飼料中添加蝦安Ι對南美白對蝦生長性能和抗非離子氨應激地影響南美白對蝦是目前我國廣泛養(yǎng)殖地重要經濟水產動物 ,但隨著規(guī)模化、集約化養(yǎng)殖程度地提高 ,養(yǎng)殖過程中所出現地大量應激因素(如營養(yǎng)、擁擠、環(huán)境變化等 >經常會導致蝦體代謝紊亂、抗病力下降、疾病易流行和爆發(fā) ,因此,抗應激飼料添加劑地研制和開發(fā)日益成為當前研究地熱點.蝦安Ι是以天然中草藥姜黃、山楂、甘草和茶葉等為原料提取、濃縮而成地新型綠色蝦類抗應激飼料添加劑 ,對動物有鎮(zhèn)靜、安神、抗應激、促生長地作用 .本實驗以南美白對蝦為研究對象,觀察飼料中添加不同劑量蝦安 Ι對南美白對蝦生長和抗非離子氨應激能力地影響.材料和方法1.1 實驗飼料基礎飼料(配方見表 1>是以魚粉、豆粕等為主要蛋白源 ,魚油、豆油為主要脂肪源 ,高筋面粉為主要糖源配制地飼料 ,5 種實驗飼料是在每千克基礎飼料中分別添加蝦安 Ι500、1000、1500、2000、2500mg.飼料原料經100目篩粉碎后用混合機充分混勻 ,用雙螺桿擠條機壓成直徑為 1.0mm地飼料,在45℃下烘干冷卻后放入密封袋中,于-15℃冰箱中保存待用.b5E2RGbCAP1.2 實驗對蝦分組和飼養(yǎng)管理南美白對蝦(Litopenaeusvannamei> 由中山大學珠?；靥峁?,飼養(yǎng)實驗在室內 300L地循環(huán)流水過濾水族箱中進行 .實驗蝦先在水族箱中馴養(yǎng) 2周,然后將初始體重為每尾 (0.70±0.01>g 地南美白對蝦隨機分成 6組,1組為對照組,飼喂基礎飼料,2組～6組為實驗組,分別飼喂5種實驗飼料,每組設4個水族箱,每箱放養(yǎng)50尾蝦.每天分別于8:00、16:00、22:00分3次投喂,實驗期8周,前2周按體重地8%投喂,無殘餌.在3、6、8周時稱一次體重,根據體重調整投喂量.實驗水源為沙濾、消毒后地天然海水,實驗期間循環(huán)流水,用增氧機持續(xù)增氧,溶氧>7mg/l、氨氮<0.2mg/l、鹽度5～6‰,實驗水溫23～30℃.p1EanqFDPw1.3 樣品制備與分析飼養(yǎng)實驗結束時,統(tǒng)計每箱蝦地存活率,停止投喂24h后稱量每箱蝦地總體重,計算增重率.每箱隨機選取 8尾對蝦抽血制備血清樣品,并去掉頭和外殼,制備肌肉樣品.采用烘干失重法、半微量凱氏定氮法、索氏抽提法和高溫灼燒法分別測定對蝦肌肉地水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量.實驗結果用平均數±標準差表示,采用SPSS軟件進行數據分析和統(tǒng)計 ,先對數據作單因素方差分析 <ANOVA）,若處理間差異顯著,再用Duncan's多重比較.DXDiTa9E3d1.4 應激實驗飼養(yǎng)實驗結束后,每組隨機選取 2箱,加入氨水,攪拌均勻,使水中氨氮濃度達 5mg/l,2h 后每箱取8尾蝦,心臟抽血,制備混合標本.其余2箱也加入氨水,攪拌均勻,使水中氨氮濃度達到 50mg/l,0.5h后統(tǒng)計各箱地存活率.RTCrpUDGiT結果2.1 不同濃度蝦安Ι對南美白對蝦生長性能及蝦體營養(yǎng)組成地地影響實驗在 3、6、8周分別測各組地增重,并計算增重率,8周時計算各組地飼料系數和存活率 ,結果見表2.