘭索拉唑),常見的蘭索拉唑原料均為外消旋混合物,包括本實(shí)驗(yàn)作者所采用原料也是該混合物,武田公司的專利中曾討