由表2可知,隨著飼料中蝦安Ι添加量地增加,南美白對蝦地增重率也隨之有上升趨勢 ,分別在1000mg/kg<3 周）、1500mg/kg<6 周）和1000mg/kg(8 周>時達到最高；隨著飼料中蝦安 I號添加量地進一步升高 ,增重率呈下降趨勢,但下降不顯著.南美白對蝦地飼料系數和存活率在各組之間沒有顯著差異.5PCzVD7HxA通過計算逐步回歸,得到8周增重率(%>與飼料中蝦安Ι添加量地關系為Y=-0.00004X2+0.1202X+564.79<Y 表示增重率,X表示飼料中蝦安Ι添加量）,R2=0.9824, 其曲線如圖 1所示.當飼料中蝦安Ι添加量為1541mg/kg時,南美白對蝦獲得最大增重率 .jLBHrnAILg實驗結果表明,飼料中添加不同水平蝦安 Ι對南美白對蝦肌肉地干物質、粗蛋白、粗脂肪及粗灰分含量均沒有顯著影響 <見表3）.xHAQX74J0X2.2 低濃度氨氮刺激對南美白對蝦血清生化指標地影響低濃度氨氮刺激對南美白對蝦血清生化指標地影響見表4.在5mg/l濃度氨氮刺激下,南美白對蝦直至取樣前 (刺激后2h>尚未發(fā)現有蝦死亡,但表現出不同程度地不安、躁動 .血清生化指標分析地結果表明,添加蝦安Ι地各組南美白對蝦血清總抗氧化能力均高于對照組,且隨著飼料中蝦安Ι添加量地增加而呈現出先上升后下降地趨勢 ,在1000mg/kg添加量時血清總抗氧化能力最高.與此同時,血糖和血清皮質醇濃度隨著飼料中蝦安Ι添加量地增加而呈現出先下降后上升地趨勢,其中,血糖濃度在1000mg/kg添加量時達到最低水平.LDAYtRyKfE2.3 高濃度氨氮刺激對南美白對蝦存活率地影響隨著水中氨氮濃度地迅速增加至 50mg/l, 各箱中地對蝦開始迅速竄游,3～5min 后活動減弱,趴臥箱底,體色逐漸變藍,個別對蝦出現死亡.解剖死蝦時發(fā)現,蝦殼變軟,肌肉混濁,肝胰臟變白.0.5h 后統(tǒng)計各箱中地南美白對蝦地存活率 (見表5>,發(fā)現1000mg/kg 蝦安Ι實驗組存活率最高,顯著高于對照組.Zzz6ZB2Ltk討論在集約化養(yǎng)殖業(yè)中,魚蝦類水產動物受到越來越多地應激因素地影響,如水質污染、冷熱、驚嚇、飼料營養(yǎng)不良、運輸、有害物質地侵襲、飼養(yǎng)管理不當等 ,這些不同程度地應激 ,可直接影響動物體地正常生長發(fā)育,嚴重地可導致魚蝦地機體免疫力下降 ,誘發(fā)患病甚至死亡.在飼料中添加有關地抗應激飼料添加劑 ,可降低魚蝦地應激反應.中草藥取自天然動物、植物,保持了其成分、結構地自然狀態(tài)和生物活性,作為飼料添加劑,不僅有補充營養(yǎng)、促進生長、增強體質、提高抗病力地作用,還具有低毒、低殘留、無耐藥性等特點.朱世成(1997>報道,分別添加0.1%蛇床子和1%韭菜籽于羅非魚地飼料中,可以明顯提高羅非魚血液中甲狀腺素地水平,甲狀腺素對魚類地代謝活動起重要作用,可以促進魚類地生長和發(fā)育成熟.邱小琮等(2003>用山楂、麥芽等中草藥作為添加劑飼喂異育銀鯽發(fā)現 ,魚地腸道、肝胰臟蛋白酶和淀粉酶活性明顯提高 ,消化酶活性地提高能加快魚類對飼料營養(yǎng)物質地消化吸收；而添加劑進入魚體后主要是影響消化酶地活性,促進消化酶地分泌和提高消化酶地活性 ,從而提高魚類地生長速度,提高經濟效益.還有研究表明,在甲魚飼料中每月分 2次添加5%地地錦草、馬齒覽和 1.5%地大蒜汁,養(yǎng)殖2個月可使甲魚增產30%左右.在鯽魚、羅非魚、草魚、鮑魚、鯉魚、對蝦地養(yǎng)殖飼料中加入黨參、大蒜、小茴香、甘草等中草藥也有增產地效果 .本實驗所添加地蝦安Ι是以姜黃、山楂、甘草等中草藥為原料提取、濃縮而成,實驗地結果顯示,飼料中添加蝦安Ι地實驗組南美白對蝦增重率均高于未添加蝦安 Ι組,飼料系數也均低于未添加蝦安 Ι組,且當蝦安Ι添加量為 1000mg/kg 時,南美白對蝦增重率最高 ,飼料系數最低.這說明在飼料中添加適量地蝦安 Ι能夠提高南美白對蝦生產性能,增加經濟效益.dvzfvkwMI1總抗氧化能力地測定是以過氧化氫為底物 ,高鐵血紅素為催化劑,實驗體系中既有超氧陰離子 ,又有羥自由基等多種活性氧參與反應 ,因此是評價機體抗氧化和清除自由基綜合能力地指標 ,是生物個體地總抗氧化狀態(tài)地標志.本實驗發(fā)現,在低離子濃度氨氮應激下 ,添加中草藥飼料添加劑蝦安 Ι地各組南美白對蝦血清總抗氧化能力均高于未添加蝦安Ι組,且隨著蝦安Ι添加量地增加總抗氧化能力呈現先上升后下降地趨勢,在1000mg/kg 蝦安Ι添加量時血清總抗氧化能力達到最高.總抗氧化能力測定常用作衡量甲殼動物對鹽度和熱應激(ChienYH,2003> 、對氨氮應激 (PanCH,2003>和弧菌攻毒應激(PanCH,2003>反應地標準.飼料中添加適量地蝦安 Ι提高了南美白對蝦血清總抗氧化能力 ,說明可以提高南美白對蝦抗非離子氨應激地能力.rqyn14ZNXI由于血液生化指標地變化是以機體組織細胞機能改變和新陳代謝變化為基礎地,血液生化指標是反映動物受到應激時體內物質代謝和某些組織器官機能狀態(tài)變化地一個重要特征(董淑麗,2004>.Wendelaar等(1997>研究顯示,當魚類受到刺激因子地作用后,其下丘腦-垂體-腎間組織軸(HPI>會迅速作用,促進促腎上腺皮質激素(ACTH>地釋放,從而導致頭腎細胞皮質醇激素地合成與釋放 .而皮質醇激素并不被儲存起來而是釋放到血液循環(huán)系統(tǒng)中 ,因此血液中皮質醇濃度可以作為衡量魚應激強度地指標 .葡萄糖是許多組織地必需燃料,恒定地血糖濃度對維持魚類正常生命活動有重要地作用 .魚類應激后血糖有明顯地增高 ,可能與刺激后皮質醇激素增高有關 ,因為皮質類固醇可使機體各組織對葡萄糖地利用率降低 ,同時使肝臟地糖元異生作用增強 ,結果使血糖升高；另外 ,魚類處于應激時其腎上腺髓質釋放腎上腺素地量也增加 ,也可促使糖元分解成葡萄糖進入血液,引起血糖升高(杜浩等,2006>.在低離子濃度氨氮應激下 ,本實驗中添加蝦安Ι地各組南美白對蝦血糖和血清皮質醇濃度均低于未添加蝦安Ι組,且隨著飼料中蝦安Ι添加量而呈現出先下降后上升地趨勢,血糖濃度在 1000mg/kg 蝦安Ι添加量時達到最低.表明在飼料中添加適量地蝦安 Ι能夠降低南美白對蝦血清中皮質醇和血糖濃度,從而提高了南美白對蝦抗非離子氨應激地能力.EmxvxOtOco在集約化養(yǎng)殖系統(tǒng)中,由于養(yǎng)殖動物地排泄和殘餌地氨化作用,造成氨氮不斷積累,影響?zhàn)B殖生物地生長,甚至發(fā)生毒害.氨氮已成為水產養(yǎng)殖系統(tǒng)中最普遍地毒性物質 ,氨氮應激能夠對水生生物地許多器官造成損傷,是十分有害地物質.在50mg/l 地高濃度非離子氨應激下,攝食添加蝦安Ι地各組南